Nghiên cứu phân lập và tuyển chọn vi sinh vật phân giải lân có hiệu quả cao trên đất thoái hóa nghèo chất dinh dưỡng ở Lục ngạn - Bắc Giang

Nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố dinh dưỡng và môi trường đến quá trình nhân sinh khối vi sinh vật phân giải lân khó tan, vi sinh vật đối kháng nấm gây bệnh cho Bạch đàn và xây dựng q

Số hóa bởi trung tâm Học Liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM

Số hóa bởi trung tâm Học Liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

Số hóa bởi trung tâm Học Liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM

LUẬN VĂN THẠC SĨ LÂM NGHIỆP

Người hướng dẫn khoa học:

PGS.TS Phạm Quang Thu

Thái Nguyên – 2010

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http//: www.lrc-tnu.edu.vn

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là đề tài nghiên cứu của riêng tôi, những số liệu

và kết quả trong luận văn này là hoàn toàn trung thực, chƣa hề đƣợc sử dụng

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http//: www.lrc-tnu.edu.vn

Trong quá trình thực hiện đề tài, tôi đã nhận được sự quan tâm giúp đỡ của các thầy cô giáo và các bạn đồng nghiệp Nhân dịp hoàn thành đề tài này cho phép tôi được bày tỏ lòng biết ơn đến các thầy cô giáo cùng các anh chị trong phòng Thí nghiệm Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam

Đặc biệt tôi xin trân trọng cảm ơn sự chỉ bảo giúp đỡ tận tình của thầy giáo hướng dẫn PGS TS Phạm Quang Thu

Cuối cùng tôi xin chân thành cảm ơn sự quan tâm giúp đỡ của gia đình, bạn bè đã tạo các điều kiện về vật chất và tinh thần để tôi hoàn thành bản luận văn này

Xin chân thành cảm ơn !

Hà Nội, ngày 02 tháng 05 năm 2010

Học viên

Phạm Ngọc Tri

ii

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http//: www.lrc-tnu.edu.vn

MỤC LỤC

Nội dung Trang

TRANG PHỤ BÌA

LỜI CAM ĐOAN i

LỜI CẢM ƠN ii

MỤC LỤC iii

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT vii

DANH MỤC CÁC BẢNG viii

DANH MỤC CÁC HÌNH ix

CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU 1

1.1 Tính cấp thiết của đề tài 1

1.2 Mục tiêu của đề tài 2

1.3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn 3

1.3.1 Ý nghĩa khoa học 3

1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn 3

CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 4

2.1 Tình hình nghiên cứu ở ngoài nước 4

2.2 Nghiên cứu tại Việt Nam 6

2.3 Tổng quan khu vực nghiên cứu 8

2.3.1 Điều kiện tự nhiên 9

2.3.2 Điều kiện kinh tế - xã hội 10

CHƯƠNG 3: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14

3.1 Đối tượng 14

3.2 Nội dung nghiên cứu 14

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http//: www.lrc-tnu.edu.vn

3.2.1 Phân lập và tuyển chọn chủng vi sinh vật phân giải lân khó tan có hiệu lực cao và vi sinh vật đối kháng nấm gây bệnh cho Bạch đàn từ đất 14 3.2.2 Mô tả và giám định chủng vi sinh vật phân giải lân khó tan có hiệu lực cao và vi sinh vật đối kháng nấm gây bệnh cho Bạch đàn 14 3.2.3 Nghiên cứu khả năng tập hợp các chủng vi sinh vật trong chế phẩm hỗn hợp 14 3.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố dinh dưỡng và môi trường đến quá trình nhân sinh khối vi sinh vật phân giải lân khó tan, vi sinh vật đối kháng nấm gây bệnh cho Bạch đàn và xây dựng quy trình sản xuất chế phẩm

vi sinh vật phân giải lân 14 3.2.5 Đánh giá hiệu lực của chế phẩm đối với cây Bạch đàn ở giai đoạn

vườn ươm 14 3.3 Phương pháp nghiên cứu 15 3.3.1 Phương pháp phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật phân giải lân khó tan, vi sinh vật đối kháng nấm gây bệnh cho Bạch đàn 15 3.3.1.1 Phương pháp phân lập 15 3.3.1.2 Phương pháp tuyển chọn các chủng phân giải lân có hiệu lực cao, vi sinh vật đối kháng nấm gây bệnh Bạch đàn 17 3.3.1.3 Phương pháp xác định hàm lượng lân dễ tiêu do vi khuẩn phân giải 18 3.3.2 Phương pháp mô tả đặc điểm và giám định các loài vi sinh vật 18 3.3.2.1 Phương pháp mô tả vi sinh vật 18 3.3.2.2 Phương pháp giám định vi sinh vật 18 3.3.3 Phương pháp nghiên cứu khả năng tập hợp các chủng vi sinh vật trong chế phẩm hỗn hợp 19 3.3.4 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố dinh dưỡng và môi trường đến quá trình nhân sinh khối vi sinh vật phân giải lân khó tan, vi sinh

iv

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http//: www.lrc-tnu.edu.vn

vật đối kháng nấm gây bệnh và xây dựng quy trình sản xuất chế phẩm vi sinh vật phân giải lân 19 3.3.4.1 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng đến sinh trưởng và phát triển của vi sinh vật 19 3.3.4.2 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy đến mật

