Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)

Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống lan Thạch hộc (Dendrobium nobile Lindt) từ hạt bằng phương pháp nuôi cấy mô tại trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Khóa luận tốt nghiệp)

cô giáo và giáo

tài

x

Sinh viên

DANH M C CÁC B NG

B ng 3.1: Các hóa ch t, d ng c và thi t b s d ng trong nuôi c y 23

B ng 3.2: ng hi u qu kh trùng c a NaOCl n , th i gian khác

n kh o v t li u s ch n m và vi khu y (sau 1 tu n theo dõi) 24

B ng 3.3: ng c a m t s lo ng (MS, 1/2MS, B5, SH và WPM)

n t l n y m m h t lan Th ch h c ( sau 12 tu n theo dõi) 25

nhân c m ch i lan Th ch h c tái sinh t h t 26

B ng 3.5: ng h p ch t h n nhân nhanh c m ch i lan Th ch h c tái sinh t h t (sau 4 tu n theo dõi) 27

B ng 3.6: ng c a n NAA và than ho n kh lan

Th ch h c (sau 4 tu n theo dõi) 27

B ng 3.7: ng c a m t s giá th n kh ng c a cây lan

lan Th ch h c tái sinh t h t 34

B ng 4.4: ng c a h p ch t h n nhân nhanh c m ch i lan Th ch h c tái sinh t h t 37

B ng 4.5: ng c a n NAA và than ho n kh lan

Th ch h c 39

B ng 4.6: ng c a m t s giá th n kh ng c a cây lan

Th ch h c .41

VW: Vacin and Went

WPM: Wood Plant Medium

M C L C

Ph n 1: M U 1

1.1 t v 1

1.2 M c tiêu và yêu c u c tài 2

1.2.1 M c tiêu c tài 2

1.2.2 Yêu c u c tài 2

tài 2

Ph n 2: T NG QUAN TÀI LI U 3

2.1 Gi i thi u chung v hoa lan 3

2.1.1 Ngu n g c và phân lo i 3

m sinh h c 4

ng 6

2.1.4 Giá th tr ng lan 8

2.2 Gi i thi u v gi ng lan Dendrobium 9

2.2.1 Phân lo i và phân b 9

c di m hình thái 9

u ki nuôi tr ng 12

2.3 Gi i thi u v lan Th ch h c 13

2.3.1 Ngu n g c và s phân b 13

2.3 m hình thái 14

2.4 Giá tr c a lan Th ch h c 15

2.4.1 Giá tr c li u 15

2.4.2 Giá tr kinh t 17

2.5 Tình hình nghiên c u trên th gi c 18

2.5.1 Tình hình nghiên c u trên th gi i 19

2.5.2 Tình hình nghiên c c 19

Ph n 3: NG, N U 23

ng, v t li u và ph m vi nghiên c u 23

m và th i gian ti n hành nghiên c u 23

u ki n nuôi c y 23

3.4 Hóa ch t và thi t b 23

3.5 N i dung nghiên c u 24

nghiên c u 24

3.6.1 Nghiên c u hi u qu kh trùng c a NaOCl n , th n kh o v t li u s ch n m và vi khu y (sau 1 tu n theo dõi) 24

3.6.2 Nghiên c u ng c a m t s lo ng (MS, 1/2MS, 2/3MS, B5, n t l n y m m h t lan Th ch h c ( sau 12 tu n theo dõi) 25

3.6.3 Nghiên c u ng n c a m t s ch ng và h p ch t h n nhân nhanh c m ch i lan Th ch h c tái sinh t h t (sau 4 tu n theo dõi) 26

