基 金 项 目 江 苏 省 高 校 自 然 科 学 基 金（ ０５ＫＪＢ１８００１０） ； 淮 阴师范 学院
教授基金（ ０６ＨＳＪＳ０２７） 。 作者简介 刘 森 琴（ １９８５－ ） ， 女 ， 江 苏 泰 州 人 ， 本 科 ， 专 业 ： 药 用 真 菌 。
＊ 通讯作者。
收稿日期 ２００７! ０９!１０
蝉 花［Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ（ Ｈｉｌｌ．） Ｂｅｒｋ．＆ Ｂｒ］， 又 名 蝉 蛹
草、蝉茸、胡蝉、蜩等 ， 与冬虫夏草和蛹虫草同属于菌物界、
真菌门、子囊菌纲、麦角菌目、麦角菌科、虫草属， 能解痉、散
风热、退翳障和透疹， 主治小儿惊风夜啼、咬牙、咳嗽、咽喉
痈肿等症［１］， 具有滋补强壮、抗疲劳、抗应激、镇静催眠、解热
镇痛、改善肾功能等功效［２］， 是一种传统的虫生药用真菌。我
国古代医药典籍《雷公炮炙论》、《图经本草》、《证类本草》和
《本草纲目》均有记载［２－ ３］。其 主 要 活 性 成 分 的 含量 不 亚 于 冬
虫夏草和蛹虫草， 有着很好的开发利用前景［３－ ４］。
蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉科昆虫的若虫在长出子座后
形成的虫菌复合体［１ ， ３］。由于蝉的生长周期需要好几年， 同时
蝉拟青霉的寄生需 要 适 宜 的 气 候 条 件和 生 态 环 境 ， 加上人
们连年采集， 致使蝉花资源不断减少， 野生蝉花越来越难寻
觅。为解决该问题， 江苏省农业科学院食用菌研究开发中心
在分离获得蝉花纯 种 的 基 础 上 ， 进行了蝉花的人工培育研
究， 已成功培育出人工蝉花， 但人工蝉花主要活性成分的含
量如何， 与野生蝉花相比有何变化， 目前还未见报道。为此，
笔者进行了该研究 ， 旨在为人工蝉花的进一步开发利用提
供依据。
用菌研究开发中心提供， 野生蝉花采自南京东郊瓦屋山； 蝉
花固体培养物由淮 阴 师 范 学 院 资 源 微 生物 研 究 所 培 养 ， 菌
种由江苏省农业科学院食用菌研究开发中心赠送。
口分装； 磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、四氢呋喃、Ｄ!甘 露 醇 、鼠 李糖、高碘酸钠、乙酸铵、冰乙酸、乙酰丙酮、葡萄糖、无水乙 醇、苯酚、浓硫酸等， 均为国产分析纯试剂， 试验用水为二次 蒸馏水。
１．１．３ 仪 器 。ＤＨＧ!９２４０Ａ电 热 恒 温 鼓 风 干 燥 箱 ，ＢＳ２２４Ｓ电
子 天 平 ，ＫＤ２３Ｂ! ＡＥ 美 的 微 波 炉 ，ＴＤＬ!５!Ａ 台 式 离 心 机 ，
计， 水浴锅， 多功能食品加工机等。
１．２．１ 虫草 素 和 腺 苷 含 量 测 定 。采用 高 效 液 相 色 谱 法［５］。色 谱柱为ＮＯＶＡ!ＰＡＫ Ｃ１８反相柱，３．９ ｍｍ×３００．０ ｍｍ，４ μｍ； 流 动相为ＫＨ２ＰＯ４!Ｋ２ＨＰＯ４＋ １ ％四氢呋喃缓冲液，ｐＨ ＝ ６．８６， 流
为：Ｙ＝ ３．１０×１０６Ｘ－ １．３４×１０４，Ｒ２＝ ０．９９９ ９； 腺苷标准曲线的 回归方程为：Ｙ＝ ３．５５×１０６Ｘ－ ５．７２×１０３，Ｒ２＝ ０．９９９ ９。式中，Ｙ 为色谱峰面积，Ｘ为虫草素或腺苷的进样量［μｇ／（ １０ μｌ）］。
样 品 提 取 采 用 微 波 法［６］。样 品 中 虫 草 素 或 腺 苷 的 含 量
（ ｍｇ／ｇ）＝ １０ Ｘ， 式中，Ｘ的 单 位 由μｇ／（ １０ μｌ） 变换为ｍｇ／（ １０
ｍｌ） ， 因样 品 称 取 量 为０．１ ｇ， 提 取 液 为１０ ｍｌ， 故 乘 以１０后 即变换为ｍｇ／ｇ。
１．２．２ 虫草 酸 含 量 测 定 。采 用 高 碘酸 钠 比 色 法［７］。虫 草 酸 的 化学成分为Ｄ!甘露醇， 准确称取甘露醇标准品０．５００ ０ ｇ， 配
准溶液； 用微量取样器分别取不同浓度的标准溶液３００ μｌ，
置１０ ｍｉｎ， 加２ ｍｌ ０．１ ％鼠李糖， 再加４ ｍｌ新配制的Ｎａｓｈ试 剂（ 用冰乙酸和乙酰丙酮等配制） ，５３ ℃水浴１５ ｍｉｎ， 用分光
（ 下转第４６７页）
人工培育蝉花的活性成分含量测定
刘森琴１， 温 鲁１ ＊， 夏 敏２， 蒋 宁３ （ １．淮阴师范学院资源微生物研究所， 江苏淮安 ２２３３００； ２．淮阴师范学院分析测试中心， 江苏淮安 ２２３３００； ３．江苏省农业科学院食用菌研究开发中心， 江苏南京 ２１００１４）
摘要 ［目的］明确人工蝉花的活性成分含量。［方法］用微波法提取人工蝉花和野生蝉花的活性成分， 用高效液相色谱法测定虫草素和 腺苷含量， 用高碘酸钠法测定虫草酸含量， 用苯酚－硫酸法测定虫草多糖含量。［结果］人工蝉花的虫草酸含量和野生蝉花相当， 虫草多 糖含量则高达１１０．０９ ｍｇ／ｇ； 腺苷含量较野生蝉花低， 虫草素未能检出， 但４种活性成分总量是野生蝉花的１．５５倍。［结论］从活性成分 含量看， 人工蝉花可代替野生蝉花， 但还需进行进一步试验。
