ẢNH HƯỞNG CỦA SỮA ĐẬU NÀNH LÊN MEN ĐẾNHỆ VI SINH VẬT ĐƯỜNG RUỘT CỦA CON NGƯỜI I-Chi Cheng, Huey-Fang Shang, Tzann-Feng Lin, Tseng-Hsing Wang, Hao-Sheng Lin, Shyh-Hsiang Lin TỔNG QUAN Mục
Trang 1ẢNH HƯỞNG CỦA SỮA ĐẬU NÀNH LÊN MEN ĐẾN
HỆ VI SINH VẬT ĐƯỜNG RUỘT CỦA CON NGƯỜI
I-Chi Cheng, Huey-Fang Shang, Tzann-Feng Lin, Tseng-Hsing Wang, Hao-Sheng Lin, Shyh-Hsiang Lin
TỔNG QUAN
Mục đích: Nghiên cứu ảnh hưởng của sữa đậu nành lên men đến vi sinh vật đường ruột của con người bằng cách kiểm ra sô lượng các loại vi sinh vật khác nhau phân lập từ các mẫu phân
Phương pháp: thiết kế thí nghiệm kiểu chéo Hai mươi tám người trưởng thành khỏe mạnh được mời tham gia thí nghiệm Từng đối tượng sẽ sử dụng 250 ml sữa hai lần một ngày, vào giữa bữa ăn Loại sữa dung là sữa đậu nành lên men hoặc sữa đậu nành thường Loại đầu tiên dùng trong 2 tuần rồi đổi sang loại thứ hai cho 2 tuần tiếp theo Mẫu phân được thu thập từ tất cả các đối tượng mỗi tuần, bắt đầu từ tuần thứ hai vào cuối thí nghiệm Các vi sinh vật được phân tích làBifidobacterium spp., Lactobacillus spp., Clostridium perfringens, coliform, và tổng số các sinh vật yếm khí
Kết quả: Trong giai đoạn sử dụnh sữa đậu nành lên men, số lượng vi khuẩn Bifidobacterium spp., Clostridium perfringens và Lactobacillus spp tăng lên Tuy nhiên số lượng Coliform lại giảm
Kết luận: Việc hấp thu sữa đậu nành lên men đáng kể cải thiện hệ sinh thái của đường ruột trong cơ thể bằng cách tăng số lượng chế phẩm sinh học
Trang 2GIỚI THIỆU
Probiotics là các vi khuẩn đường ruột có lợi cho sức khỏe Probootics làm giảm triệu chứng xấu khi dung nạp đường lactose, tăng sức đề kháng của ruột, ức chế các tế bào ung thư phát triển, điều chỉnh nồng độ cholesterol trong huyết tương , cải thiện chức năng tiêu hóa và kích thích hệ miễn dịch Ngoài ra, prebiotic là những thành phần thực phẩm có thể được sử dụng để nâng cao sự phát triển của probotics Một số loại prebiotics thường gặp là lactose , fructooligosaccharides và galactooligosaccharides
Đậu nành và các sản phẩm từ đậu nành được biết đến với các lợi ích cho sức khỏe Trong đậu nành, oligosaccharides được chứng minh là prebiotic Sự kết hợp của probiotic và prebiotic được gọi là Synbiotics Sữa đậu nành lên men, theo báo cáo trước đó , có thể được coi như là một sản phẩm synbiotic Như vậy, mục tiêu của chúng tôi là nghiên cứu tác động của sữa đậu nành lên men trên hệ vi sinh vật đường ruột của con người
1 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THỰC HIỆN
1.1 Đối tượng
Nghiên cứu này được sự chấp thuận của Ủy ban Đạo đức con người của Trường Đại học Y Đài Bắc (Đài Bắc, Đài Loan) Đối tượng tuyển dụng chủ yếu là trong khuôn viên của Đại học Y khoa Đài Bắc và không có bệnh cấp tính hoặc mãn tính, các vấn đề tiêu hóa, hoặc tiền sử uống thuốc kháng sinh gần đây Trước khi thực hiện nghiên cứu này, kết quả công bố được sự chấp thuận từ tất cả các đối tượng nghiên cứu Tổng số 36 người tham gia ngay từ đầu những người tham gia được khuyên nên duy trì phong cách sống của họ bình thường trong quá trình thử nghiệm
1.2 Thiết kế nghiên cứu
