kĩ thuật sản xuất kháng thể đơn dòng (Monoclonal Ab)

Năm 1975, Milstein và Kohler đưa ra phương pháp sản xuất kháng thể đơn dòng bằng kỹ thuật dung hợp Fusion hai loại tế bào: • Tế bào u tủy Myeloma.. Năm 1975, Milstein và Kohler đưa ra ph

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC

Hà Nội - 2016

GVHD: TS NGUYỄN HỮU ĐỨC

SVTH: Tạ Thị Hiền - 580895

KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG

1

Nội dung

Năm 1975, Milstein và Kohler đưa ra phương pháp sản xuất kháng thể đơn dòng bằng kỹ thuật dung hợp (Fusion) hai loại tế bào:

• Tế bào u tủy (Myeloma).

• Tế bào lympho B đã hoạt hóa bởi kháng nguyên của chuột.

Năm 1975, Milstein và Kohler đưa ra phương pháp sản xuất kháng thể đơn dòng bằng kỹ thuật dung hợp (Fusion) hai loại tế bào:

• Tế bào u tủy (Myeloma).

• Tế bào lympho B đã hoạt hóa bởi kháng nguyên của chuột.

Kháng thể đơn dòng:

Các kháng thể chỉ đáp ứng với một loại kháng nguyên chuyên biệt (chẳng hạn với chỉ một độc tố hay một siêu vi)

Các kháng thể chỉ đáp ứng với một loại kháng nguyên chuyên biệt (chẳng hạn với chỉ một độc tố hay một siêu vi)

Chỉ nhận biết một epitope trên một kháng nguyên cho sẵn

Tất cả các kháng thể đơn dòng cùng một dòng thì giống hệt nhau và được sản xuất bởi cùng một dòng tương bào (biệt hóa từ lympho B)

Tất cả các kháng thể đơn dòng cùng một dòng thì giống hệt nhau và được sản xuất bởi cùng một dòng tương bào (biệt hóa từ lympho B)

Nguyên lý:

Khi môi trường nuôi tế bào có chứa Aminopterin (A), A ức chế sinh tổng hợp base nito cần thiết cho tổng hợp ADN => Tế bào không sống được trong môi trường này

 Khi bổ sung vào môi trường Hypoxanthin (H) và Thymidin (T) thì các tế bào sống do có enzyme

Hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase (HGPRT) chuyển hóa H và T thành các basenito cần thiết

Tế bào Myeloma không có khả năng tổng hợp HPRT nên không sống được trên môi trường có bổ sung HAT.

Tế bào lympho B có khả năng tổng hợp HGPRT nên sống được trong môi trường chứa HAT, nhưng nó lại không

Tế bào lai Hybridoma sinh HGPRT nên phát triển được trong môi trường HAT và có khả năng tiết kháng thể đặc

hiệu

7

Ư

Hạn

Khắc phục hạn chế:

Các nhà khoa học đã nghiên cứu đưa tế bào lympho B của người vào cơ thể chuột, các tế bào B này sẽ tạo ra các KTĐD mà hệ thống miễn dịch của bệnh nhân sẽ chấp nhận như là của mình

Các nghiên cứu mới đây còn dùng công nghệ gene và thay thế chuột bằng các vi khuẩn để tạo các KTĐD nhỏ hơn, hoạt động hữu hiệu hơn, gắn chặt các vật mang hơn, thâm nhập các khối u dễ dàng hơn và đặc biệt là giá thành rẻ hơn

Các nhà khoa học đã nghiên cứu đưa tế bào lympho B của người vào cơ thể chuột, các tế bào B này sẽ tạo ra các KTĐD mà hệ thống miễn dịch của bệnh nhân sẽ chấp nhận như là của mình

Các nghiên cứu mới đây còn dùng công nghệ gene và thay thế chuột bằng các vi khuẩn để tạo các KTĐD nhỏ hơn, hoạt động hữu hiệu hơn, gắn chặt các vật mang hơn, thâm nhập các khối u dễ dàng hơn và đặc biệt là giá thành rẻ hơn

Chữa trị ung thư máu bằng kháng thể đơn dòng Alemtuzumab

Thử thai

Chẩn đoán bệnh Aids

Ghép tạng

Trong tim mạch

TÀI LIỆU THAM KHẢO

Phan Kim Ngọc và Phạm Văn Phúc (2007), Công nghệ sinh học trên người và động vật, NXB Giáo dục.

Danh ngôn

CẢM ƠN THẦY VÀ CÁC BẠN ĐÃ LẮNG NGHE!