关键词 蝉花； 人工培育； 微波提取； 活性成分
中图分类号 Ｓ５６７ 文献标识码 Ａ 文章编号 ０５１７－ ６６１１（ ２００８）０２－ ００４２９－ ０１
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｉｎ ｔｈｅ Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ
ＬＩＵ Ｓｅｎ!ｑｉｎ ｅｔ ａｌ （Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， Ｈｕａｉｙｉｎ Ｔｅａｃｈｅｒｓ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｈｕａｉ＇ａｎ， Ｊｉａｎｇｓｕ ２２３３００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ ［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］ Ｔｈｅ ａｉｍ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｐｅｒ ｗａｓ ｔｏ ａｓｃｅｒｔａｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ ｉｎ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ． ［Ｍｅｔｈｏｄ］ Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ ｏｆ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ ａｎｄ ｗｉｌｄ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ ａｎｄ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ａｃｉｄ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓｏｄｉｕｍ ｐｅｒｉｏｄａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｐｈｅｎｏｌ!ｓｕｌｆｕｒｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｔｈｏｄ． ［Ｒｅｓｕｌｔ］ Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ ｉｎ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ ｗａｓ ｃｏｍｐａｒａｂｌｅ ｔｏ ｗｉｌｄ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗａｓ ａｂｏｕｔ １１０．０９ ｍｇ／ｇ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｉｎ ｗｉｌｄ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ ｗａｓ ｈｉｇｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ ｈａｄ ｎｏｔ ｂｅｅｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ， ｂｕｔ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｑｕａｎｔｉｔｙ
ｏｆ ｔｈｅ ４ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｗａｓ １．５５ ｔｉｍｅｓ ａｓ ｇｒｅａｔ ａｓ ｔｈａｔ ｏｆ ｗｉｌｄ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ． ［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］ Ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ， ｔｈｅ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ ｍｉｇｈｔ ｒｅｐｌａｃｅ ｔｈｅ ｗｉｌｄ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ， ｂｕｔ ｉｔ ｎｅｅｄｅｄ ｔｏ ｂｅ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｂｙ ｔｈｅ ａｎｉｍａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｅｓｔ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ； Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ； Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ； Ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ
