Báo cáo tiểu luận các phương pháp phân tích trong sản xuất ethanol bởi nấm men Klyvermyces

Xác định tế bào nấm men sống/ chết và hình thái của chúng bằng kính hiển vi quang học dựa trên nguyên tắc khúc xạ ánh sáng qua hệ các thấu kính thủy tinh. Thí nghiệm kiểm tra đường sót lại trong quá trình lên men tiến hành theo hai phương pháp để có đánh giá khách quan nhất về quá trình lên men. Cách 1: kiểm tra lượng đường sót ngay sau quá trình thu nhận mẫu tại các thời điểm lên men nhất định (0, 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96 giờ) bằng phương pháp quang phổ so màu với thuốc thử 3,5 – dinitrosalicylic acid (DNS) (Miller, 1959). Cách 2: kiểm tra lượng đường sót một cách tập trung các mẫu (lưu trữ mẫu trong thời gian dài và kiểm tra cùng lúc) tại phòng thí nghiệm đạt tiêu chuẩn ISO 17025 bằng phương pháp sắc kí lỏng áp suất cao (HPLC). Thí nghiệm kiểm tra cồn trong quá trình lên men: Tương tự như thì nghiệm kiểm tra đường sót trong quá trình lên men, chúng tôi tiến hành song song hai phương pháp khác nhau để kiểm tra độ cồn trong quá trình lên men. Điều cần lưu ý là cồn là một hợp chất dễ bay hơi, chính vì vậy việc kiểm tra lượng cồn sinh ra trong quá trình lên men của nấm men ngay sau khi lấy mẫu giúp hạn chế được sai số do quá trình tồn trữ gây thất thoát.

TR ƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA TP.HCM NG Đ I H C BÁCH KHOA TP.HCM ẠI HỌC BÁCH KHOA TP.HCM ỌC BÁCH KHOA TP.HCM

Đ tài : ề tài :

KH O SÁT KH NĂNG LÊN MEN C A ẢO SÁT KHẢ NĂNG LÊN MEN CỦA ẢO SÁT KHẢ NĂNG LÊN MEN CỦA ỦA

T DO VÀ C Đ NH CÓ CH T C CH ỰC PHẨM Ố ĐỊNH CÓ CHẤT ỨC CHẾ ỊNH CÓ CHẤT ỨC CHẾ ẤT ỨC CHẾ ỨC CHẾ Ế

Tp H Chí Minh, tháng 4 năm 2016 ồ Chí Minh, tháng 4 năm 2016

M C L C ỤC LỤC ỤC LỤC

M C L C ỤC LỤC ỤC LỤC ii

M Đ U Ở ĐẦU ẦU iv

I T ng quan ổng quan 1

1.1 Ý nghĩa c a đ tài ủa đề tài ề tài : 1

1.2 Ph ương hướng và kế hoạch thực hiện ng h ướng và kế hoạch thực hiện ng và k ho ch th c hi n ế hoạch thực hiện ạch thực hiện ực hiện ện 4

a Lưu trữ giống 6

b Lên men 6

c Cố định, tạo hạt gel 7

II N i dung thí nghi m ội dung thí nghiệm ện 9

2.1 Xác đ nh t bào n m men s ng/ ch t và hình thái c a chúng ịnh tế bào nấm men sống/ chết và hình thái của chúng ế hoạch thực hiện ấm men sống/ chết và hình thái của chúng ống/ chết và hình thái của chúng ế hoạch thực hiện ủa đề tài 9

2.1.1 M c đích ục đích 10

2.1.2 Nguyên t c ắc 10

2.1.3 Thi t b và cách ti n hành ế hoạch thực hiện ịnh tế bào nấm men sống/ chết và hình thái của chúng ế hoạch thực hiện 10

a Kính hi n vi quang h c ển vi quang học ọc 10

b Kính hi n vi đi n t quét (SEM) ển vi quang học ện tử quét (SEM) ử quét (SEM) 12

2.2 Thí nghi m ki m tra đ ện ểm tra đường sót trong quá trình lên men ường sót trong quá trình lên men ng sót trong quá trình lên men 14

2.2.1 M c đích ục đích 14

2.2.2 Nguyên t c ắc 14

a Ph ương pháp DNS ng pháp DNS 14

b Ph ương pháp DNS ng pháp s c kí l ng áp su t cao (HPLC) ắc kí lỏng áp suất cao (HPLC) ỏng áp suất cao (HPLC) ất cao (HPLC) 15

2.2.3 Thi t b và cách ti n hành ế hoạch thực hiện ịnh tế bào nấm men sống/ chết và hình thái của chúng ế hoạch thực hiện 15

a Ph ương pháp DNS ng pháp DNS 15

b Ph ương pháp DNS ng pháp s c kí l ng áp su t cao (HPLC) ắc kí lỏng áp suất cao (HPLC) ỏng áp suất cao (HPLC) ất cao (HPLC) 18

2.3 Thí nghi m ki m tra c n trong quá trình lên men ện ểm tra đường sót trong quá trình lên men ồ Chí Minh, tháng 4 năm 2016 22

2.3.1 M c đích ục đích 22

2.3.1 Ph ương pháp DNS ng pháp 22

K T LU N Ế ẬT HÓA HỌC 34 TÀI LI U THAM KH O Ệ THỰC PHẨM ẢO SÁT KHẢ NĂNG LÊN MEN CỦA 35

M Đ U Ở ĐẦU ẦU

Việc nghiên cứu ứng dụng các chủng nấm men có khả năng lên men cenllulose có ýnghĩa trong việc góp phần tận dụng nguồn phế liệu dồi dào từ cenllulose để cung cấpnăng lượng cho con người Đề tài khảo sát khả năng lên men của Kluyvermicesmarxianus trong điều kiện tự do và cố định có chất ức chế để tìm ra điều kiện tối ưu

để tạo sản phẩm lên men tối ưu nhất

Tổng quát đề tài gồm có các nội dung chính như sau:

Xác định tế bào nấm men sống/ chết và hình thái của chúng bằng kínhhiển vi quang học dựa trên nguyên tắc khúc xạ ánh sáng qua hệ các thấu kínhthủy tinh