độ tế bào vi sinh vật 21 3.3.4.3 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của tốc độ lắc đến mật độ tế bào

vi sinh vật 21 3.3.4.4 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của độ pH môi trường dinh

dưỡng đến mật độ tế bào vi sinh vật 21 3.3.4.5 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của loại giá thể rắn (chất mang) đến mật độ tế bào vi sinh vật 22 3.3.5 Phương pháp đánh giá hiệu lực của chế phẩm đối với bạch đàn ở giai đoạn vườn ươm 23 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ PHÂN TÍCH KẾT QUẢ 24 4.1 Kết quả về phân lập, tuyển chọn và định loại các chủng vi sinh vật phân giải lân, vi sinh vật đối kháng nấm gây bệnh từ đất rừng nghèo kiệt 24 4.1.1 Kết quả phân lập các chủng vi khuẩn phân giải lân 24 4.1.2 Kết quả tuyển chọn các chủng vi khuẩn có hiệu lực phân giải lân cao 26 4.1.3 Kết quả phân lập và tuyển chọn các chủng vi khuẩn đối kháng nấm gây bệnh cây Bạch đàn 28 4.1.4 Kết quả định loại các chủng vi sinh vật phân giải lân có hoạt tính cao và các chủng vi sinh vật đối kháng với nấm gây bệnh bằng kỹ thuật phân tử 30 4.1.4.1 Kết quả tách chiết DNA và chạy phản ứng PCR 30 4.1.4.2 Kết quả xác định các chủng vi sinh vật 31 4.2 Nghiên cứu khả năng tập hợp các chủng vi sinh vật để sản xuất chế phẩm hỗn hợp 36 4.2.1 Đánh giá mật độ tế bào của các chủng vi sinh vật phân giải lân và vi sinh vật đối kháng nấm gây bệnh cho cây Bạch đàn sau khi hợp chủng 36

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http//: www.lrc-tnu.edu.vn

4.2.2 Nghiên cứu về hoạt tính sinh học của các chủng vi sinh vật khi phối

hợp chủng 37

4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố dinh dưỡng và môi trường đến quá trình nhân sinh khối của các chủng vi khuẩn phân giải lân khó tan 39

4.3.1 Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng đến mật độ tế bào vi khuẩn 39

4.3.2 Ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy đến mật độ tế bào vi khuẩn 41

4.3.3 Ảnh hưởng của tốc độ lắc đến mật độ tế bào vi sinh vật 43

4.3.4 Ảnh hưởng của độ pH môi trường dinh dưỡng đến mật độ tế bào vi sinh vật 45

4.3.5 Ảnh hưởng của loại giá thể rắn (chất mang) đến mật độ tế bào 47

4.4 Xây dựng quy trình công nghệ và sản xuất chế phẩm vi sinh hỗn hợp dạng viên nén cho cây bạch đàn 50

4.4.1 Thành phần của chế phẩm vi sinh hỗn hợp 50

4.4.2 Xây dựng quy trình công nghệ và sản xuất chế phẩm vi sinh hỗn hợp dạng viên nén cho cây Bạch đàn 50

4.4.3 Bảo quản chế phẩm 52

4.5 Đánh giá hiệu lực của chế phẩm đối với sinh trưởng của bạch đàn ở giai đoạn vườn ươm 53

4.5.1 Thí nghiệm nhiễm chế phẩm với cây bạch đàn trắng Eucalyptus camaldulensis 53

4.5.2 Thí nghiệm nhiễm chế phẩm với cây bạch đàn nâu Eucalyptus urophylla 56

CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 60

5.1 Kết luận 60

5.2 Kiến nghị 62

TÀI LIỆU THAM KHẢO 63

Tài liệu tiếng Việt 63

Tài liệu tiếng Anh 64

vi

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http//: www.lrc-tnu.edu.vn

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

CFU : Mật độ số khuẩn lạc

CT : Công thức

Dpg : Đường kính vòng phân giải

DTB : Đường kính trung bình PCR : Chạy phản ứng bằng kỹ thuật phân tử PGL : Phân giải lân

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

data error !!! can't not

read

read

data error !!! can't not

read