安徽农业科学，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｈｕｉ Ａｇｒｉ． Ｓｃｉ． ２００８，３６（２） ：４２９，４６７ 责任编辑 姜 丽 责任校对 王 淼
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.02.066
Trang 2（ ３）Ｐ１的实 粒 数 与 产 量 的 相 关 系数 为０．９５８ ３， 达 极 显
著水平， 其次为单位面积有效穗数， 说明该品种对产量影响
最 大的 是 每 穗 实 粒 数 ， 其 次 才是 有 效 穗 数 ；Ｐ２有 效 穗 数 与
产 量 的 相 关 系 数 为０．９２８ ６， 达 极显 著 水 平 ， 其 次 为 每 穗 实
粒数， 表明该品种为穗数增产型品种， 增加有效穗数能增加
产量。
（ ４） Ｐ１在 种 植 密 度 为 １７．２５万 窝／ｈｍ２时 产 量 最 高 ，
达１０ ２８１．６ｋｇ／ｈｍ２，Ｐ２种 植 密 度２２．５０万 窝／ｈｍ２时 ， 总 产 量
居第１位， 达９ ６３１．５ ｋｇ／ｈｍ２。 参考文献
［１］ 张强， 李自超．不同株穗型水稻超高产品种产量构成因素分析［Ｊ］．西 南农业学报， ２００５， １８（ ５） ： ５１８－ ５１９．
［２］ 杨惠杰， 杨仁崔．水稻超高产的决定因素［Ｊ］．福建农业学报， ２００２， １７
（ ４） ： １９９－ ２０３．
［３］ 陈惠哲， 朱德峰．稀植条件下杂交水稻分蘖成穗规律和穗粒结构研
究 ［Ｊ］．杂交水稻， ２００４， １９（ ６） ： ５１－ ５４．
（ 上接第４２９页）
的回归方程：Ｃ＝ ０．３９６ ２ Ａ－ ０．００４ ８，Ｒ２＝ ０．９９９ ９。
样品提取也采用微波法。称取０．１００ ０ ｇ样品， 放入１００
ｍｌ试剂瓶， 加入２５ ｍｌ蒸馏水，６瓶１组， 置于微波炉中以中
火处理１ ｍｉｎ， 在４ ０００ ｒ／ｍｉｎ下离心１０ ｍｉｎ， 取上清液３００ μｌ，
其余操作与标准溶液测定步骤相同。测得吸光度后 ， 按回归
方程计算提取液的虫草酸含量。样品中的虫草酸含量（ ｍｇ／ｇ）
＝Ｃ×２５／ｍ， 式中，Ｃ为 提 取液 中 虫 草 酸 含 量（ ｍｇ／ｍｌ） ，２５是 样
品提取液体积（ ｍｌ）， ｍ为称取样品的质量（ ｇ） 。
条件下水解成葡萄糖等单糖 ， 以葡萄糖为标样配制系列标
准 溶 液 ， 各 取 １．０ ｍｌ， 分 别 加 入 ５ ％苯 酚 溶 液 １．５ ｍｌ， 浓
Ｈ２ＳＯ４７．５ ｍｌ， 常温显色３０ ｍｉｎ， 于４９０ ｎｍ处测定吸光度， 得
葡萄糖含量Ｃ与吸光度Ａ的回归方程：Ｃ＝ ０．１５３ １ Ａ－ ０．００２ ４，
Ｒ２＝ ０．９９９ １。
采用微波法提取样品中的多糖。称取０．５００ ０ ｇ样品， 放
入１００．０ ｍｌ试剂瓶中 ， 加入２０．０ ｍｌ蒸 馏 水 ，６瓶１组 ， 置微
波炉以中火处理３．５ ｍｉｎ， 离心， 取出５．０ ｍｌ上 清 液 ， 加２０．０
ｍｌ无 水 乙 醇 ， 待多糖沉 降 ， 离 心 去 除 上 清液 ， 将 沉 淀 晾 干 ，
加 热 水 溶 解 ， 定 容 至１０．０ ｍｌ， 从 中 取０．１ ｍｌ， 用 水 补 足１．０
ｍｌ， 其 余 操 作 与 标 准 溶 液 测 定 步 骤 相 同 。样 品 中 多 糖 含 量
（ ｍｇ／ｇ）＝ Ｃ×１００×４／ｍ， 式 中 ，Ｃ为０．１ ｍｌ测 试 液 中 多 糖 含 量
（ ｍｇ） ，１００是多糖测试液总体积１０．０ ｍｌ与０．１ ｍｌ取 出 液 的
体积比，４为微波提取液总体积２０．０ ｍｌ与醇沉时取出液５．０
ｍｌ的体积比，ｍ为称取样品的质量（ ｇ） 。
虫草多糖 和 虫 草 酸 都 是 虫草 类 药 材 的 主 要 活 性 成分 ，
其含量高低是衡量虫草品质的重要依据。腺苷和虫草素也
是虫草的主要活性成分， 但蝉花不是虫草素产生菌（ 虫草素
的主要产生菌是蛹虫草） ， 其含量高低不影响蝉花的功效，
出， 人工蝉花中虫草酸的含量和野生蝉花相当， 都在９０．００
ｍｇ／ｇ左 右 ， 而 虫 草 多 糖 含 量 则 高 达１１０．０９ ｍｇ／ｇ， 远 高 于 野
生 蝉 花 ， 是 野 生 蝉 花 的２．８６倍 ； 人 工蝉 花 的 腺 苷 含 量 比 野
生蝉 花 低 ， 而虫 草 素 则 未 检 出。从４种 主 要 活 性 成 分 总 量
来看， 人工蝉花居于绝对优势， 比野生蝉花高出７１．５８ ｍｇ／ｇ，
