Tiểu luận Sinh dược học bào chế Sinh dược học thuốc tiêm và thuốc nhỏ mắt

Họ và tên : Lớp : Cao học Mã HV : Môn: Sinh dược học bào chế Sinh dược học thuốc tiêm và thuốc nhỏ mắt Đề bài Hãy tìm một ví dụ thuốc tiêm hoặc thuốc nhỏ mắt tác dụng kéo dài, nội dung:

Họ và tên :

Lớp : Cao học

Mã HV :

Môn: Sinh dược học bào chế Sinh dược học thuốc tiêm và thuốc nhỏ mắt

Đề bài

Hãy tìm một ví dụ thuốc tiêm hoặc thuốc nhỏ mắt tác dụng kéo dài, nội dung:

 Phương pháp bào chế (nguyên lý, tá dược, tiến hành…), 

Đánh giá tính chất (hình thái, kích thước tiểu phân…),

Đánh giá in vitro, in vivo (nếu có)

Bài làm

Tiểu phân nano Eudragit® (RS100 hoặc RL100) có chứa

Piroxicam I.Phương pháp bào chế:

1.Nguyên lý: Hầu hết nhiễm khuẩn mắt đều có triệu chứng viêm, sử dụng sinh phẩm tra mắt có chứa piroxicam giúp cải thiện triệu chứng viêm nhanh chóng, mang lại hiệu quả điều trị tốt Tuy nhiên sinh khả dụng thấp do tính thấm kém và rửa trôi nhanh Nhiều hệ thống đưa thuốc mới dùng cho mắt như hệ tiểu phân micro, liposome hay tiểu phân nano được nghiên cứu và phát triển với mục đích kéo dài tác dụng của thuốc nhỏ mắt Hệ tiểu phân nano polyme mang thuốc vừa làm tăng sự thấm dược chất do có kích thước nano, vừa bảo vệ,che chở dược chất đồng thời kéo dài tác dụng của dược chất Polymer Eudragit® RS100 (RS) và RL100 (RL) là chất mang thuốc kích thước nano với đặc tính ổn định, phân bố kích thước tốt và tích điện dương có thể tương tác với anion của mucin làm tăng thời gian lưu giữ tiểu phân nano ở bề mặt giác mạc

2 Công thức:

Polymer Eudragit® RS100 (RS) hoặc

RL100 (RL)

Polymer bẫy dược chất, ổn định và kéo dài tác dụng

Nước, ethanol tuyệt đối Dung môi

3.Phương pháp bào chế: phương pháp bốc hơi dung môi từ nhũ tương

Bước 1: chuẩn bị

- Dung dịch dược chất và polyme: hòa tan piroxicam, Eudragit (RS100,

RL100, S100) và tá dược khác (nếu có trong 7,5 ml hỗn hợp ethanol và dicloromethan theo tỷ lệ 1:2 (dung dịch C)

- Môi trường phân tán: hòa tan PVA trong nước (nồng độ thay đổi theo mục tiêu khảo sát), lọc qua màng lọc cellulose acetat kích thước lỗ lọc 0,2 µm (dung dịch D), làm lạnh ở nhiệt độ từ -2 0C đến 00C

Bước 2: tạo nhũ tương D/N

- Nhũ hóa từ từ dung dịch C vào dung dịch D trong 5 phút (tốc độ 1,5 ml/phút) Làm lạnh bằng hỗn hợp đá muối, duy trì nhiệt độ trong khoảng khảo sát (0-200C) Khuấy trộn liên tục trong thời gian phối hợp hai dung dịch

- Tiếp tục khuấy trộn bằng thiết bị khác (siêu âm, đồng nhất hóa) trong 5 phút,

Bước 3: Loại dung môi:

- Loại dung môi dicloromethan và ethanol bằng cách bốc hơi ở nhiệt độ phòng kết hợp với khuấy từ khoảng 400 vòng phút, trong 24 giờ

- Loại dung dịch PVA bằng cách ly tâm với tốc độ 15000 vòng/phút trong 30 phút Rửa phần cắn 3 lần bằng nước tinh khiết

-Loại nước bằng cách đông khô

Piroxicam

E udragit RS 100

Hòa tan

Lọc loại khuẩn

Cân

Hòa tan

Lọc loại khuẩn

Dicloromethan

và EtOH (2:1)

PVA

Nước cất

Dung dịch piroxicam vô khuẩn

Dung dịch PVA

vô khuẩn

Phối hợp

Bốc hơi dung môi

Ly tâm, rửa tủa

Đông khô

Nước cất pha tiêm

Hòa tan

Lọc vô khuẩn

Manitol Nước cất pha tiêm

Tốc độ phối hợp 1,5ml/ph Nhiệt độ 0-50C

Tốc độ khuấy 18000v/ph( máy 4 cánh khuấy, 5 phút)