Thí nghiệm kiểm tra đường sót lại trong quá trình lên men tiến hànhtheo hai phương pháp để có đánh giá khách quan nhất về quá trình lên men.Cách 1: kiểm tra lượng đường sót ngay sau quá trình thu nhận mẫu tại các thờiđiểm lên men nhất định (0, 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96 giờ) bằng phươngpháp quang phổ so màu với thuốc thử 3,5 – dinitrosalicylic acid (DNS) (Miller,1959) Cách 2: kiểm tra lượng đường sót một cách tập trung các mẫu (lưu trữmẫu trong thời gian dài và kiểm tra cùng lúc) tại phòng thí nghiệm đạt tiêuchuẩn ISO 17025 bằng phương pháp sắc kí lỏng áp suất cao (HPLC)

Thí nghiệm kiểm tra cồn trong quá trình lên men: Tương tự như thìnghiệm kiểm tra đường sót trong quá trình lên men, chúng tôi tiến hành songsong hai phương pháp khác nhau để kiểm tra độ cồn trong quá trình lên men.Điều cần lưu ý là cồn là một hợp chất dễ bay hơi, chính vì vậy việc kiểm tralượng cồn sinh ra tron quá trình lên men của nấm men ngay sau khi lấy mẫugiúp hạn chế được sai số do quá trình tồn trữ gây thất thoát

Để hiểu rõ hơn về nguyên tắc, phương pháp tiến hành chúng ta cùng nhau tìm hiểu vềbài báo cáo này của nhóm

I T ng quan ổng quan

1.1 Ý nghĩa c a đ tài ủa đề tài ề tài :

Nhiên li u sinh h c đang r t đệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtc quan tâm và được quan tâm và được xem như là mộtc xem nh là m tư ộtngu n thay th nhiên li u hóa th ch S d ng nhiên li u sinh h c làm gi m hi uệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một

ng nhà kính, cung c p m t ngu n năng lất được quan tâm và được xem như là một ột ược quan tâm và được xem như là mộtng s ch và b n v ng đ ng th i làmạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ền vững đồng thời làm ững đồng thời làm ời làmtăng thu nh p cho nông dân nghèo các nở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc đang phát tri n Nhiên li u sinhển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một

h c bao g m bioethanol, biomethanol, d u th c v t, d u diesel sinh h c, khíọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ực vật, dầu diesel sinh học, khí ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ọc đang rất được quan tâm và được xem như là mộtsinh h c, khí t ng h p sinh h c (biosyngas), d u sinh h c, than sinh h c vàọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ợc quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là mộtbiohydrogen Trong đó, nhiên li u sinh h c d ng l ng nh biomethanol vàệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ỏng như biomethanol và ưbioethanol được quan tâm và được xem như là mộtc quan tâm nhi u nh t Trền vững đồng thời làm ất được quan tâm và được xem như là một ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc đây, s n xu t ethanol sinh h c chảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ủ

y u t tinh b t và đột ười làmng nh ng đã có nhi u tranh lu n v tính b n v ng c aư ền vững đồng thời làm ền vững đồng thời làm ền vững đồng thời làm ững đồng thời làm ủ

nó Do đó, nguyên li u giàu cellulose đệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtc xem nh là m t l a ch n ti m năng vìư ột ực vật, dầu diesel sinh học, khí ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làmnguyên li u giàu cellulose không c nh tranh v i cây lệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ương thực và giá thành rẻng th c và giá thành rực vật, dầu diesel sinh học, khí ẻ

h n so v i các lo i nguyên li u khác khi dùng đ s n xu t nhiên li u sinh h c.ơng thực và giá thành rẻ ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ển Nhiên liệu sinh ảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là mộtNgoài ra, nguyên li u giàu cellulose còn là ngu n nguyên li u phù h p cho s nệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ợc quan tâm và được xem như là một ảm hiệu

xu t nhiên li u sinh h c vì nh ng lý do sau: ất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ững đồng thời làm

 Là m t ngu n tài nguyên tái t o có th đột ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ển Nhiên liệu sinh ược quan tâm và được xem như là mộtc phát tri n m t cách b nển Nhiên liệu sinh ột ền vững đồng thời làm

v ng trong tững đồng thời làm ương thực và giá thành rẻng lai

 Thân thi n v i môi trệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ười làmng

 Có ti m năng kinh t quan tr ng khi giá nhiên li u hóa th ch có xu hền vững đồng thời làm ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ước đang phát triển Nhiên liệu sinhngtăng (Cadenas và c ng s , 1998; Demirbas, 2008a; Demirbas, 2008b).ột ực vật, dầu diesel sinh học, khíNguyên li u giàu cellulose bao g m t t c các d ng nguyên li u có ngu nệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một

g c th c v t nh g , cây thân th o, cây tr ng và ch t th i đ ng v t ăn c Th cực vật, dầu diesel sinh học, khí ư ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ột ỏng như biomethanol và ực vật, dầu diesel sinh học, khí

v t là ngu n ph bi n nh t c a nguyên li u giàu cellulose Vi c s d ng năngổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ất được quan tâm và được xem như là một ủ ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

lược quan tâm và được xem như là mộtng chuy n đ i t nguyên li u giàu cellulose cho th y nhi u l i ích v môiển Nhiên liệu sinh ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm ợc quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm

trười làmng Sinh kh i có th đển Nhiên liệu sinh ược quan tâm và được xem như là mộtc chuy n thành nhiên li u l ng và khí thông qua cácển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ỏng như biomethanol vàcon đười làmng khác nhau nh nhi t hóa h c và sinh h c ư ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một

Các thành ph n c a nguyên li u giàu cellulose bao g m cellulose,ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ủ ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là mộthemicelluloses, lignin, tro và các h p ch t khác Cellulose và hemicelluloseợc quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một

thười làmng chi m hai ph n ba kh i lầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ược quan tâm và được xem như là mộtng khô c a thành t bào, chúng có th bủ ển Nhiên liệu sinh ị

th y phân thành đủ ười làmng và sau đó lên men thành ethanol sinh h c Celluloseọc đang rất được quan tâm và được xem như là một(chi m 30-60% t ng hàm lổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ược quan tâm và được xem như là mộtng khô) là m t polymer h u c bao g m nhi uột ững đồng thời làm ơng thực và giá thành rẻ ền vững đồng thời làm