3.6.4 Nghiên c u ng c a n NAA và than ho n kh r lan Th ch h c (sau 4 tu n theo dõi) 27

3.6.5 Nghiên c u ng c a m t s giá th n kh ng c a cây lan Th ch h c n theo dõi) 28

3.7 Ch tiêu theo dõi 28

lí s li u 29

Ph n 4: K T QU VÀ TH O LU N 30

4.1 K t qu nghiên c u hi u qu kh trùng c a NaOCl n , th i gian khác n kh o v t li u s ch n m và vi khu y 30

4.2 K t qu nghiên c u ng c ng (MS, 1/2MS, 2/3MS, B5 và n t l n y m m hat lan Th ch h c ( sau 12 tu n theo dõi) 32

4.3 K t qu n ng c a m t s ch ng và h p ch t h n nhân nhanh ch i lan Th ch h c tái sinh t h t (sau 4 tu n theo dõi) 33

4.3.1 K t qu nghiên c u ng n BA, Kin n kh nhân c m ch i lan Th ch h c tái sinh t h t 33

4.3.2 K t qu nghiên c u ng c a h p ch t h n nhân nhanh c m ch i lan Th ch h c tái sinh t h t 36

4.4 K t qu nghiên c u ng c a n NAA và than ho n kh

lan Th ch h c (sau 4 tu n theo dõi) 394.5 K t qu nghiên c u ng c a m t s giá th n kh ng và phát tri n c a cây lan Th ch h c con n theo dõi) 41

Ph n 5: K T LU N VÀ KI N NGH 43

5.1 K t lu n 435.2 Ki n ngh 43

v màu s a hoa Ngoài ra loài hoa này còn có giá tr c li u

Lan Th ch h c thu c chi Dendrobium ng cây quý hi m

u làm nên giá tr c li u c a loài lan này chính là h p ch t alkaloid V i giá

tr c li u lan Th ch h khai thác t i m c b tuy t ch ng trong t nhiên[8], [49] Hi n nay Lan Th ch h c n m trong danh m c a cu Vi t

Chính vì v y chúng tôi ti n hành nghiên c tài Nghiên c u nhân gi ng

lan Th ch h c (Dendrobium nobile Lindt) t h t b y

mô t i h c Nông lâm Thái Nguyên v i m o t n ngu n

c li ng th i góp ph n phát tri n m t loài thu c nam có giá tr

n nhân nhanh c m ch i lan Th ch h c.

- nh n NAA và than ho t tín n kh lan Th ch h c

- nh lo i giá th thích h ng và phát tri n c a cây con

- khoa h c

K t qu nghiên c u s xây d c m t bi n pháp k thu t nhân gi ng Lan

Th ch h c b in vitro

- c ti n

xu c quy trình nhân nhanh gi ng Lan Th ch h c b

nuôi c y in vitro, m b o cung c p s ng l n cây gi ng có ch ng

u cho s n xu t

theo t c phân b vùng r ng l n, tr i dài t n b c

c c, t ng b ng t t, các loài lan r t khác nhau Các loài lan ch y u s ng trên cây cao, s ng bi c g i chung là phong lan Các loài m t g a lan và m t s loài m i

là th ch lan [8]

nguyên [20] Vi t Nam, nh ng nghiên c u v lan bu u không rõ r i

u tiên kh o sát hoa lan Vi t Nam là ông Gioolas Noureiro nhà truy n giáo B

u tiên Vi

g i tên các cây lan trong cu n phía nam Vi t Nam: Alrides,

Phagius và Sarcopodium c BenTham và Hooker ghi l i trong cu

L p: Liliospida

B : Asparagales Phân h : Orchidaceae

m i nhau G m các gi Vanda, Aerides, Phalaenopsis

- Nhóm ph lá d p th ng hay tròn (Campylocentrinae): Papilionanthe, Luisia

m nh ng liên t vào cách ra hoa nhóm này chia thành hai nhóm ph :

- Cymbidium, Dedrobium, Oncidium

- Nhóm ra hoa nh: Cattleya, Laelia, Epidendrum

* Ngoài ra còn có m t s gi ng mang tính ch Centropetatum, Phachyphllum, Dichaea

Theo nhi u nhà nghiên c u v hoa c i h c Nông nghi p Hà N i,

v i kho ng 897 loài phong lan hi n có và khí h u thích h p, ngu n nguyên li u làm giá th d i dà ng, phát tri n Vi t Nam có th tr thành m c

s n xu t hoa phong lan l n trong khu v c [8].

m sinh h c

Gi hành (thân gi ): Ch xu t hi n ph n gi hành c n thi t cho ng, phát tri n c a lan Gi i ch a di p

l ph n d tr nhi u ch c c n thi t cho s phát tri n c a

gi hành m i [20]

Thân: Lan có 2 lo n [20].