是野生蝉花的１．５５倍。
该研究表 明 ， 人工蝉花主要活性成分的含量不低于野
生蝉花， 特别是多糖含量很高， 很高的活性成分总量预示其
功效可能会比野生蝉花更好 ， 但这样的优势能否在功效上
表现出来， 还需进行动物试验和人的临床试验， 为进一步开 发利用提供依据。该研究 只 检 测 了 蝉 花 中 虫草 素 、腺 苷 、虫
待于进一步研究。
人工蝉花具有不依赖自然条件、培养周期较短、产品质 量有保证、可较大批量生产等优点， 为解决野生蝉花资源短 缺问题提供了新途径。但 人 工 蝉 花 只 有子 座（ 子实体） 而无 虫体， 外观上与虫菌复合的野生蝉花有较大区别， 因此不宜 作为药材上市， 可作为有关药品或保健品的加工原料。 蝉花固体培养物是将蝉花菌接种到固体培养基上培养 而获得的， 是蝉花菌丝体、蝉花代谢产物和剩余培养基的混 合物， 与人工蝉花的纯子实体不同（ 含有剩余培养基） ， 也不 同于野生蝉花的虫菌复合体。从活性成分含量来看， 蝉花固 体培养物不如人工蝉花和野生蝉花高， 但其制备工艺简单、
周 期 较 短 、成 本 较 低 ， 如 能 通 过 技 术 手 段 提 高 活 性 成 分 含 量， 也是很有前景的野生蝉花代用品。
参考文献
［１］ 敬一兵， 陆鲁生．虫草［Ｍ］．昆明： 云南科学技术出版社， １９８６： １－ １５６．
［２］ 秦癸， 陈 红英．蝉花 的研究 概况［Ｊ］．基层 中药 杂志， ２００２， １６（ ６） ： ５４－ ５５．
［３］ 王 琪 ， 刘 作 易．药 用 真 菌 蝉 花 的 研 究 进 展［Ｊ］．中 草 药 ， ２００４， ３４（ ４） ： ４６９－ ４７１．
［４］ 温鲁， 唐玉玲， 张平．蝉花与有关 虫草 活性 成份检 测比 较［Ｊ］．江 苏中 医药， ２００６， ２７（ １） ： ４５－ ４６．
［５］ 夏敏， 尹起范， 温鲁， 等．高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷和虫草
素 ［Ｊ］．理化检验－ 化学分册， ２００７， ４３（ ５） ： ３８６－ ３８８．
［６］ 夏 敏 ， 温 鲁 ． 微 波 法 提 取 虫 草 素 研 究 ［Ｊ］． 食 品 科 学 ， ２００６， ２７（ １０） ： ２４８－ ２５１．
［７］ 温鲁， 尹起范， 唐玉玲， 等．蚕虫草与有关虫草活性成份检测比较［Ｊ］． 食品科学， ２００４， ２５（ ８） ： １５５－ １５７．
［８］ 来 永 斌 ， 王 琦 ， 孙 月 ． 蛹 虫 草 多 糖 含 量 的 测 定 与 分 析 ［Ｊ］． 中 成 药 ， ２００１， ２３（ ７） ： ５１７－ ５１８．
样品 Ｓａｍｐｌｅ
虫草素 含量 Ｃｏｒｄｙ－
ｃｅｐｓ－
ｃｏｎｔｅｎｔ
腺苷含量 Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ
虫草酸 含量 Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ
虫草多 糖含量 Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａ－
ｒｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ
总量 Ｔｏｔａｌ
人工蝉花 Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ
－ ０．７４ ９０．５２ １１０．０９ ２０１．３５
野生蝉花 Ｗｉｌｄ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ ０．９４ １．２６ ８９．１３ ３８．４４ １２９．７７ 蝉花固体培养物
Ｓｏｌｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ｏｆ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ
０．２０ ０．６１ ２７．８０ ５４．６２ ８３．２３
注： － 表示未检出。
Ｎｏｔｅ： － ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｎｏｔ ｄｅｔｅｃｔｅｄ．
表 １ 几种蝉花主要活性成分含量 Ｔａｂｌｅ １ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｍａｉｎ ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｏｆ ｓｅｖｅｒａｌ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ
ｓｏｂｏｌｉｆｅｒａ ｍｇ／ｇ
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
严明建等 栽培密度对不同生育时期水稻品种产量影响的研究