15000 /ph máy ĐN H, hút)

Khuấ y 400 v/ph, 24 giờ, Nhiệt độ phòng thí

nghiệm

DD manitol

vô khuẩn

II Đánh giá tính chất và đánh giá in vitro:

III Kết quả đánh giá:

1.Kích thước tiểu phân và thế zeta:

Kích thước tiểu phân:

Tiểu phân piroxicam bào chế với Eudragit (n=5)

TT Tỷ lệ dược chất và chất mang Hình dạng, KTTP trung bình

1 Piroxicam:Eud RS 100= 1:2,5

(PERS2,5)

Hình cầu xen kẽ khối tinh thể

800 - 1000 nm PDI > 0,5

2 Piroxicam:Eud RS 100 = 1:5

(PERS5)

Đa số hình cầu, 357,5 ± 21,3 nm,

PDI = 0,231 ± 0,027

3 Piroxicam:Eud RS100 = 1:10

(PERS10)

Đa số hình cầu, 332,8 ± 32,6 nm

PDI= 0,387 ± 0,052

1 Kích thước tiểu

phân

Đo KTTP bằng phương pháp tán xạ laser sử dụng máy

đo kích thước tiểu phân

Thế zêta Phương pháp đo tán xạ ánh sáng điện di.Thí nghiệm

được tiến hành trên 3 mẫu bào chế

- Mẫu 1: hệ tiểu phân chỉ có piroxicam (P)

- Mẫu 2: hệ tiểu phân chỉ có riêng Eudragit RS100 (E-RS)

- Mẫu 3: hệ tiểu phân piroxicam-Eudragit RS100 tỷ lệ 1:5 (PE-RS5)

2 Định lượng

Ciprofloxacin.HCl

RP-HPLC: pha động : ethanol : dung dịch đệm citro-phosphat (55:45), điều chỉnh tới pH 4-4.5 Tốc độ dòng: 1,0 ml phút Bước sóng phát hiện 254nm

3 Thử độ giải phóng

in vitro

Thử qua màng thẩm tích theo nguyên tắc khuếch tán có giá trị giới hạn là 12.000Da, dùng 300mg gel

nano Sau mỗi giờ, lấy 1 ml môi trường, bổ sung 1 ml môi trường khuếch tán mới và tiến hành thí nghiệm trong 6 giờ Mỗi lần lấy 1ml, bổ sung 1ml môi trường khuếch tán mới Mẫu đem định lượng bằng đo quang UV-VIS so sánh với mẫu chuẩn

4 Piroxicam:Eud RL100 = 1:2,5

(PERL2,5)

Đa số hình cầu, 986,7 ± 121,3 nm

PDI > 0,5

5 Piroxicam:Eud RL 100 = 1:5

(PERL5)

627,4 ± 35,7 nm

6 Piroxicam:Eud RL100 = 1:10

(PERL10)

Đa số hình cầu 538,2 ± 25,3 nm, xuất hiện những tiểu phân polyme không chứa dược chất, kích thước nhỏ (50-200 nm)

7 Piroxicam:Eud S 1:2,5

(PES2,5)

Hình trứng, hình cầu, khối tinh thể

1600 - 1800 nm

8 Piroxicam:Eud S 1:5

(PES5)

Hình trứng, hình cầu, khối tinh thể

700 - 100 nm

9 Piroxicam:Eud S 1:10

(PES10)

1000 - 1200 nm

Dựa vào kết quả trong bảng trên có thể nhận định như sau:

- Trong 3 loại Eudragit đã khảo sát, Eudragit RS 100 tạo ra hệ tiểu phân có kích thước nhỏ

và đều nhất

-Kích thước tiểu phân khác nhau đáng kể khi thay đổi tỷ lệ và 2 loại polymer

này.Tăng tỷ lệ polymer làm tăng độ nhớt, do đó làm tiểu phân to hơn

-Đông khô làm tăng đáng kể kích thước của tiểu phân nano của cả 2 loại polymer

do sự hình thành các tinh thể nước đá trong pha nước làm tích tụ tiểu phân dẫn tới

khó tái phân tán lại tiểu phân

Thế zeta:

Trong nước, các công thức chứa Eudragit cho thế zeta dương rất lớn

Thế Zeta của tiểu phân trong nước (n=5)

