ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM LÊ THỊ THANH HUYỀN ẢNH HƯỞNG CỦA 2,4 – D VÀ HORMONE FSH ĐẾN CÁC CHỈ TIÊU SINH LÝ, SINH HÓA MÁU Ở PHÔI GÀ VÀ SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO MẦM TINH
Trang 1ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN
TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM
LÊ THỊ THANH HUYỀN
ẢNH HƯỞNG CỦA 2,4 – D VÀ HORMONE FSH ĐẾN CÁC CHỈ TIÊU SINH LÝ, SINH HÓA MÁU Ở PHÔI GÀ
VÀ SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO MẦM TINH HOÀN GÀ
LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC
THÁI NGUYÊN - 2012
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn1
Trang 2LÊ THỊ THANH HUYỀN
ẢNH HƯỞNG CỦA 2,4 – D VÀ HORMONE FSH ĐẾN CÁC CHỈ TIÊU SINH LÝ, SINH HÓA MÁU Ở PHÔI GÀ
VÀ SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO MẦM TINH HOÀN GÀ
Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm
Mã số: 60.42.30
LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC
Người hướng dẫn khoa học: TS TỪ QUANG TÂN
THÁI NGUYÊN - 2012
Trang 3và động vật - Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên, Phòng thí nghiệm Sinh lý người và động vật - Viện Khoa học động vật - Đại học Chiết Giang, Trung Quốc và Công ty TNHH Tribeco miền Bắc – nơi tôi đang công tác - đã tạo điều kiện cho tôi hoàn thành luận văn
Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn tới cha mẹ, những người thân trong gia đình và toàn thể bạn bè, đồng nghiệp đã động viên, giúp đỡ về vật chất và tinh thần để tôi hoàn thành luận văn này
Tôi xin chân thành cảm ơn!
Tác giả
Lê Thị Thanh Huyền
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn3
Trang 4LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan rằng số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là hoàn toàn trung thực và chưa được công bố trong bất kỳ công trình nào khác
Tác giả
Lê Thị Thanh Huyền
Trang 5iii
NHỮNG TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU
1 Endocrine Disrupting Chemicals
2 2,4 – Dichlorophenoxy acetic acid
10 Insulin – Transferrin - Selenite
11 Proliferating Cell Nuclear Antigen
12 Fetal calf serum (huyết thanh bê)
Hb kDa FSH
T MTT
IU DAB ITS PCNA FCS A/G PBS TBS Estrogen Receptor International Union of Pure and Applied Chemistry Nomenclature
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn5
Trang 6DANH MỤC CÁC BẢNG
Bảng 3.1 Ảnh hưởng của các dung dịch nuôi cấy đến khả năng sinh sản của
tế bào tinh hoàn……… 33 Bảng 3.2 Ảnh hưởng của 2,4-D đến số lượng hồng cầu, bạch cầu và hàm
lượng huyết sắc tố máu của phôi gà……… 35 Bảng 3.3 Ảnh hưởng của 2,4-D đến hàm lượng protein huyết thanh và các
tiểu phần protein huyết thanh……… 36 Bảng 3.4 Ảnh hưởng của 2,4-D ở các nồng độ khác nhau đến hoạt tính và
khả năng sinh sản của tế bào……… 38 Bảng 3.5 Ảnh hưởng của FSH đến số lượng hồng cầu, bạch cầu và hàm
lượng huyết sắc tố máu của phôi gà……… 40 Bảng 3.6 Ảnh hưởng của FSH đến hàm lượng protein và các tiểu phần
protein huyết thanh 41 Bảng 3.7 Ảnh hưởng của FSH đến khả năng sinh sản của tế bào 42 Bảng 3.8 Số lượng tế bào/mm2 khi bổ sung T và T + FSH vào môi trường
nuôi cấy 44 Bảng 3.9 Chỉ số PCNA (%) khi bổ sung T và T + FSH vào môi trường nuôi cấy 46
DANH MỤC CÁC HÌNH
Hình 1.1 Cấu trúc hóa học của 2,4-D……… 13 Hình 2.4 Phương pháp đếm hồng cầu và bạch cầu……… 28 Hình 3.1 Đặc điểm hình thái của tế bào tinh hoàn sau 48 giờ nuôi cấy……… 41 Hình 3.2 Chỉ số PCNA của tế bào tinh hoàn phôi gà sau 48 giờ nuôi cấy…… 43
Trang 7v
DANH MỤC BIỂU ĐỒ
Biểu đồ 3.1 Ảnh hưởng của các dung dịch nuôi cấy khác nhau đến hoạt tính
và khả năng sinh sản của tế bào tinh hoàn 33 Biểu đồ 3.2 Ảnh hưởng của nồng độ 2,4-D đến khả năng sinh sản và hoạt
tính của tế bào tinh hoàn 39 Biểu đồ 3.3 Ảnh hưởng của FSH đến khả năng sinh sản của tế bào sau 48 giờ nuôi cấy 42 Biểu đồ 3.4 Tác động cộng gộp của T và FSH (0,5 IU/ml) đến khả năng sinh sản của tế bào 45 Biểu đồ 3.5 Tác động cộng gộp của T và FSH (0,5 IU/ml) đến chỉ số PCNA của tế bào tinh hoàn phôi gà 47
