Khao sat thanh phan hoa hoc cua cao ethyl acetate cua cay thu lu canh (physalis agulata l )

KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETHYL ACETATE CỦA CÂY THÙ LÙ CẠNH PHYSALIS AGULATA L.. Mục tiêu đề tài 3 Nghiên cứu thành phần hóa học của cây Thù lù cạnh Khảo sát hoạt tính sinh học

KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC

CAO ETHYL ACETATE CỦA

CÂY THÙ LÙ CẠNH (PHYSALIS AGULATA L.)

THUỘC CHI PHYSALIS,

HỌ CÀ (SOLANACEAE)

Cán bộ hướng dẫn

TS Tôn Nữ Liên Hương

Khoa Công Nghệ – Trường Đại học Cần Thơ

Sinh viên thực hiện

Nguyễn Trương Thúy An MSSV: 2112117 Lớp Kỹ thuật hóa học – K37

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

KHOA CÔNG NGHỆ

BỘ MÔN CÔNG NGHỆ HÓA HỌC

Nội dung báo cáo

1 Mục tiêu đề tài 3

Nghiên cứu thành phần hóa học

của cây Thù lù cạnh

Khảo sát hoạt tính sinh học của cao chiết

Cô lập và xác định cấu trúc hóa học 01 hợp chất

trong cao ethyl acetate

Thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định

2 Tổng quan

Giới thiệu chung về cây Thù lù cạnh

Tên khoa học: Physalis angulata L

Ở Việt Nam

1

2 Tổng quan

Công dụng của cây Thù lù cạnh

Trị các bệnh sốt do siêu vi, sốt xuất huyết, sởi, hồng ban,

thủy đậu, bệnh tay chân miệng,…1

1 Đỗ Huy Bích và ctv, 2006 Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam Tập II Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ

thuật Hà Nội Trang 792-793

2 Salgado, E.R et al., 2013 Physalis angulata L (Bolsa Mullaca): A Review of its Traditional Uses, Chemistry and

Pharmacology Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, 12: 431-445

Trên thế giới

2

Được sử dụng chữa bệnh nhiễm trùng và bổ sung vào

pháp đồ trị liệu ung thư và bệnh bạch cầu, điều trị bệnh

tiểu đường, thấp khớp, cầm máu,… 2

5

2 Tổng quan

Tình hình nghiên cứu về cây Thù lù cạnh

Đã có rất nhiều nghiên cứu về thành phần hóa học cũng

như hoạt tính sinh học của cây Thù lù cạnh đã được

công bố 1-3

1 Salgado, E.R et al., 2013 Physalis angulata L (Bolsa Mullaca): A Review of its Traditional Uses, Chemistry and Pharmacology Boletín

Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, 12: 431-445

2 Soares, M.B et al., 2003 Inhibition of macrophage activation and lipopolysaccaride-induced death by seco-steroids purified from Physalis

angulata L .European Journal of Pharmacol, 459: 107-112

3 Sharma, N et al., 2015 A Pharmacological comprehensive review on ‘Rassbhary’ Physalis angulata (L.) International Journal of Pharmacy

and Pharmaceutical Sciences, 7: 30-34.

6

 Ngoài nước:

2 Tổng quan

Thành phần hóa học

Các hợp chất tự nhiên có giá trị trong cây Thù lù cạnh 1-3

1 Damu, A.G., et al., 2007 Isolation, Structures, and Structure-Cytotoxic Activity Relationships of Withanolides and Physalin from Physalis angulata

Journal of Natural Products, 70: 1146-1152

2 Yannai, S., 2004 Dictionary of Food Compounds with CD-ROM Additive, Flavors, and Ingredients Chapman and Hall New York 1109-1111

3 Kuo, P.C., et al., 2006 Physanolide A, a Novel Skeleton Steroid, and Other Cytotoxic Principles from Physalis angulata Organic Letters, 8: 2953-2956.

7

-C hứa một số hợp chất: anthocyanin, withaminimin, withangulatin và steroid

-Quan trọng nhất là các whitasteroid (physalin A-K, U, V, W; physagulin A-G; physangulide) Ngoài ra, còn có chlorogenic acid, choline, myricetin, phygrine,…

2 Tổng quan

Tình hình nghiên cứu về cây Thù lù cạnh

và hoạt tính sinh học của Thù lù cạnh được xuất bản

1 Salgado, E.R et al., 2013 Physalis angulata L (Bolsa Mullaca): A Review of its Traditional Uses, Chemistry and Pharmacology Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, 12: 431-445

2 Soares, M.B et al., 2003 Inhibition of macrophage activation and lipopolysaccaride-induced death by seco-steroids purified from Physalis angulata L

.European Journal of Pharmacol, 459: 107-112

3 Sharma, N et al., 2015 A Pharmacological comprehensive review on ‘Rassbhary’ Physalis angulata (L.) International Journal of Pharmacy and

Pharmaceutical Sciences, 7: 30-34.