Một thiết kế chéo được sử dụng trong nghiên cứu này Các đối tượng được phân ngẫu nhiên vào hai nhóm A và B Trong nhóm A, đầu tiên các đối tượng sẽ sử dụng sữa đậu nành lên men, và sau đó chuyển sang dùng sữa đậu nành thông thường, trong khi nhóm B thì dùng sữa đậu nành thông thường trước Tổng thời gian tiến hành thí nghiệm là 9 tuần Thời gian hiệu chỉnh 2 tuần đã được thực hiện, tiếp theo là dùng nước uống thử nghiệm (sữa đậu nành) trong 2 tuần Trước khi chuyển sang uống nước thử nghiệm khác, thì người sử tham gia thí
Trang 3nghiệm có 2 tuần để cho thức uống dùng trong thử nghiệm cũ tiêu hóa hết Sau khi tất cả các đối tượng đã hoàn thành sử dụng hai loại thức uống thử nghiệm, sẽ có khoảng 1 tuần để tiêu hóa hết thức uống trước khi thử nghiệm chính thức kết thúc Sử dụng 250 mL thức uống sau mỗi lần ăn xong 30 phút, hai lần một ngày (500 ml / ngày) 3 ngày (chủ nhật, thứ 2 và thứ 3) ghi lại chế độ ăn uống đã được hoàn thành bởi các đối tượng sau mỗi tuần trong thời gian thí nghiệm
1.3 Phân tích mẫu và vi sinh vật
Khoảng 1 g mẫu phân của từng đối tượng được thu thập trong các tuần 2, 3, 4, 6, 7, 8,
và 9 để phân tích vi sinh vật Mẫu được lưu trữ ở nhiệt độ -20 trong 24 giờ trước khi đem đi phân tích Đối với quá trình phân tích, ta lấy 0,5g phần bên trong cuẩ mẫu phân (lấy mẫu nguyên liệu kị khí) được trộn đều với 15 ml dung môi trong điều kiện kị khí (bảng 1), tiếp theo là pha loãng để có được những nồng độ khác nhau (10-1 đến 10-8) Một số vi sinh vật được phân lập từ các mẫu phân sử dụng môi trường và các phương pháp được phát triển bởi Molly et al.[8] Vi khuẩn, môi trường và thời gian nhân giống được liên kê trong bảng 2 Bắt đầu từ nồng độ thấp nhất, 50 ml dung dịch được cấy lên môi trường khác nhau bằng cách sử dụng đổ đĩa Quá trình nhân giống Clostridium perfringens, 1 ml dung dịch với nồng thích hợp, được xác định bởi kết quả của một thí nghiệm trước, đã được trộn đều với môi trường TSC (không có lòng đỏ trứng) bằng cách sử dụng phương pháp đổ đĩa, tiếp theo là trộn với môi trường TSC bình thường sau khi môi trường lỏng đông đặc, đĩa được đặt trong một buồng yếm khí Khi đếm khuẩn lạc, đĩa xuất hiện từ 30 – 300 khuẩn độ Số lượng vi khuẩn được trình bày như là pha log CFU/g trọng lượng ướt của phân Công thức tính toán được liệt
kê như dưới đây và được dựa trên vi khuẩn học FDA Hướng dẫn phân tích Bifidobacterium spp., Lactobacillus spp, coliform, và tổng số các sinh vật yếm khí: CFU/đĩa x 20 (50 μL/đĩa)
x hệ số pha loãng x 15 mL/ khối lượng mẫu (g); và Clostridium perfringens: CFU/đĩa x hệ số pha loãng x 15mL/ khối lượng mẫu (g)
Trang 4Bảng 1: Thành phần của môi trường kị khí
Bảng 2: Vi sinh vật phân tích và môi trường cấy giống, thời gian, nhiệt độ
Môi trường Vi sinh vật Màu sắc khuẩn lạc Điều kiện nuôi cấy
Bifidobacterium spp Xanh lá cây 48 h, 35-370C Lactobacillus spp Cam đỏ 48 h, 35-370C Clostridium
perfringens
Màu trắng với màu đen trung tâm
24 h, 35-370C
Coliform Màu đỏ kim loại 24 h, 35-370C Tổng vi sinh vật hiếu
khí
Trắng 48 h, 35-370C
1.4 Phân tích thống kê
Tất cả các dữ liệu được trình bày như là giá trị trung bình ± SD Phân tích một chiều phương sai (ANOVA), một phía và kết hợp t-kiểm tra được thực hiện bằng cách sử dụng SAS phiên bản 8.1 P <0,05 là mức ý nghĩa
Trang 52 KẾT QUẢ
