1 B ộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG Ket-noi.com forum giao duc LÊ NGỌC VỊNH NGHIÊN CỨU PHĨI TẠO CƠNG THỨC PHA CHÉ THC TIÊM ĐƠNG KHÔ CARBOPLATIN 50MG/LỌ DÙNG ĐIỀU TRỊ ƯNG THƯ Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 60.44.27 TĨM TẮT LUẬN VĂN THẠC s ĩ KHOA HỌC Đà Nằng - 2011 Công trình hồn thành ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG Ket-noi.com forum giao duc Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Đào Hùng Cường Phản biện 1: PGS.TS.Phạm Văn Hai Phản biện 2: PGS.TS.Trần V ăn Thắng Luận văn bảo vệ trước Hội đồng bảo vệ chấm Luận văn tốt nghiệp Thạc sĩ khoa học họp Đại học Đà Nang vào ngày 27 tháng 08 năm 2011 Có thể tìm hiểu Luận văn tại: - Trung tâm Thơng tin - Học liệu - Đại học Đà Nằng - Thư viện trường Đại học Sư phạm - Đại học Đà Nằng M Ỏ ĐẦU LÝ DO CHỌN ĐÈ TÀI Đơng khơ (lyophilization) hay cịn gọi làm khơ thăng hoa, phương pháp làm khô áp dụng nhiều lĩnh vực thực phẩm dược phẩm Trong bào chế thuốc, công nghệ đông khô phổ biến số nước, đặc biệt đối vói sản phẩm bền vói nhiệt, sản phẩm bền dung dịch bảo quản thòi gian dài Ở Việt Nam lĩnh vực dược phẩm có vài cơng ty công ty Dược Phú Yên, công ty Dược Vĩnh Phúc bắt đầu triển khai công nghệ đông khô sản xuất nên không đủ đáp úng nhu cầu sử dụng chế phẩm đông khô ngày tăng Các chế phẩm paraplatin, carboplatin teva dạng thuốc tiêm đơng khơ nhập từ nước ngồi Việc triển khai áp dụng công nghệ đông khô vào nghiên cún sản xuất thuốc nhằm đáp ứng cho nhu cầu điều trị nước, thay dần thuốc nhập ngoại Do tơi chọn đề tài: “Nghiên cứu phối tạo công thức pha chế thuốc tiêm đông khô Carboplatin 50 mg/lọ dùng điều trị ung thư” MỤC ĐÍCH NGHIÊN c ứ u Xác định hàm lượng thích họp tá dược để phối tạo vói hoạt chất nhằm tạo thuốc tiêm đông khô Carboplatin đạt tiêu chuẩn sở dùng để chữa bệnh ung thư ĐỐI TƯỢNG VÀ PHẠM VI NGHIÊN c ứ u 3.1 Đối tượng nghiên cứu: Thuốc tiêm đông khô carboplatin, thực Công ty Dược trang thiết bị Y tế Bình Định 3.2 Phạm vi nghiên cửu: Nghiên cứu phối tạo công thức pha chế thuốc tiêm đông khô Carboplatin 50mg/lọ dùng điều trị ung thư PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 4.1 Tham khảo tài liệu có liên quan 4.2 Chọn thành phần tá dược dựa thực nghiệm Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỤC TIỄN CỦA ĐÈ TÀI Tạo công thức thuốc tiêm đông khô Carboplatin dùng điều trị bệnh ung thư CẤU TRÚC CỦA LUẬN VĂN Ngoài phần mở đầu, kết luận tài liệu tham khảo, luận văn gồm có chương sau : Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU Chương NHŨNG NGHIÊN c ú u THựC NGHIỆM Chương KÉT QUẢ Chưong TỎNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỎNG QUAN VÈ KỸ THUẬT ĐÔNG KHÔ 1.1.1 Khái niệm, ưu điểm hạn chế 1.1.2 Q trình đơng khơ 1.2 TỎNG QUAN VÈ THUỐC TIÊM ĐÔNG KHÔ 1.2.1ễ Khái niệm 1.2.