đ n v c a glucose liên k t l i v i nhau trong m t phân t m ch th ng Các s iơng thực và giá thành rẻ ị ủ ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ột ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ẳng Các sợi ợc quan tâm và được xem như là mộtcellulose liên k t l i v i nhau b ng các liên k t hydro t o nên tinh th r n ch cạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ển Nhiên liệu sinh ắn chắc ắn chắckhó b phá h y Hemicellulose (chi m 20-40% t ng hàm lị ủ ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ược quan tâm và được xem như là mộtng khô) là m tộtpolymer ng n, phân nhánh cao c a đắn chắc ủ ười làmng năm carbon (pentoses) và sáu carbon(hexoses) C th là hemicellulose ch a xylose và arabinose (đụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ển Nhiên liệu sinh ười làmng năm carbon)

và galactose, glucose, mannose (đười làmng sáu carbon) Hemicellulose d b th yễ bị thủy ị ủphân h n cellulose vì c u trúc phân nhánh và b n ch t vô đ nh hình c a nó Cácơng thực và giá thành rẻ ất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ị ủ

lo i đạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ười làmng chi m u th trong hemicelluloses là mannose trong g m m vàư ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ền vững đồng thời làmxylose trong g c ng và ch t th i nông nghi p Hemicelluloses d b phân h yỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ễ bị thủy ị ủnhi t Lignin (chi m 15-25% t ng hàm lệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ược quan tâm và được xem như là mộtng khô) là m t polymer th m t ngột ơng thực và giá thành rẻ ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và

h p t các ti n ch t phenylpropanoid Các đ n v phenylpropane c a lignin (chợc quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm ất được quan tâm và được xem như là một ơng thực và giá thành rẻ ị ủ ủ

y u là syringyl, guaiacyl và p-hydroxy phenol) được quan tâm và được xem như là mộtc liên k t v i nhau b i m tớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ột

t p h p các m i liên k t đ t o thành m t ma tr n r t ph c t p g m m t lo tợc quan tâm và được xem như là một ển Nhiên liệu sinh ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệucác nhóm ch c năng nh hydroxyl, methoxyl và cacbonyl Ch c năng c a chúngư ủ

là cung c p đ b n k t c u, b o đ m v n chuy n nất được quan tâm và được xem như là một ột ền vững đồng thời làm ất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ảm hiệu ển Nhiên liệu sinh ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc và dinh dưỡng trong cây,ng trong cây,

b o v cây ch ng l i s phân h y do các enzyme th y phân Lignin liên k t đ ngảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ực vật, dầu diesel sinh học, khí ủ ủhóa tr v i xylan trong trị ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ười làmng h p các cây g c ng và galactoglucomannan trongợc quan tâm và được xem như là một ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực

g m m Lignin là m t h p ch t h u c không tan trong nỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ền vững đồng thời làm ột ợc quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ững đồng thời làm ơng thực và giá thành rẻ ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc, b phân h y ị ủ ở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh

251oC (525oK) t o thành các g c t do phenoxyl và các g c t do này có xuạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ực vật, dầu diesel sinh học, khí ực vật, dầu diesel sinh học, khí

hước đang phát triển Nhiên liệu sinhng t o thành k t t a r n thông qua ng ng t ho c tái trùng h p.ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ắn chắc ư ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ặc tái trùng hợp ợc quan tâm và được xem như là một

S n lảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtng ethanol sinh h c t nguyên li u giàu cellulose ph thu c vàoọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ộthàm lược quan tâm và được xem như là mộtng cellulose, hemicellulose và n ng đ đột ười làmng trong nguyên li u th cệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ực vật, dầu diesel sinh học, khí

v t Các lignin không th đển Nhiên liệu sinh ược quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệuc s d ng đ s n xu t ethanol sinh h c.ển Nhiên liệu sinh ảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một

S n xu t ethanol t nguyên li u giàu cellulose bao g m có 3 bảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc chính(Hình 1.1) a) phá h y c u trúc polysaccharides thành các đủ ất được quan tâm và được xem như là một ười làmng có kh năng lênảm hiệu

men b ng cách s d ng acid và enzyme, b) lên men nh ng đằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ững đồng thời làm ười làmng này thànhethanol và c) thu h i ethanol Do lignocellulose là m t c u trúc khó b phá h yột ất được quan tâm và được xem như là một ị ủnên quá trình ti n x lý là m t bền vững đồng thời làm ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ước đang phát triển Nhiên liệu sinh ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khíc c n thi t cho vi c thu th p các lo i đệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ười làmng

có kh năng lên men trong bảm hiệu ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc th y phân M c đích c a ti n x lý là phá vủ ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ền vững đồng thời làm ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ỡng trong cây,

c u trúc lignin và c u trúc tinh th c a cellulose đ tăng cất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ển Nhiên liệu sinh ủ ển Nhiên liệu sinh ười làmng kh năng ti pảm hiệuxúc c a chúng v i các enzyme th y phân.ủ ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ủ

m nh và đạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc hình thành t s chuy n hóa nhóm acetyl trong hemicellolse Cácực vật, dầu diesel sinh học, khí ển Nhiên liệu sinh

h p ch t phenolic có ngu n g c t lignin, bao g m ferulic acid, vanillin, vanillicợc quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là mộtacid, vanillyl alcohol, 4-hydroxybenzoic acid, 4-hydroxybenzaldehyde, coumaricacid, syringaldehyde, syringic acid, cinnamaldehyde, dihydroconiferyl alcohol,hydroquinone, catechol, veratrole, acetoguaiacetone, homovanillic acid vàHibbert’s ketones; trong đó, ferulic acid là ch t c ch n m men r t hi u qu ất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu

Hi u su t chuy n đ i c a cellulose thành glucose có th ph thu c vàoệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ển Nhiên liệu sinh ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ủ ển Nhiên liệu sinh ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột

m c đ c a quá trình ti n x lý hóa ch t và c h c Các phột ủ ền vững đồng thời làm ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ơng thực và giá thành rẻ ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ương thực và giá thành rẻng pháp nghi n vàền vững đồng thời làm

lo i nguyên li u cũng có th nh hạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ển Nhiên liệu sinh ảm hiệu ưở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinhng đ n kh năng ti p xúc c a cellulose v iảm hiệu ủ ớc đang phát triển Nhiên liệu sinhenzyme th y phân.ủ

