Sản xuất streptokinase từ vi khuẩn streptococus

Sản xuất Streptokinase tái tổ hợp từ S.lividans Phạm Đăng Hoàng Mười 20113129... Khái quát chung Cơ chế hoạt động của SK Nhân dòng gen skc mã hóa SK Biểu hiện SK tái tổ hợp Tinh sạch SK

Sản xuất Streptokinase tái tổ

hợp từ S.lividans

Phạm Đăng Hoàng Mười 20113129

Khái quát chung

Cơ chế hoạt động của SK

Nhân dòng gen skc mã hóa SK

Biểu hiện SK tái tổ hợp

Tinh sạch SK

Nội dung chính

1 Khái quát chung

Tắc nghẽn mạch Ứ đọng máu với cục máu đông ~> nhồi máu cơ tim

cấp tính + đột quỵ do thiếu máu cục bộ ~> tử vong

Can thiệp phẫu thuật

để lấy hoặc thông tắc nghẽn,

hoặc tạo ra mạch phụ

để cấp máu mới

Uống thuốc thông tắc để phân hủy cục máu

đông như streptokinase, tPA,

urokinase, staphylokinase, nattokinase

Pr ngoại bào do các chủng beta Streptococus

sinh tổng hợp ra

SK là chuỗi đơn, M=47kDa, 414aa, pI=4.7

E hoạt động tối thích pH=7.3-7.6

etc

Không có hoạt tính thủy phân Pr

Cơ chế hoạt hóa của SK

Cơ chế

hoạt động

của SK

SK + HPN <-> SK.HPN -> SK.HPG’ -> SK*.HPG

SK + HPG -> SK*.HPG [SK*: dạng cải biến ly giải của SK]

là tính chất hấp dẫn đặc biệt của thể hoạt hóa plasminogen-không có tính hoạt tính thủy phân Pr

~>hoạt hóa HPG->PN gián tiếp qua việc tạo ra

1 phức hợp ái lực cao với PG (SK-HPG) thep tỷ lệ phân tử tương đương

Nhân dòng gen skc từ S.equisimilis

1

Sử dụng E.coli TG1

để nhân dòng

2

Sàng lọc phage trên đĩa thạch tráng lớp casein/plasminogen

3

Phân lập và phân tích dòng tái tổ hợp chứa skc

Tinh sạch SK tái tổ hợp

từ S lividans