8

 Trong nước:

-Máy cô quay chân không,

-Lọ thủy tinh, becher, bình chiết, đũa thủy tinh,

bếp điện, cân điện tử, ống mao quản,…

Phương pháp nghiên cứu

9

• Phương pháp cô lập hợp chất

• Phương pháp xác định cấu trúc hóa học của hợp chất

• Phương pháp xác định hoạt tính sinh học

3 Thực nghiệm, kết quả

Sơ đồ tổng quát qui trình thực hiện

Phân lập chất Xác định cấu trúc

Bột cây (2,3 kg)

Cao tổng (94 g)

Lá, thân, quả cây tươi

Cô quay đuổi dung môi

Cô quay dịch chiếc đuổi dung môi

94g cao MeOH sệt,

đậm màu

% 09 ,

4 1000 3

, 2

100 94





x x H

Chiếc với ethyl acetate

Cao tổng methanol

Dịch chiếc còn lại

Dịch chiếc còn lại

Quá trình điều chế cao ethyl acetate

Cô quay và thu hồi dung môi thu được 7g cao Ea

4

% 23 ,

7 94

100

 x

H

I.1.1 giải ly với hệ dung môi DC

100%

3 Thực nghiệm, kết quả

Sắc ký lớp mỏng của phân đoạn

I.1.1 sau khi lên cột tách 4 lần,

giải ly với 3 hệ dung môi khác nhau

-CH=

- OCH 2 -

OH-C6 4,13 (s)

H-21

H-19 H-28

18

– CH=

C-6

19

C-26

C-28

C-21 C-19 -CH 2 O-

-CH 3

20

3 Thực nghiệm, kết quả

Từ những thông tin dữ liệu phổ 1D-NMR kết hợp so sánh đối chiếu với tài liệu tham khảo, hợp chất TL.EA01 được xác định là: 14α,17α:14β,26-diepoxy- 13,20,22-trihydroxy-1,15-dioxo-l6,24-cyclo-13,14-secoergosta-2,5-diene-18,27- dioic acid 18-20,27-22-dilactone hay tên thông thường là physalin B

[1] Matsuura, T., Kawai, M., Nakashima, R., and Butsugan, Y., 1970 Structures of physalin A and physalin B, 13, 14-seco-16, 24-cyclo-steroids

from Physalis alkekengi var Francheti Journal of the Chemical Society C, 5: 664–670

[2] Yang Yan-Jun,SHA Cong-Wei, CHEN Mei-Guo, HU Ling., 2014 Extraction and Crystal Structure of Physalin B, Chineese Juornal of

Structure Chemisty 33, 5:795-800

23

3 Thực nghiệm, kết quả

Kết quả thử hoạt tính sinh học

Kết quả thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định chỉ ra rằng tại nồng độ thử nghiệm ban đầu là 200 µg/ml; dịch chiết từ cao Ea biểu hiện

hoạt tính kháng 3 chủng vi sinh vật kiểm định

24

4 Kết luận và kiến nghị

• Kết luận:

VSV

25

4 Kết luận và kiến nghị

• Kiến nghị:

các cao chiết khác

dược liệu trong ứng dụng điều trị bệnh

26

XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN QUÝ THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN

ĐÃ CHÚ Ý LẮNG NGHE

28

29

I PE:Ea (1:1) Kéo vệt, vết chính tròn, rõ màu hồng cam R f = 0,58 1,98

II PE:Ea (1:1) Kéo vệt, có nhiều vết 0,151 III PE:Ea (4:6) Kéo vệt có nhiều vết, nhiều tạp, 1 vết hiện rõ 0,53

IV PE:Ea (3:7) Nhiều vết, có 4 vệt màu: xanh R f = 0,67; vết vàng R f =

0,6; vết hồng R f = 0,5, vệt tím nhạt

0,86

V PE:Ea (3:7) Vệt dài nhiều vệt màu 0,48

VI PE:Ea (2:8) Kéo vệt, có 2 vệt chính rõ: màu xanh R f =0,52; màu

*Sắc ký lớp mỏng với hệ dung môi giải ly DC:Me (85:15)

Khảo sát cao ethyl acetate

I.1 PE:Ea (9:1) Kéo vệt, có vết chính màu hồng cam

phía trên đầu, Rf = 0,2 *

0,189

I.2 PE:Ea (8:2) Kéo vệt nhiều màu không rõ ** 0,568 I.3 PE:Ea (7:3) Kéo vệt dài không rõ ** 0,31 I.4 Me (100%) Vết không rõ ràng, kéo vệt, có vết

Kết quả SKLM Dung môi giải ly DC 100%

Khối lượng (g)

I.1.1 DC 100 % C 100% 2 vết tròn chính màu hồng cam

đi đôi, R f = 0,5-0,6, bắt UV 254

0,109

I.1.2 DC 100 % C 100% Hiện 1 vết màu hồng nhạt, kéo

vệt ở đầu và đuôi, màu không đồng nhất

Sắc ký lớp mỏng của phân đoạn I.1.1

sau khi lên cột tách lần 1 giải ly với hệ

dung môi C 100%

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

35

Kết quả thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định chỉ ra rằng tại nồng độ thử nghiệm ban đầu là 200 µg/ml; dịch chiết từ cao Ea biểu hiện hoạt tính kháng 3 chủng vi sinh vật kiểm định

Các hợp chất tiêu biểu trong cây Thù lù cạnh

Cấu trúc 3D của Physalin

Physalin B

Tổng hợp Physalin

Sinh tổng hợp Physalin

Withagulatin Physalin Physagulin