Chính vì v y, vi c nghiên c u ng d ng các ch ng n m men có kh năngệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệulên men cenllulose có ý nghĩa góp ph n t n d ng tri t đ ngu n ph li u d iầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là mộtdào t cenllulose đ cung c p ngu n năng lển Nhiên liệu sinh ất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtng cho con người làmi Thông qua vi cệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là mộtnghiên c u các đáp ng c a ủ Klyveromyces Marxianus trong cac đi u ki n lên menền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một

có các ch t c ch nh m cun c p nh ng thông tin khoa h c cho quá trình s nất được quan tâm và được xem như là một ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ất được quan tâm và được xem như là một ững đồng thời làm ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu

xu t ethanol thông qua con đất được quan tâm và được xem như là một ười làmng lên men có s d ng ch ng n m men nêu trên.ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ất được quan tâm và được xem như là một

1.2 Ph ương hướng và kế hoạch thực hiện ng h ướng và kế hoạch thực hiện ng và k ho ch th c hi n ế hoạch thực hiện ạch thực hiện ực hiện ện

Đ ti n hành th c hi n đ tài trên, chúng tôi ti n hành kh o sát kh năngển Nhiên liệu sinh ực vật, dầu diesel sinh học, khí ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm ảm hiệu ảm hiệulên men sinh ethanol c a n m men ủ ất được quan tâm và được xem như là một Klyveromyces Marxianus theo các thí nghi mệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một

nh sau:ư

 Thí nghi m 1: Kh o sát quá trình lên men c a n m men ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ủ ất được quan tâm và được xem như là một Klyveromyces Marxianus c đ nh trong h t alginate và t do trong đi u ki n không cóị ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ực vật, dầu diesel sinh học, khí ền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một

ch t c ch ất được quan tâm và được xem như là một

 Thí nghi m 2: Kh o sát quá trình lên men c a n m men ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ủ ất được quan tâm và được xem như là một Klyveromyces Marxianus c đ nh trong h t alginate và t do trong đi u ki n có m t acidị ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ực vật, dầu diesel sinh học, khí ền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ặc tái trùng hợp.acetic (là ch t c ch đ i di n cho nhóm ch t acid h u c có trong s nất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ững đồng thời làm ơng thực và giá thành rẻ ảm hiệu

ph m giàu cenllulose đ' ược quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệuc t o t o thành t vi c chuy n hóa nhóm acetylệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ển Nhiên liệu sinhtrong hemicenllulose)

 Thí nghi m 3: Kh o sát quá trình lên men c a n m men ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ủ ất được quan tâm và được xem như là một Klyveromyces Marxianus c đ nh trong h t alginate và t do trong đi u ki n có m tị ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ực vật, dầu diesel sinh học, khí ền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ặc tái trùng hợp.phenolic

 Thí nghi m 4: Kh o sát quá trình lên men c a n m men c đ nh trong h tệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ủ ất được quan tâm và được xem như là một ị ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệualginate và t do trong đi u ki n có m t 5-hydroxymethyl furfural (5-ực vật, dầu diesel sinh học, khí ền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ặc tái trùng hợp.HMF)

Trong m i thí nghi m nêu trên, chúng tôi ti ng hành trình t nghiên c u theo sỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ực vật, dầu diesel sinh học, khí ơng thực và giá thành rẻ

đ kh i nh sau:ư

Chất ức chế

a Lưu trữ giống

Mục đích : Để đảm bảo cấp đời của giống nấm men Klyveromyces Marxianus là

đồng nhất cho suốt các thí nghiệm, ta cần tiến hành lưu trữ giống cùng một cấp

Tiến hành

- Từ giống cấp 1 ban đầu, ta tiến hành cấy lên đĩa thạch

- Lưu trữ giống trên đĩa thạch vào trong ống eppendorf với 1ml glycerol 20%(điểm đông là -4.8oC)

- Bảo quản trong tủ mát (5oC)

Thiết bị : tủ cấy, tủ mát, máy tiệt trùng

b Lên men

Chuẩn bị môi trường lên men, nuôi giống

Mục đích : chuẩn bị môi trường cho quá trình lên men và nuôi giống trước khicho lên men

Tiến hành :

- Cân các hóa chất cần thiết ( môi trường Hasssen)

giống (300ml/bình)

Môi trường lên

bình)

Cao nấm men(g/l)

MgSO4 (g/l) 1 1

Đường glucose(g/l)

- Tiệt trùng ở 121oC/ 1atm trong thời gian 15 phút, làm khô 10 phút

- Giống từ ống epphendor được ly tâm loại bỏ glycerol và tráng lại bằng nướccất vô trùng, nấm men được cho vào bình có môi trường nuôi giống

- Nấm men được nuôi cho đến cấp 6 và được sử dụng cho quá trình lên men (

số tế bào nấm men > 1 tỷ tb/ml)Thiết bị : cân kỹ thuật, cân phân tích, máy tiệt trùng

c Cố định, tạo hạt gel

Mục đích : tạo môi trường bảo vệ nấm men trong điều kiện lên men có chất ứcchế

Tiến hành:

Sơ đồ khối quá trình tạo hạt gel alginate

H t gel ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệualginate ch a

n m menất được quan tâm và được xem như là một

Nước đang phát triển Nhiên liệu sinhc vô khu n'

Sinh kh i

n m ất được quan tâm và được xem như là mộtmen

Alginate Nước đang phát triển Nhiên liệu sinhc

Ti t trùngệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một

- Đếm số tế bào giống ban đầu.

- Pha loãng dịch giống ban đầu đến số lượng tế bào cần thiết (6.107 TB/ml)

- Trộn dịch giống đã pha loãng với aginate (1.5%) với tỉ lệ 1:1

- Sử dụng máy bơm nhu động, bơm dịch trộn vào môi trường CaCl2 tạo hạtgel

- Hạt gel được bảo quản trong tủ mát 1 giờ trước khi sử dụng, cho vào bìnhlên men

Thiết bị : máy bơm nhu động, máy khấy từ

Bổ sung hạt gel vào môi trường lên men

Mục đích : tiến hành bổ sung nấm men được cố định trong gel alginate và nấmmen tự do vào mỗi bình chứa dịch lên men

Tiến hành :

- Phá hạt gel, đếm số tế bào nấm men trong hạt

- Đối với mẫu cố định : Tính toán số hạt cần thiết để đảm bảo đủ số tế bàonấm men cần lên men trong một bình (107 tb/ml)

- Đối với mẫu tự do : tính toán thể tích dịch giống ban đầu cần thiết bổ sungvào dịch lên men trong mỗi bình để đảm bảo đủ sô tế bào lên men (107