+ C gi r ng: Hình c u ho c hình thuôn dài x p sát nhau hay r i rác

u ho c hình tr x p ch ng ch t lên nhau thành m t thân gi

+ C u t o c gi : G m nhi u mô m m ch a nhi u d ch nh y, phía ngoài là l p

bi u bì v i vách t bào dày, nh n bóng b o v , tránh s m c do ánh sáng m t tr i

c gi u có màu xanh bóng, nên cùng v i lá nó làm nhi m v quang h p

Lá: các loài phong lan là cây t ng, nó phát tri h th ng lá Hình d ng c i r t nhi u, t lo i lá m n lo i lá phi n m ng Phi n

lá tr i r ng hay g p l i theo các gân vòng cung hay ch g p l i theo gân hình ch V

m hay tía, m t trên l i kh m nhi u màu s c s c s [20]

R : Phong lan thu c h s ng ph ng trên các cây thân g khác Các lo i thân g n c dài, ng n, m p hay m m l i thành các b c bi i v i lan công nghi p (nuôi c ng

s d ng m t s giá th n, than c R làm nhi m v h p thu ch t dinh c bao b i l p mô hút dày, m Bao g m: Nh ng l p t bào ch t

h y d c dài trên v cây, l ng trên không khí [7], [20]

ng tính, r t hi m các lo p tính và nh d ng

ng có màu s c gi ng nhau M m phía trên hay

k bên trong và xen k v ng nhau v hình

d c, màu s c Cánh còn l i n m i, có hình

d ng và màu s c khác h n v i các cánh còn l i g i là cánh môi Cánh môi quy t

nh giá tr th m m c a hoa lan gi a hoa có m t tr n i lên b ph n sinh d c

c a cây, giúp cây duy trì nòi gi ng Tr g m nh và nh y, sau khi th ph n các cánh hoa héo, cu ng hoa hình thành qu lan [7], [8], [20]

Qu và h t: Qu lan thu c lo i qu nang, n ra theo 3- ng n t d c, qu

có d n hình tr ng n phình gi a Khi chín qu n ra và m nh vcòn dính l i v i nhau nh và phía g c m t s loài qu ch m theo 1-2 khía d c, th m chí không n t ra, và h t ch ra kh i v qu khi v này m c nát [8]

H t lan r t nhi c nh H t ch c u t o b i m

trên m t m i nh , x p, ch y không khí H ng thành sau 2-18 tháng

H t phong lan không có n n thành cây Các loài lan r ng ch y u nh n m c phát tri n thành cây

M thành công trong vi c thay th n m b ng

ng ng th gieo h n r ng các bình c y ch ch a

th ch và mu i khoáng thì kh y m m là r t ít th u có

n m thì h t lan n y m m r t s m Ông nh n th y s khác nhau gi a cây lan và h t lan

là vi c s d ng CO2 trong không khí: T CO2 c, cây lan t o ra hydratcacbon theo ph n ng:

n CO2 + 2n H2O (CH2O)n + n O2 + n H2O

Hydrat cacbon (CH2O)n và mu i khoáng là do r mang l i, cây lan ng h p

c các ch t c n thi t cho s phát tri ng h t lan không m c b i

Sau khi th tinh, c n th i gian t 6 tháng t qu m

b o thành công trong vi c t o cây lai b ng k thu t lai gi ng t 2 loài lan có nhi m s c

vadolin có tr c vôi vào v t c tránh nhi m trùng và cu i cùng thay ch u cho cây [18].

