+ Peptide kháng khuẩn AMP là nhóm các peptide có khả năng tiêu diệt những vi sinh vật xâm nhập của hệ thống miễn dịch bẩm sinh ở hầu hết các sinh vật.. Khả năng của Bmattacin2 nhắm mục t
Trang 1ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH
KHOA SINH HỌC – CÔNG NGHỆ SINH HỌC
GVHD: PGS.TS Trần Lê Bảo Hà.
Trang 4ĐỀ XU
ẤT
Màng PLLA/Bmattacin2
Trang 6- Là peptide kháng khuẩn được tạo dòng từ 2 gen attacin2 và cecropinB1 ở tằm
+ Peptide kháng khuẩn (AMP) là nhóm các peptide có khả năng tiêu diệt những vi sinh vật xâm nhập của hệ thống miễn dịch bẩm sinh ở hầu hết các sinh vật
+ AMPs mang đặc điểm chung là có điện tích cation bề mặt và có các vùng ưa nước và vùng kỵ nước tạo thành màng lưỡng cực (phân cực)
+ AMPs thường có sự ổn định nhiệt và kháng sinh phổ rộng
III BMATTACIN2
Trang 71. ĐẶC TÍNH:
a Khả năng của Bmattacin2 nhắm mục tiêu tế bào ung thư.
•. Đối tượng:
Tế bào ung thư (tế bào hắc tố ác tính A375 và tế bào ung thư đại trực tràng HCT116 ở người)
Tế bào đối ứng bình thường (nguyên bào sợi da bao quy đầu người HFF-1 và tế bào ruột kết của thai nhi FHC)
Trang 8Kết quả: 2 mM Bmattacin2 sau 24 giờ ủ
• Kết luận
Bmattacin2 có thể giết chọn lọc tế bào ung thư A375 và HCT116 mà vẫn duy trì các tế bào đối ứng bình thường của nó
a Khả năng của Bmattacin2 nhắm mục tiêu tế bào ung thư
Trang 9III BMATTACIN2
1 ĐẶC TÍNH:
b Khả năng kháng khuẩn của Bmattacin2.
• Đối tượng:
S maicesceis và B Bombysepticus ( 2 loại vi khuẩn thường được tìm thấy trong tằm nhiễm)
E coli ATCC25922, E coli DH5α và S aureus ATCC25923 (ba chủng vi khuẩn phổ biến trong phòng thí nghiệm)
Trang 10b Tác dụng kháng khuẩn của Bmattacin2
gram âm và gram dương
Kết quả:
Trang 11Thí nghiệm so sánh tác động của Bmattacin2
Ủ với Bmattacin2 trong 30’
Trang 12Khi xâm nhập vào tế bào, kết hợp với các thành phần quan trọng của tế bào, kích hoạt giải phóng
enzyme tự phân giải, ức chế tổng hợp DNA, RNA,
2 CƠ CHẾ BMATTACIN2:
Bám lên màng tế bào vi khuẩn
Peptide kháng khuẩn chèn vào lớp màng lipid kép, hình thành các kênh vận chuyển tự do dẫn đến làm dung giải màng tế bào vi khuẩn
Trang 13Sự tác động chọn lọc của peptide kháng khuẩn Bmattacin2
• Các yếu tố liên quan đến tác động chọn lọc :
+ Điện tích màng.
+ Cholesterol làm giảm hoạt động của các peptide
kháng khuẩn
+ Tế bào vi khuẩn dễ bị nhân tố lạ xuyên màng.
=> Các peptide kháng khuẩn luôn ưu tiên tương tác với
vi khuẩn hơn với tế bào động vật, nhờ đó chúng tiêu diệt
các vi sinh vật mà không gây độc đáng kể đến tế bào chủ.
Trang 14IV MÀNG PLLA/BMATTACIN2
MÀNG
Trang 161 ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2
- Tế bào quan sát: HCT116
-Cấy trên bề mặt màng phức hợp chế tạo
-Thời gian: 3 ngày
Trang 17Tính kháng khuẩn:
Khảo sát đặc tính khác khuẩn của màng
PLLA/Bmattacin2
+ Đối tượng: E coli and S aureus
+ Đối chứng âm: màng PLLA
1 ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2.
b Hiệu lực kháng khuẩn của màng PLLA/Bmattacin2
Trang 181 ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2
Nhuộm vi khuẩn bằng SYTO 9 và
propidium iodide
+ vi khuẩn sống (xanh)
+vi khuẩn chết (màu đỏ) => tác dụng
kháng khuẩn của PLLA/Bmattacin2
b Hiệu lực kháng khuẩn của màng PLLA/Bmattacin2
Trang 191 ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2
c Khả năng tương thích của màng PLLA/Bmattacin2
Trang 202 PHƯƠNG PHÁP TẠO MÀNG:
3 bước
- Tạo dòng.
- Chuẩn bị dung dịch PLLA/Bmattcin2.
- Phương pháp quay điện hóa
(electrospinning) để tạo màng
PLLA/Bmattacin2
IV MÀNG PLLA/BMATTACIN2