Thông số : Chất ức chế được sử dụng trong khảo sát là acid acetic và furfurol

- Acid acetic với hàm lượng (g/l) : 0 – 2 – 4- 6 – 8 – 10

- Furfurol với hàm lượng (g/l) : 0 – 0.4 – 0.8 – 1.2 – 1.6 – 2

Thiết bị : cân phân tích

Lên men

Mục đích : tạo điều kiện cho nấm men hoạt động

II N i dung thí nghi m ội dung thí nghiệm ện

V i m c đ tìm hi u hi n t i, chúng tôi ti n hành các phớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ột ển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ương thực và giá thành rẻng phápnghiên c u theo cách c đi n, t c là kh o sát các thay đ i c a m t y u t c nổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ển Nhiên liệu sinh ảm hiệu ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ủ ột ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khíquan tâm và c đ nh các y u t khác D u bi t r ng vi c kh o sát này sẽ d nị ẫn xuất của ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ẫn xuất của

đ n m t s cách nhìn ch quan và không th đánh giá m t cách toàn di n đột ủ ển Nhiên liệu sinh ột ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtc

s tực vật, dầu diesel sinh học, khí ương thực và giá thành rẻng tác c a các y u t v i nhau nh trong phủ ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ư ương thực và giá thành rẻng pháp quy ho ch th cạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ực vật, dầu diesel sinh học, khínghi m nh ng chúng tôi cũng c g ng cung c p nh ng thông tin chính xác đángệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ư ắn chắc ất được quan tâm và được xem như là một ững đồng thời làmtin c y b i nh ng phở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ững đồng thời làm ương thực và giá thành rẻng pháp khoa h c đã đọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtc ki m ch ng và có nguyên t cển Nhiên liệu sinh ắn chắc

rõ ràng

2.1 Xác đ nh t bào n m men s ng/ ch t và hình thái c a chúng ịnh tế bào nấm men sống/ chết và hình thái của chúng ế hoạch thực hiện ấm men sống/ chết và hình thái của chúng ống/ chết và hình thái của chúng ế hoạch thực hiện ủa đề tài

Do m c tiêu c a chúng tôi là đánh giá kh năng lên men sinh ethanol c aụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ảm hiệu ủ

n m men nên vi c quan sát hình thái c a các t bào n m men hông qua s lất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ủ ất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtng

t bào n m men s ng/ ch t trong quá trình lên men là r t c n thi t nh m đánhất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắcgiá đúng kh năng lên men c a ch ng n m men ảm hiệu ủ ủ ất được quan tâm và được xem như là một Klyveromyces Marxianus Đ quáển Nhiên liệu sinhtrình quan sát được quan tâm và được xem như là mộtc chính xác, chúng tôi ti n hành quan sát tr c ti p sau m i l nực vật, dầu diesel sinh học, khí ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí

l y m u (l y m u m i l n sau m i 12 gi lên men) b ng kính hi n vi quang h cất được quan tâm và được xem như là một ẫn xuất của ất được quan tâm và được xem như là một ẫn xuất của ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ời làm ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ển Nhiên liệu sinh ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một

và bu ng đ m h ng c u.ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí

Bên c nh đó, chúng tôi cũng ti n hành quan sát b m t c a các t bàoạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ủ

n m men trong các đi u ki n môi trất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ười làmng lên men khác nhau nh m h tr , gi iằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ợc quan tâm và được xem như là một ảm hiệu

thích thêm v tác đ ng c a đi u ki n stress đ n n m men t do và n m men cền vững đồng thời làm ột ủ ền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ực vật, dầu diesel sinh học, khí ất được quan tâm và được xem như là một

đ nh Đ quan sát b m t n m men, chúng tôi ti n hành l u tr m u trong đi uị ển Nhiên liệu sinh ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ất được quan tâm và được xem như là một ư ững đồng thời làm ẫn xuất của ền vững đồng thời làm

ki n -6ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một oC c a t đông và g i m u đ n trung tâm phân tích có thi t b kính hi nử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ẫn xuất của ị ển Nhiên liệu sinh

vi đi n t quét (SEM) đ ch p hình.ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ển Nhiên liệu sinh ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

2.1.1 M c đích ục đích

- Xác đ nh tr ng thái sinh lý c a n m men trong canh trị ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ất được quan tâm và được xem như là một ười làmng thông qua

phương thực và giá thành rẻng pháp đ m s t bào s ng/ ch t b ng cách nhu m màu xanh methylenằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ộttrên bu ng đ m h ng c u.ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí

- Quan sát hình thái b m t c a n m men trong dung d ch có các stress vàền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ủ ất được quan tâm và được xem như là một ịethanol b ng kính hi n vi đi n t quét (Scanning electron microscope – SEM)ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

- Các t bào s ng có ch a enzyme có kh năng làm m t màu xanh c aảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ủmethylen Khi ngâm t bào vào dung d ch xanh methylen thì ch t này đi quaị ất được quan tâm và được xem như là mộtmàng t bào và b các enzyme bên trong t bào oxy hóa m t màu xanh trong khiị ất được quan tâm và được xem như là mộtcác t bào ch t không ti t enzyme nên nh ng t bào này b t màu xanh c a xanhững đồng thời làm ắn chắc ủmethylen

- Kính hi n vi đi n t quét (ển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu Scanning electron microscopy – SEM) t o raạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

nh có đ phân gi i cao c a b m t m u b ng cách s d ng m t chùm electron

ảm hiệu ột ảm hiệu ủ ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ẫn xuất của ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột

h p quét lên b m t m u Vi c t o nh m u v t đ( ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ẫn xuất của ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ảm hiệu ẫn xuất của ược quan tâm và được xem như là mộtc th c hi n thông qua vi cực vật, dầu diesel sinh học, khí ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là mộtghi nh n và phân tích các b c x phát ra t tạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ương thực và giá thành rẻng tác gi a chùm electron và bững đồng thời làm ền vững đồng thời làm

m t m u.ặc tái trùng hợp ẫn xuất của

2.1.3 Thi t b và cách ti n hành ế hoạch thực hiện ịnh tế bào nấm men sống/ chết và hình thái của chúng ế hoạch thực hiện

a Kính hi n vi quang h c ển vi quang học ọc

 C u t o thi t b ất cao (HPLC) ạo thiết bị ết bị ị

Hình 2 1 Các b ph n c a kính hi n vi quang h c ộng sự, 2007) ận của kính hiển vi quang học ủa kính hiển vi quang học ển vi quang học ọc