M n mà có hi u qu là l ng bu c vào thân cây và d n d n xi t l i trong m t th i gian, m ch d n nh a s b c ch là nguyên nhân kích thích m c ch i m i Khi ch i nhú ra kh i thân, g ng ra, cây con s l n d i cây con phát tri n thành th c và m c r , ta s c t cây lìa

kh i thân m V có cây con m i mà s c kh e cây m v n bình t ng, không b s c và v m b o ra hoa trong mùa ti p theo

+

M t s lo i kích thích t c dùng có hi u qu rõ r t và nhanh chóng t i s

m c ch i các loài lan V i dung d ch kích thích t pha s

và r , ch sau m t tháng có d u hi u c a s m c ch i Có th phun 2 l n cách nhau

có k t qu ch c ch n Ch c dùng thu c nhóm cytokinin (BAP, Kinetine ) v ng 5ppm [18]

+ o cây con trên phát hoa

Sau khi cây lan tr hoa, c t b ph n ng n phát hoa ch l i 4 m t phía g c

r i bôi Ianilin có b sung thêm acid cinnamic 50mg/ml + BAP 5mg/ml Sau 4-8

tu n, cây con s m c v trí m t và r c t o ra khi cây con l n d n Lúc này có

th c ng cây con trong ch u

ph c t p [11].

Theo Hu i (2005) [37], tên Dendrobium có ngu n g c t ch

và bios là tôi s ng, Dendrobium là gi ng ph sinh,

Vi t Nam, Dendrobium n 100 loài, x c phân bi t

b ng thân (gi hành), lá và hoa [19]

c di m hình thái

Theo Nguyên Công Nghi p (2004) [19], thì không có m t hình d ng chung

nh t v hoa và d ng cây do s ng quá l n, phân b r ng rãi

Riêng gi ng lan Dendrobium u có b ph , thân, gi

Thân: Theo Nguy n Công Nghi p (2004) [19], lan Dendrobium thu c nhóm

a thân (còn g i là nhóm h p tr c) có h th ng nhánh n m ngang bò dài trên giá th

ho c n t g i là thân r

Theo Tr o (1999) [1] M t s Dendrobium lá có các m m non, là

lo i ch ng tàn chúng vàng úa và r ng vào mùa thu, thân phì to gi không

Lá có hình kim, tr hay có rãnh hay phi n m ng D ng lá m m m i m ng

m hay nh t tùy thu c vào v trí s ng c a cây Phi n

lá tr i r ng hay g p l i theo g t hay ch g p l i theo gân

không phát tri n hay gi m h n thành v y [11]

Các loài thu c gi ng Dendrobium vùng nhi i nói riêng và h Orchidaceae

ng khi

Hoa: Theo Nguy n Công Nghi p (2004) [19], Dendrobium thu c nhóm ph

ra hoa nách lá Ch i hoa m c t các m t ng gi a cá t lá trên thân g n ng n và

c ng n cây S bi u hi c khoa ra hoa khác bi có nhi u loài r ng h t lá t c

Gi ng Dendrobium ng thì cho thành t ng chùm, phát hoa dài

và th i gian ra hoa trung bình 1-2 tháng [19]

Qu : H u có qu thu c qu nang, khi h t chín, các nang bung

ra ch còn dính l i v i nhau nh và g c m t s loài, khi qu chín qu không

n t ra nên h t ch ra kh i qu khi qu b m c nát [11]

ng và ch t khoáng, m t khác giúp cây bám ch t vào giá

th , không b gió cu n M t s loài có thân lá kém phát tri n th m chí tiêu gi m hoàn toàn, có h d ch a di p l c t giúp cây h p th ánh sáng c n th t cho s ra

hoa và quang h p R c a lan Dendrobium không ch c l nh, n u b l nh trong

th gian dài, r cây s b m c nát và cây b ch t R lan Dendrobium ng

, Cattleya thu c lo i r bán gió [11], [19].