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn7
Trang 8MỤC LỤC
Trang
MỞ ĐẦU 1
1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1
2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1
3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 2
CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3
1.1 TÍNH CHẤT LÝ, HÓA HỌC VÀ CHỨC NĂNG CHÍNH CỦA MÁU 3
1.1.1 Tính chất lý học, chức năng các thành phần chính của máu 4
1.1.2 Tính chất sinh hóa học của máu 7
1.2 TỔNG QUAN VỀ CHẤT GÂY RỐI LOẠN NỘI TIẾT 10
1.2.1 Khái niệm về chất gây rối loạn nội tiết 10
1.2.2 Nguồn gốc và nồng độ gây hại của các chất gây rối loạn nội tiết 10 1.2.3 Cơ chế tác động của các chất gây rối loạn nội tiết 11
1.3 CHẤT GÂY RỐI LOẠN NỘI TIẾT 2,4-D 11
1.3.1 Lịch sử phát hiện 2,4-D 11
1.3.2 Đặc điểm hóa học của 2,4-D 12
1.3.3 Ảnh hưởng của 2,4-D đến thực vật, môi trường và sức khỏe con người 13
1.4 TỔNG QUAN VỀ HORMONE FSH VÀ TESTOSTERON 15
1.4.1 Tổng quan về hormone 15
1.4.2 Ảnh hưởng của kích tố setoid đến sự phát triển của cơ quan sinh dục 17 1.4.3 Thụ thể của kích tố điều tiết quá trình phát triển tuyến sinh dục 18
1.4.4 Hormone nội tiết FSH 19
1.4.5 Hormone testosterone 20
1.5 VÀI NÉT VỀ SỰ SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA TUYẾN SINH DỤC 20
1.5.1 Trục quan hệ vùng dưới đồi – tuyến yên – tuyến sinh dục 20
1.5.2 Enzyme điều khiển tuyến sinh dục 21
Trang 9vii
1.6 CẤU TẠO VI THỂ TINH HOÀN GÀ 22
1.7 TỔNG QUAN VỀ TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU THUỘC LĨNH VỰC CỦA ĐỀ TÀI 23
1.7.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới 23
1.7.2 Tình hình nghiên cứu trong nước 24
CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26
2.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 26
2.2 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 26
2.3 THIẾT BỊ VÀ HÓA CHẤT 26
2.3.1 Thiết bị 26
2.3.2 Hóa chất 26
2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27
2.4.1 Nghiên cứu các chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa máu 27
2.4.2 Phương pháp tách tế bào tinh hoàn 31
2.4.3 Phương pháp nuôi cấy tế bào 31
2.4.4 Phương pháp hóa miễn dịch PCNA 32
2.4.5 Phương pháp xử lý số liệu 32
CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33
3.1 ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG VÀ ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC DUNG DỊCH NUÔI CẤY KHÁC NHAU ĐẾN SINH SẢN CỦA TẾ BÀO TINH HOÀN 33
3.2 ẢNH HƯỞNG CỦA 2,4-D ĐẾN CÁC CHỈ TIÊU SINH LÝ, SINH HÓA MÁU VÀ SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO TINH HOÀN 35
3.2.1 Ảnh hưởng của 2,4-D đến các chỉ tiêu sinh lý máu 35
3.2.2 Ảnh hưởng của 2,4-D đến các chỉ tiêu sinh hóa máu 36
3.2.3.Ảnh hưởng của 2,4-D đến sự sinh sản và hoạt tính của tế bào mầm tinh hoàn 38
3.3 ẢNH HƯỞNG CỦA HORMONE FSH ĐẾN CÁC CHỈ TIÊU SINH LÝ, SINH HÓA MÁU VÀ SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO MẦM TINH HOÀN 39
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn9
Trang 103.3.1 Ảnh hưởng của hormone FSH đến các chỉ tiêu sinh lý máu 39 3.3.2 Ảnh hưởng của FSH đến các chỉ tiêu sinh hóa máu 40 3.3.3 Ảnh hưởng của FSH đến khả năng sinh sản của tế bào mầm tinh hoàn 42 3.4 TÁC DỤNG CỦA TESTOSTERON VÀ FSH ĐẾN KHẢ NĂNG SINH SẢN CỦA TẾ BÀO MẦM 43 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49
Trang 11data error !!! can't not
read
Trang 12data error !!! can't not
read
Trang 13data error !!! can't not
read
Trang 14data error !!! can't not
read
Trang 15data error !!! can't not
read
Trang 17data error !!! can't not
read
Trang 18data error !!! can't not
read
Trang 19data error !!! can't not
read
Trang 20data error !!! can't not
read
Trang 21data error !!! can't not
read
Trang 22data error !!! can't not
read
data error !!! can't not
read
Trang 23data error !!! can't not
read
data error !!! can't not
read
Trang 24data error !!! can't not
read
data error !!! can't not
read
Trang 26read
Trang 27data error !!! can't not
read