 Nguyên t c ho t đ ng ắc kí lỏng áp suất cao (HPLC) ạo thiết bị ộng sự, 2007)

Kính hi n vi quang h c ho t đ ng hoàn toàn trên nguyên t cển Nhiên liệu sinh ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ắn chắc khúc x ánhạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệusáng qua h cácệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một th u kínhất được quan tâm và được xem như là một th y tinhủ V t kính, là lo i th u kính có tiêu c ng n,ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ực vật, dầu diesel sinh học, khí ắn chắc

là b ph n chính t o nên s phóng đ i nh c a m u v t nh t o ra qua th uột ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ực vật, dầu diesel sinh học, khí ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ảm hiệu ủ ẫn xuất của Ảnh tạo ra qua thấu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là mộtkính này là nh th t, và ngảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc chi u so v i v t m u ban đ u nh đền vững đồng thời làm ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ẫn xuất của ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí Ảnh tạo ra qua thấu ược quan tâm và được xem như là mộtc quan sát

- Bước đang phát triển Nhiên liệu sinhc 2: pha loãng m u đã chu n b bẫn xuất của ' ị ở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc 1 v i xanh methylen theo tớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ỉ được lật đúng chiều nhờ hệ thấu kính (hoặc

l 1:1 r i l c đ u ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ắn chắc ền vững đồng thời làm

- Bước đang phát triển Nhiên liệu sinhc 3: Ti n hành b m m u bơng thực và giá thành rẻ ẫn xuất của ở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc 2 vào bu ng đ m và quan sát dước đang phát triển Nhiên liệu sinhikính hi n vi đ n t đó tính đển Nhiên liệu sinh ển Nhiên liệu sinh ược quan tâm và được xem như là mộtc s t bào trong m u theo công th c sau:ẫn xuất của

A 4000 Độ pha loãng

Trong đó: A là s t bào đ m được quan tâm và được xem như là mộtc (50≤ A ≤ 200)

b Kính hi n vi đi n t quét (SEM) ển vi quang học ện tử quét (SEM) ử quét (SEM)

 C u t o thi t b ất cao (HPLC) ạo thiết bị ết bị ị

Hình 2 2 S đ kh i c u t o h th ng kính hi n vi đi n t quét (SEM) ơng pháp DNS ồ ối cấu tạo hệ thống kính hiển vi điện tử quét (SEM) ất cao (HPLC) ạo thiết bị ện tử quét (SEM) ối cấu tạo hệ thống kính hiển vi điện tử quét (SEM) ển vi quang học ện tử quét (SEM) ử quét (SEM)

 Nguyên t c ho t đ ng ắc kí lỏng áp suất cao (HPLC) ạo thiết bị ộng sự, 2007)

Vi c phát các chùm đi n t trong SEM cũng gi ng nh vi c t o ra chùmệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ư ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

đi n t trongệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu kính hi n vi đi n t truy n quaển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ền vững đồng thời làm , t c là đi n t đệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc phát ra tsúng phóng đi n t (có th là phát x nhi t, hay phát x trệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ển Nhiên liệu sinh ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ười làmng ), sau đó được quan tâm và được xem như là mộtctăng t c Tuy nhiên, th tăng t c c a SEM thủ ười làmng ch t 10 kV đ n 50 kV vì sỉ được lật đúng chiều nhờ hệ thấu kính (hoặc ực vật, dầu diesel sinh học, khí

h n ch c a th u kính t , vi c h i t các chùm đi n t có bạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ột ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc sóng quá nhỏng như biomethanol vàvào m t đi m kích thột ển Nhiên liệu sinh ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc nh sẽ r t khó khăn Đi n t đỏng như biomethanol và ất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc phát ra, tăng t c và

h i t thành m t chùm đi n t h p (c vài trăm Angstrong đ n vài nanomet)ột ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ( ỡng trong cây,

nh h th ng th u kính t , sau đó quét trên b m t m u nh các cu n quét tĩnhời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ẫn xuất của ời làm ột

đi n Đ phân gi i c a SEM đệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ột ảm hiệu ủ ược quan tâm và được xem như là mộtc xác đ nh t kích thị ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc chùm đi n t h i t ,ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

mà kích thước đang phát triển Nhiên liệu sinh ủc c a chùm đi n t này b h n ch b i quang sai Ngoài ra, đ phânệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ị ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ột

gi i c a SEM còn ph thu c vào tảm hiệu ủ ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ương thực và giá thành rẻng tác gi a v t li u t i b m t m u v t vàững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ẫn xuất của

đi n t Khi đi n t tệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ương thực và giá thành rẻng tác v i b m t m u v t, sẽ có các b c x phát ra, sớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ẫn xuất của ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ực vật, dầu diesel sinh học, khí

t o nh trong SEM và các phép phân tích đạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc th c hi n thông qua vi c phânực vật, dầu diesel sinh học, khí ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là mộttích các b c x này Các b c x ch y u g m:ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ

 Đi n t th c p (Secondary electrons): Đây là ch đ ghi nh thông d ngệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ột ảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

nh t c a kính hi n vi đi n t quét, chùm đi n t th c p có năng lất được quan tâm và được xem như là một ủ ển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtng

th p (thất được quan tâm và được xem như là một ười làmng nh h n 50 eV) đỏng như biomethanol và ơng thực và giá thành rẻ ược quan tâm và được xem như là mộtc ghi nh n b ng ng nhân quang nh pằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ất được quan tâm và được xem như là mộtnháy Vì chúng có năng lược quan tâm và được xem như là mộtng th p nên ch y u là các đi n t phát ra tất được quan tâm và được xem như là một ủ ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

b m t m u v i đ sâu ch vài nanomet, do v y chúng t o ra nh haiền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ẫn xuất của ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ột ỉ được lật đúng chiều nhờ hệ thấu kính (hoặc ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ảm hiệuchi u c a b m t m u.ền vững đồng thời làm ủ ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ẫn xuất của