Theo Hu i (2005) [37], n ng có r nh

ng r t nhi u r ch y u bám vào giá th ng ch t dính vào giá th c, cho nên khi tr ng vào ch u, ph giá th nhi n

àn b r u bám vào giá th , vào thành ch u, ch có m t s ít r chìa ra

i v i r lan r bán gió ph i tr ng v i giá thê nh b

r c hút nhi ng ch t

Giá th c a lan Dendrobium có c u t thu c gi ng

Cattleya u ph i th c Tuy nhiên do

b c và c u trúc th c v t v i gi hành có thân, các loài thu c gi ng

Dendrobium có th dùng giá th Cattleya c làm

th i m t s loài lan Dendrobium có th phát tri n trên các giá th à

Bón phân vào sáng s m, không bón vào lúc n nh k bón phân lên

lá b ng phân cân b ng NPK theo t l 1:1:1, k t h p bón phân giàu lân, kali, theo t

l NPK 15:20:25, có th ph i h c phân chu ng C n ng ng bón phân 2-3

-1.5mg/l), IAA (0.2-1.0mg/l), 6-BA (1.0-

2.3

2.3.1 Ngu n g c và s phân b

(Dendrobium nobile Lindt) có tên khác là Kim Th ch H c [32].

Th ch h c phân b Vi t Nam, Lào, Trung Qu c, Myanma và nhi u

Giang, Qu ng Tây, H Nam, Vân Nam, Quý Châu Chi Th ch h c Trung Qu c có

c kia Trung Qu c có 9 lo i Tiên th m Th ch h c r

ô, Hoa giáp ph i m

i tiên th u v c a 9 lo i tiên th o trên

B i v y, Th ch h c m c v c li u quý hi m truy n th c C ng hòa nhân dân Trung

t b t trong các loài Th ch h c Hi n nay trong

[5], [15].

-tháng 4-6

-1-1]

Trong các lo c tr ng t i Vi t Nam thì lan công nghi p cho

hi u qu kinh t i cao Giá c a m t ch u lan có th cho thu nh p t 100.000

-ng/cây [4]

1.000

phân sinh bên c a Cymbidium ng l c K t qu là mô c y

l n lên r t nhanh Ch sau 4 - 6 tu n s xu t hi n các th gi

c y chuy ng m i T các protocorm có th tái sinh thành cây [18 ]

y mô phân sinh ng n và mô

phân sinh bên c a gi ng Dendrobium ng Knudson l c

d c + 1 ppm NAA K t qu là: Mô phân sinh ng n cho k t qu r t

t t, mô phân sinh bên ph n cu i thân cho k t qu ng Knudons C, còn

mô c y t cu ng non không t o protocorm [18]

- Mosich, Ernest A.Ball, Josep y thành

công n t Dendrobium t o ch i [18]:

c chu i t o r c chu i t o r K t lu n

ch i c a n ng knop b u phát tri n sau 2 tu c c y chuy n

ng m i, ph n l n r c a ch i hình thành trong th i gian này

y mô phân sinh ng n và mô phân sinh

c d a + 1ppm NAA K t qu là cây non s hình thành trong th i gian t 6

-8 tu n [17]

2.5.2 Tình hình nghiên c c

Tâm và cs nghiên c u trên gi ng lan Dendrobium E.R

ng nghiên c u là ch i và qu c a gi ng Dendrobium E.R, t o ra ngu n v t

b sung h ng t ng s c s ng và t o cây hoàn ch nh

n Quang Th ch và cs nghiên c u trên gi ng lan h p

(Phalaenopsis) v i qu sau khi th ph n t chín thu n th c và có

kh y m m t t nh t (95 - 100 %), th i gian kh trùng thích h p cho t l m u nhi m th p, m u s ch s ng cao là kh trùng kép 5 phút + 1 phút vi c s d ng ngu n