Thế Zeta (mV) -10,1 ± 1,6 + 28,5 ± 1,1 + 25,2 ± 1,3

Ảnh hưởng của kích thước tiểu phân

Nhiều công trình nghiên cứu về nano đã cho thấy: KTTP nano làm cho lượng dược chất thấm qua màng sinh học tăng lên [19], [58], [72] Trong nội dung nghiên cứu này, khả năng thấm của hệ tiểu phân nano được khảo sát trên 3 mẫu hỗn dịch chứa tiểu phân kích thước 300 nm (PDI = 0,07), 600 nm (PDI= 0,06) , 1000 nm (PDI = 0,05) và so sánh với hỗn dịch quy ước Kết quả cho thấy lượng piroxicam thấm qua giác mạc từ hỗn dịch KTTP 300 nm cao gấp đôi so với hỗn dịch KTTP 600 nm, cao gấp 4 lần so với hỗn dịch KTTP 1000 nm và 10 lần so với hỗn dịch quy ước Với kết quả nghiên cứu của đề tài, các hỗn dịch chứa piroxicam nano đều có KTTP trung bình từ 300 đến 350

nm Các kết quả này có triển vọng tốt trong nghiên cứu bào chế thuốc nhỏ mắt hướng tới sinh khả dụng cao

2.Khảo sát nồng độ piroxicam trong trong thủy dịch mắt thỏ sau khi nhỏ thuốc 0,5% (n=6)

Thời gian

(phút)

Nồng độ piroxicam trong thủy dịch mắt thỏ (ng/ml)

Hỗn dịch nano Dung dịch Hỗn dịch quy ước

5 925,85 ± 66,73 1362,97± 44,66 1229,17 ± 223,35

10 2103,14 ± 476,60 6049,71 ± 294,79 3198,99 ± 712,67

15 2998,75 ± 390,05 7603,23 ± 491,80 3340,89 ± 213,97

20 3609,36 ± 235,83 7793,57 ± 643,61 3367,34 ± 468,66

25 4902,13 ± 842,84 5357,56 ± 623,37 2666,62 ± 557,91

30 7058,06 ± 399,57 4489,47 ± 421,79 2131,73 ± 191,93

45 5456,73 ± 319,79 1847,11 ± 33,72 1188,63 ± 157,38

60 3515,44 ± 331,46 1042,75 ± 47,15 1066,12 ± 171,36

120 1963,72 ± 252,95 347,82 ± 75,84 764,21 ± 155,67

Kết quả cho thấy dung dịch và hỗn dịch quy ước đạt được

Cmax sau 20 phút trong khi đó hỗn dịch nano đạt được Cmax sau 30 phút Nồng độ đỉnh của hỗn dịch nano bằng 90% so với dung dịch nhưng đạt 210 % so với hỗn dịch quy ước Tính đến thời điểm dừng thí nghiệm, AUC1-180 của hỗn dịch nano cao gấp 1,8 lần

so với dung dịch và gấp 2,5 lần so với hỗn dịch quy ước AUC dự đoán (A 0-∞) của hỗn dịch nano cao gấp 2,1 lần dung

dịch và gấp 2,9 lần so với hỗn dịch quy ước Thời gian lưu thuốc của hỗn dịch nano cao gấp 2,5 lần và 1,5 lần so với dung dịch và hỗn dịch quy ước Như vậy, do tiểu phân được bao ngoài bằng polyme, hỗn dịch nano bám dính tốt hơn trên niêm mạc, thời gian

lưu thuốc trước giác mạc ko dài hơn nên tỷ lệ dược chất hấp thu qua giác mạc cao hơn hẳn so với hỗn dịch quy ước bào chế từ nguyên liệu ban đầu

3 So sánh sinh khả dụng hỗn dịch nano polyme và hỗn dịch nano tinh thể

Đồ thị so sánh mức độ thấm piroxicam qua giác mạc mắt thỏ

từ hỗn dịch nano polyme và hỗn dịch nano tinh thể

(HT: hỗn dịch nano tinh thể, HN: hỗn dịch nano polymer)

Hỗn dịch nano tinh thể đạt đỉnh nhanh tuy nhiên về mặt nồng độ đỉnh và thời gian tác dụng thì kém hơn hẳn so với nano polyme

Tài liệu trích dẫn:

1 Nguyễn Thị Mai Anh (2014), “Nghiên cứu bào chế và đánh giá sinh khả dụng hỗn dịch nano piroxicam dùng cho nhãn khoa”, luận án tiến sỹ dược học trường Đại

học Dược Hà Nội

2 Bộ Môn Bào Chế, (2009), Sinh dược học bào chế, Nhà xuất bản Y học.