 Đi n tệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu tán xạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ngược quan tâm và được xem như là mộtc (Backscattered electrons): Đi n t tán x ngệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc làchùm đi n t ban đ u khi tệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ương thực và giá thành rẻng tác v i b m t m u b b t ngớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ẫn xuất của ị ược quan tâm và được xem như là mộtc tr l i,ở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

do đó chúng thười làmng có năng lược quan tâm và được xem như là mộtng cao S tán x này ph thu c r t nhi uực vật, dầu diesel sinh học, khí ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làmvào thành ph n hóa h c b m t m u, do đó nh đi n t tán x ngầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ẫn xuất của ảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc

r t h u ích cho phân tích v đ tất được quan tâm và được xem như là một ững đồng thời làm ền vững đồng thời làm ột ương thực và giá thành rẻng ph n thành ph n hóa h c Ngoài ra,ảm hiệu ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ọc đang rất được quan tâm và được xem như là một

đi n t tán x ngệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc có th dùng đ ghi nh n nhển Nhiên liệu sinh ển Nhiên liệu sinh ảm hiệu nhi u x đi n tễ bị thủy ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu tán

x ngạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc, giúp cho vi c phân tích c u trúc tinh th (ch đ phân c c đi nệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ển Nhiên liệu sinh ột ực vật, dầu diesel sinh học, khí ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một

t ) Ngoài ra, đi n t tán x ngử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc ph thu c vào các liên k t đi n t i bụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ền vững đồng thời làm

m t m u nên có th đem l i thông tin v các đômen s t đi n.ặc tái trùng hợp ẫn xuất của ển Nhiên liệu sinh ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ền vững đồng thời làm ắn chắc ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một

 Cách ti n hành ết bị

Do đ c đi m ho t đ ng c a kính hi n vi đi n t quét là s d ng cho cácặc tái trùng hợp ển Nhiên liệu sinh ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ủ ển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

m u d n đi n nh ng đ i v i m u c a đ tài là m u t bào n m men không d nẫn xuất của ẫn xuất của ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ư ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ẫn xuất của ủ ền vững đồng thời làm ẫn xuất của ất được quan tâm và được xem như là một ẫn xuất của

đi n nên c n có quá trình ti n x lý trệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ền vững đồng thời làm ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc khi ti n hành quan sát b ng SEM.ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắcNguyên t c chung c a vi c ti n x lý này chính là ph lên trên b m t c a m uắn chắc ủ ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ền vững đồng thời làm ặc tái trùng hợp ủ ẫn xuất của

m t l p màng kim lo i r t m ng (ch ng vài nm) nh m t cách ột ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ỏng như biomethanol và ư ột “nhân t o” ạo” đển Nhiên liệu sinh

tăng kh năng phát x đi n t C th , theo tìm hi u c a chúng tôi t ảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ển Nhiên liệu sinh ển Nhiên liệu sinh ủ Egerton R.

F (2005) n m men sẽ đất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtc c đ nh trên đ đ ng b ng keo dán carbon có tínhị ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc

d n đi n và sau đó đẫn xuất của ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtc ph m t l p Platin trong đi u ki n chân không b ngủ ột ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắcthi t b JFC-1600 (JEOL company) và quan sát b ng kính hi n vi đi n t quétị ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệuJSM-7401F (JEOL company)

2.2 Thí nghi m ki m tra đ ện ểm tra đường sót trong quá trình lên men ường sót trong quá trình lên men ng sót trong quá trình lên men

Trong ph m vi đ tài này, chúng tôi ti n hành quá trình ki m soát lạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ền vững đồng thời làm ển Nhiên liệu sinh ược quan tâm và được xem như là mộtng

đười làmng sót trong su t quá trình lên men theo hai phương thực và giá thành rẻng pháp đ có đánh giáển Nhiên liệu sinhkhách quan nh t v quá trình lên men.ất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm

 Cách 1: ki m tra lển Nhiên liệu sinh ược quan tâm và được xem như là mộtng đười làmng sót ngay sau quá trình thu nh n m u t i cácẫn xuất của ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu

th i đi m lên men nh t đ nh (0, 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96 gi ) b ngời làm ển Nhiên liệu sinh ất được quan tâm và được xem như là một ị ời làm ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc

phương thực và giá thành rẻng pháp quang ph so màu v i thu c th 3,5 – dinitrosalicylic acidổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu(DNS) (Miller, 1959)

 Cách 2: ki m tra lển Nhiên liệu sinh ược quan tâm và được xem như là mộtng đười làmng sót m t cách t p trung các m u (l u trột ẫn xuất của ư ững đồng thời làm

m u trong th i gian dài và ki m tra cùng lúc) t i phòng thí nghi m đ tẫn xuất của ời làm ển Nhiên liệu sinh ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệutiêu chu n ISO 17025 b ng ph' ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ương thực và giá thành rẻng pháp s c kí l ng áp su t cao (HPLC).ắn chắc ỏng như biomethanol và ất được quan tâm và được xem như là một

Đ i v i cách 1, chúng tôi ti n hành ki m tra tr c ti p t i đi u ki n phòng thíớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ển Nhiên liệu sinh ực vật, dầu diesel sinh học, khí ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là mộtnghi m M c đích c a vi c th c hi n phệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ực vật, dầu diesel sinh học, khí ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ương thực và giá thành rẻng pháp này là nh m theo dõi su tằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắcquá trình lên men c a các m đ phát hi n và có cách hi u ch nh nh m kh củ ẻ ển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ỉ được lật đúng chiều nhờ hệ thấu kính (hoặc ằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ắn chắc

ph c k p th i n u có v n đ phát sinh trong quá trình ti n hành thí nghi m.ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ị ời làm ất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là mộtTrong khi đó, cách 2 ti n hành nh m đ m b o chính xác nh t v k t qu v i sằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ảm hiệu ảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ền vững đồng thời làm ảm hiệu ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ực vật, dầu diesel sinh học, khí

h tr c a thi t b hi n đ i h n.ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ợc quan tâm và được xem như là một ủ ị ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ơng thực và giá thành rẻ

2.2.1 M c đích ục đích

Phát hi n lệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ược quan tâm và được xem như là mộtng đười làmng kh glucose còn sót l i trong canh trử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ười làmng trong

su t quá trình lên men đ t đó đánh giá kh năng lên men c a n m men.ển Nhiên liệu sinh ảm hiệu ủ ất được quan tâm và được xem như là một