v t li u kh ng (lá non, m t ng nh hoa)

n h u tính (h t), k t qu c d a + 10 ng saccarose + 6,5g agar +30 g khoai tây + 30 g cà r t + 1g pepton thích h p cho nhân

t o ch i và lá m i cao nh t (sau 6 tu n nuôi c y) Khi b sung k t h p NAA 0,3 mg/l

v i BAP 2 g/l cho h s nhân ch i và t o lá cao nh t (1,80 và 2,04) B sung NAA

0,3 mg/l có ng t n kh và phát tri n c a b r (s r t 15,83 cái/cây và chi u dài r t 2,3 cm) Khi ra cây trên 3 n n giá th : rêu ngo i, rêu ngo u cho t l s ng khá cao (57,89 % - 67,67 %) Trong

rêu ngo t t l s ng cao nh t 67.67 % [28]

n Thanh Tùng và cs, nghiên c u kh in vitro cây M Dung D Lan Vanda denisoniana benson c: Khtrùng qu M Dung D Lan b ng HgCl2 v i n 0,5% trong 10 phút cho t l

s ng và t l không nhi m cao (81,82 %) ng MS b sung kinetine 0,5 -1,5 mg/l cho t l n y m m cao (>75 %), cao nh t n t 92,31 %)

N NAA t y m m c a h t là t 0,1-0,5 mg/l (t l n y

m m > 85%) MS +BAP 0,5 mg/l cho h s nhân cao nh t (2,7 ch i/protocorm)

N kinetine t Dung D Lan là 0,5 mg/l [30]

Ngô Xuân Bình và c ng s nghiên c t nhân gi ng

n (Rhynchostylis retusa [L.] blume) b y

mô t bào ng MS là t t cho s n y m m c a h t

ng th i, nhóm tác gi cho r ng cytokine có ng rõ r n k t qu tái sinh h t Tuy nhiên, khi s d ng k t h p gi a BA và Kinetine v i t l kinetine 0,1 mg/l + BA 0,3 mg/l cho t l n y m m cao nh t 86.7 % [3]

Nga và cs, xây d ng quy trình nhân nhanh gi a lan

H ng Hoàng (Cymbidium iridioides) b t nuôi c y mô t o k t qucác ch c t 4-6 cm ho c h c s d ng làm m u c ng

kh ng m u c y là: MS + saccarose 20 g/l + agar 0,65 g + BA 1,5 ppm (ho c 2

gieo h t là: MS + sacarose 10 g/l + pepton 1 g + than ho t tính 1 g/l+ agar 6,5 g ng thích h nuôi c y lát m nh là: MS + 1 ppm

K + sacarose 20 g/l + Kinitine 1 ppm (ho c BA 0,5 ppm) + agar 6,5 g/l Nghiên c

ng t t o cây hoàn ch nh là MS + than ho t tính 0,1 g/l+ sacarose 25 g/l [17]

in vitro p (Dendrobium

chysotoxum) m t ch ng K t qu ra r ng nguyên li u

s d ng là qu ng thích h p cho n y m m và phát sinh protocom

c a h n có sucarose 20 g/l + agar 8 g/l + ND 150 ml/l + BAP2,0 mg/l ng nhân nhanh protocom t t nh n có sucarose 20 g/l + agar 8 g/l + ND 150 ml/l + BAP n có sacarose 30 g/l + agar 8 g/l + THT 1 g + ND 150 ml/l + BAP 2,0 mg/l + NAA 1,0 mg/l thích h p cho tái sinh ch i t ng c a ch i in vitro n có sucarose

20 g/l + agar 8 g/l + ND 150 ml/l + NAA r c a ch i in

vitro [23].