Trước khi thí nghiệm bắt đầu, có 8 người rút khỏi nghiên cứu vì lý do cá nhân Vì vậy, có tổng cộng 28 người tham gia và hoàn thành cả hai giai đoạn thử nghiệm Như thể hiện trong bảng 3, không có sự thay đổi về trong lượng, chiều cao hoặc BMI giữa trước và sau khi nghiên cứu
2.1 Nhóm A (nhóm uống sữa đậu nành lên men trước, sau đó là sữa đậu nành thông thường)
Trong nhóm này (Hình 1A), có thể thấy rằng thời gian đầu tiên khi uống sữa đậu nành lên, hệ
vi sinh vật coliform và Clostridium perfringens giảm đáng kể (p<0,05) Trong thời gian này,
số lượng của Lactobacillus spp và Bifidobacterium spp tăng đáng kể (p<0,05) Tỷ lệ của Lactobacillus spp và Bifidobacterium spp trên Clostridium perfringens cũng tăng trong giai đoạn đầu tiên này Trong giai đoạn thứ 2 khi tiêu thụ sữa đậu nành, hệ vi sinh vật coliform và Clostridium perfringens và tỷ lệ của Lactobacillus spp và Bifidobacterium spp trên Clostridium perfringens không thay đổi
2.2 Nhóm B (nhóm uống sữa đậu nàng bình thường trước, sau đó uống sữa đậu nành lên men)
Trong nhóm này (hình 1B), trong giai đoạn đầu và giai đoạn sau, tổng số Lactobacillus spp tăng đáng kể (p<0,05) Trong giai đoạn sau, số lượng coliform và Clostridium perfringens giảm đáng kể (p<0,05), trong khi số lượng Bifidobacterium spp lại tăng đáng kể trong giai đoạn sau này (p<0,05) Vào cuối giai đoạn đầu và giai đoạn sau, tỷ lệ Lactobacillus spp trên Clostridium perfringens tăng đáng kể (p<0,05) Tổng số vi khuẩn kỵ khí trong thay đổi
3 BÀN LUẬN
Tổng số vi sinh vật trong ruột nằm trong pha cân bằng Khi số lượng các chế phầm sinh học tăng, số lượng vi khuẩn có hải sẽ giảm Như đã thấy trong kết quả, ta thấy rằng khi đối tượng nghiên cứu sử dụng sữa đậu nành lên men, hệ sinh vật đường ruột của họ có xu hướng
Trang 6được cải thiện thông qua việc lượng vi khuẩn có lợi tăng Hiệu quả được duy trì 3 tuần sau khi ngừng sử dụng sữa đậu nành lên men Mặt khác, kết quả cho thấy sử dụng sữa đậu nành lên men có tác dụng làm tăng lượng Lactobacillus spp Điều này có thể là do đậu nành có chứa một số loại oligosaccharides như raffinose và stachyose có thể được Lactobacillus spp
sử dụng như nguồn năng lượng; điều này làm giảm khí sinh ra trong ruột Có thể thấy rằng, bằng cách nuôi cấy chế phẩm sinh học khác nhau trong sữa đậu nành, lượng raffinose và stachyose làm giảm sản lượng khí trong dạ dày trong khi nồng độ sucrose, glucose, galactose, acid acetic, và acid amin tự do tăng Sự gia tăng chế phẩm sinh học làm giảm nguy
cơ rối loạn chức năng đường tiêu hóa do bị vi khuẩn có hại xâm nhập, và do đó, duy trì được chức năng chính của đường tiêu hóa, đó là chức năng bảo vệ Bên cạnh những tác động của việc sử dụng sữa đậu nành lên men được xác định trong thí nghiệm này, các sản phẩm đậu nành được biết đến với lợi ích cho sức khỏe Đậu nành được biết đến với nguy cơ giảm ung thư, làm giảm mức độ lipid trong máu và cholesterol, ngăn ngừa quá trình oxy hóa và VLDL
và LDL, do đó làm giảm nguy cơ mắc bệnh tim mạch
Tóm lại, việc sử dụng đậu nành lên men có lợi cho hệ vi sinh vật đường ruột bằng cách tăng lượng vi khuẩn có lợi và giảm lượng vi khuẩn có hại Ngoài ra, đậu nành lên men có thể cung cấp các chất khác như isoflavone và saponin mà không có trong các sản phẩm sữa bò