2.2.2 Nguyên t c ắc

a Ph ương pháp DNS ng pháp DNS

Phương thực và giá thành rẻng pháp này d a trên ph n ng t o màu c a thu c thực vật, dầu diesel sinh học, khí ảm hiệu ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu3,5 – dinitrosalicylic acid (DNS) (màu vàng trong dung d ch ki m) v i đị ền vững đồng thời làm ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ười làmng khử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệuthành 3 – amino – 5 – nitrosalicylic (màu đ cam) Cỏng như biomethanol và ười làmng đ màu c a h n h pột ủ ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ợc quan tâm và được xem như là một

ph n ng t l thu n v i n ng đ đảm hiệu ỉ được lật đúng chiều nhờ hệ thấu kính (hoặc ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ột ười làmng kh trong m t ph m vi nh t đ nh,ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ị

được quan tâm và được xem như là mộtc đo b ng máy quang ph so màu D a theo đ th đằng các liên kết hydro tạo nên tinh thể rắn chắc ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ực vật, dầu diesel sinh học, khí ị ười làmng chu n glucose tinh'khi t v i thu c th , ta sẽ tính đớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc hàm lược quan tâm và được xem như là mộtng đười làmng kh c a m u ngiên c uử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ủ ẫn xuất củakhi bi t đ h p thu c a m u (OD m u).ột ất được quan tâm và được xem như là một ủ ẫn xuất của ẫn xuất của

H p ch t t o thành có đ h p thu m nh nh t bợc quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc sóng 540 – 600nm(Miller, 1959) nên ta ti n hành đo m u bẫn xuất của ở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc sóng 540nm

b Ph ương pháp DNS ng pháp s c kí l ng áp su t cao (HPLC) ắc kí lỏng áp suất cao (HPLC) ỏng áp suất cao (HPLC) ất cao (HPLC)

HPLC được quan tâm và được xem như là mộtc th c hi n d a trên vi c b m đ đ y m t lực vật, dầu diesel sinh học, khí ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ực vật, dầu diesel sinh học, khí ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ơng thực và giá thành rẻ ển Nhiên liệu sinh ' ột ược quan tâm và được xem như là mộtng ch t l ngất được quan tâm và được xem như là một ỏng như biomethanol và

dước đang phát triển Nhiên liệu sinhi áp su t cao và h n h p m u c n phân tích đi qua m t c t đất được quan tâm và được xem như là một ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ợc quan tâm và được xem như là một ẫn xuất của ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ột ột ược quan tâm và được xem như là mộtc nh i đ yầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí

m t lo i ch t h p ph và t đó d n t i vi c tách các thành ph n c a m u Ch tột ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ẫn xuất của ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ủ ẫn xuất của ất được quan tâm và được xem như là một

h p ph – đất được quan tâm và được xem như là một ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ược quan tâm và được xem như là mộtc nh i trong c t, là các h t r n (nh silica, polymers) v i kíchột ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ắn chắc ư ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh

thước đang phát triển Nhiên liệu sinhc t 2 – 50 µm Các thành ph n trong h n h p m u đầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ợc quan tâm và được xem như là một ẫn xuất của ược quan tâm và được xem như là mộtc tách ra kh i nhauỏng như biomethanol và

nh vào m c đ tời làm ột ương thực và giá thành rẻng tác khác nhau v i các h t ch t h p ph Dòng ch t l ngớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ỏng như biomethanol và

dước đang phát triển Nhiên liệu sinhi áp su t cao thất được quan tâm và được xem như là một ười làmng là h n h p c a các dung môi (nỗ, cây thân thảo, cây trồng và chất thải động vật ăn cỏ Thực ợc quan tâm và được xem như là một ủ ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc, acetonitrilevà/ho c methanol), đặc tái trùng hợp ược quan tâm và được xem như là mộtc g i là “pha đ ng” Thành ph n và nhi t đ dung môiọc đang rất được quan tâm và được xem như là một ột ầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ộtđóng vai trò chính trong quá trình tách ch t do tất được quan tâm và được xem như là một ương thực và giá thành rẻng tác x y ra gi a các thànhảm hiệu ững đồng thời làm

ph n c a m u và ch t h p ph V b n ch t, các tầu thực vật, dầu diesel sinh học, khí ủ ẫn xuất của ất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một ụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ền vững đồng thời làm ảm hiệu ất được quan tâm và được xem như là một ương thực và giá thành rẻng tác này là tương thực và giá thành rẻng tác v t

lý nh tư ương thực và giá thành rẻng tác k nị ước đang phát triển Nhiên liệu sinhc (phân tán), tương thực và giá thành rẻng tác lưỡng trong cây,ng c c và tực vật, dầu diesel sinh học, khí ương thực và giá thành rẻng tác ion, thông

thười làmng nh t là t ng h p c a t t c các tất được quan tâm và được xem như là một ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ợc quan tâm và được xem như là một ủ ất được quan tâm và được xem như là một ảm hiệu ương thực và giá thành rẻng tác trên

HPLC u vi t h n so v i phư ệu sinh học đang rất được quan tâm và được xem như là một ơng thực và giá thành rẻ ớc đang phát triển Nhiên liệu sinh ương thực và giá thành rẻng pháp s c ký l ng c đi n (áp su t th p)ắn chắc ỏng như biomethanol và ổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ển Nhiên liệu sinh ất được quan tâm và được xem như là một ất được quan tâm và được xem như là một

b i vì áp su t ho t đ ng cao h n nhi u (t 50-400 bar) trong khi kỹ thu t s cở các nước đang phát triển Nhiên liệu sinh ất được quan tâm và được xem như là một ạch Sử dụng nhiên liệu sinh học làm giảm hiệu ột ơng thực và giá thành rẻ ền vững đồng thời làm ắn chắc

ký c đi n ch d a trên l c h p d n đ đ y pha đ ng ra kh i c t Do ch có m tổng hợp sinh học (biosyngas), dầu sinh học, than sinh học và ển Nhiên liệu sinh ỉ được lật đúng chiều nhờ hệ thấu kính (hoặc ực vật, dầu diesel sinh học, khí ực vật, dầu diesel sinh học, khí ất được quan tâm và được xem như là một ẫn xuất của ển Nhiên liệu sinh ' ột ỏng như biomethanol và ột ỉ được lật đúng chiều nhờ hệ thấu kính (hoặc ột

lược quan tâm và được xem như là mộtng nh m u đỏng như biomethanol và ẫn xuất của ược quan tâm và được xem như là mộtc tách trong phân tích HPLC, vì v y c t thông thột ười làmng có

đười làmng kính kho ng 2.1 – 4.6 mm và đ dài kho ng 30-250 mm Ngoài ra, c t s cảm hiệu ột ảm hiệu ột ắn chắc