n Th ng in vitro loài lan Dendrobium

fimbriatumhook (Hoàng th o Long nhãn) K qu nghiên c rõ: Nguyên li u

s d ng là qu lan 3 tháng tu ng thích h p cho n y m m là và phát sinh protocom c a h ng MS + ND 100 ml/l + saccarose 10 g/l + agar 6,0 g/l

ng nhân nhanh protocom t t nh ng KC + ND 100 ml/l + sacarose 10 g/l + khoai tây 80 g/l + agar 6,0 g ng MS + ND 100 ml/l + sacarose 20 g/l + chu i chín 60 g/l + agar 6,0 g ng là

thích h p cho nhân nhanh ch i in vitro ng t o cây hoàn ch nh là RE + THT 1 g/l + agar 6,0 g ng [25]

c Lan và cs, nghiên c u nhân gi ng in vitro loài lan b n

a Dendrobium nobile Lindl (Th ch h c) nh m b o t n và phát tri n loài lan quý

thu c chi Hoàng th o, có giá tr th m m c li t

ch ng K t qu cho th y nguyên li u s d ng thích h p là qu lan 5 tháng tu i, môi

n Th ng in vitro lan Dendrobium

offcinale Kimura et Migo (Th ch h c Thi t bì) M c s d ng làm thu c và th c ph m ch a b nh ti ng và các b c

i hóa r ng rãi trên th gi i K t qu nghiên c rõ: Nhân gi ng

b ng gieo h ng VW + saccarose 10 g/l + agar 6 g/l + ND 100 ml/l

ng Nhân nhanh c m ch i t t nh ng MS + ND 100 ml/l + sacarose 20g/l + agar 6g/l + chu i chín 60 g ng Nhân gi ng vô tính thông qua nuôi c n thân mang m t ng s d ng thân in vitro mang 2 m t ng

và nuôi c ng MS + sacarose 20 g/l + ND 100 ml/l + BA 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l + agar 6 g ng t o cây hoàn ch nh là RE + 10 g/l sacarose + agar 6 g/l + THT 0,3 g/l + NAA 0,5 mg/l ng [26]

Ph n 3

- ng nghiên c u: Gi ng hoa lan Th ch h c (Dendrobium nobile Lindt)

kh e m nh, s ch b c thu th p t Thái Nguyên

- V t li u nghiên c u: Qu lan Th ch h c 6 tháng tu i thu th p t Thái Nguyên

- Ph m vi nghiên c u: Nghiên c u kh i t h t, nhân nhanh,

m: Phòng nuôi c y mô t bào th c v t Khoa CNSH - ng

i h c Nông lâm Thái Nguyên

N i dung 4: Nghiên c u n NAA và than ho n kh

lan Th ch h c (sau 4 tu n theo dõi)

N i dung 5: Nghiên c u lo i giá th thích h ng và phát tri n

c a cây con (sau 4 tu n theo dõi)

- các thí nghi m chúng tôi b trí ng u nhiên hoàn toàn v i 3 l n nh c l i

3.6.1 Nghiên c u hi u qu kh trùng c a NaOCl n , th i gian khác

3.6.3 Nghiên c u ng n c a m t s ch ng và

h p ch t h n nhân nhanh c m ch i lan Th ch h c tái sinh t h t (sau 4

tu n theo dõi

3.6.3.1 Nghiên c u ng n m t s ch n

kh m ch i lan Th ch h c tái sinh t h t

Các protocom (c m ch i) lan Th ch h c 12 tu n tu c g p sang các môi

ng MS có b sung các ch ti n hành nhân nhanh

B trí thí nghi m: M i công th c c y 5 bình, m i bình 5 c m ch i có chi u cao 5mm

3.6.3.2 Nghiên c u ng h p ch t h n nhân nhanh c m ch i lan

Th ch h c tái sinh t h t (sau 4 tu n theo dõi)

- B trí thí nghi m: M i công th c c y 5 bình, m i bình 5 c m ch i có chi u cao 5mm Các công th c b trí c th

3.6.4 Nghiên c u ng c a n NAA và than ho n kh

ra r lan Th ch h c (sau 4 tu n theo dõi)