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến chất lượng công thức * Tỉ lệ nước dung môi: Nước môi trưcmg thuỷ phân nhiều dược chất có liên kết hoá học dễ bị thuỷ phân este, lacton, lactam, ề Một biện pháp hạn chế thuỷ phân dược chất giảm tỷ lệ nước hỗn họp dung môi việc sử dụng dung môi khan đồng tan vói nước propylen glycol, ethanol, glycerin, để thay phần toàn lượng nước dung dịch Ngồi cịn dùng hỗn họp tert-butanol nước (20:80) cần tăng hoà tan trở lại bột đơng khơ tạo bề mặt tiếp xúc lón sau q trình đơng khơ * Độ p H dung dịch đông khô: pH dung dịch hịa tan sau đơng khơ pH dung dịch đông khô thường tương tự Khoảng giá trị pH lựa chọn vói mục đích làm cho sản phẩm có độ bền cao Neu pH mà thuốc ổn định dược chất tan dùng hỗn họp dung mơi hay chất trung gian tạo phức dễ tan hay chất điện hoạt để làm tăng độ tan dược chất Trong q trình bảo quản, pH thuốc tiêm thay đổi chất có thành phần bao bì thủy tinh hồ tan dần vào dung dịch tạo biến đổi dược chất Do vậy, để trì pH dung dịch thuốc tiêm ổn định giá trị thích họp cần dùng hệ đệm * Điều kiện pha chế: (a) Nhiệt độ dung dịch cao hoạt chất dễ tan nhiên làm giảm độ ổn định hoạt chất, (b) Thòi gian pha chế dung dịch thuốc ngắn tốt, nhiên có nhiều yếu tố khách quan ảnh hưởng đến thịi gian pha chế như: cỡ lơ sản xuất, tốc độ lọc dung dịch, tốc độ đóng chai ệ * Bao bì: Bao bì chứa sản phẩm có ảnh hưởng lớn đến độ ổn định sản phẩm q trình pha chế suốt thịi gian bảo quản sản phẩm Thường sử dụng lọ thủy tinh tích 2ml, 3ml, 5ml đến lOml Đáy lọ phang giúp cho trình dẫn nhiệt tốt hon gia nhiệt Lọ thủy tinh màu có tác dụng ngăn cản xạ tử ngoại, giúp bảo vệ thuốc tiêm có dược chất nhạy cảm vói ánh sáng Song thành phần thủy tinh màu lại có sắt oxyd hay mangan oxyd, vết ion kim loại nặng hịa tan từ bề mặt bao bì vào thuốc xúc tác q trình oxy hóa dược chất nhanh hon Lọ thủy tinh có ưu điểm không chứa vết ion kim loại nặng lại khơng ngăn cản xạ tị ngoại Nút đậy làm cao su có xẻ rãnh cho hoi nước ngồi q trình đơng khơ Cao su sử dụng làm nút đậy làm giảm thiểu tương tác thuốc đồ đựng, chống xâm nhập hoi nước từ mơi trường ngồi 1.3 CARBOPLATIN 1.3.1ế Cấu trúc hóa học 1.3.2 Tính chất lý hóa 1.3.3 Chỉ định 1.3.4 Chống định 1.4 CÁC TÁ DƯỢC 1.4.1 Ảnh hưởng tá dược đến chất lượng sản phẩm Các sản phẩm thu từ q trình đơng khơ phải đảm bảo: Độ ẩm thấp, thịi gian ổn định dài; khối sản phẩm thu nguyên vẹn; dễ dàng hịa tan trở lại hịa tan vói dung mơi; tính chất hoạt chất khơng thay đổi sau hịa tan trở lại Khối sản phẩm đơng khơ thường có độ xốp thích họp giúp hoạt chất dễ dàng hịa tan trở lại có diện tích bề mặt lớn Tuy nhiên khối xốp phải có đủ độ bền học để trì hình dạng suốt q trình đơng khơ suốt thịi gian bảo quản sản phẩm Mặt khác độ xốp khối sản phẩm thấp làm cản trở thăng hoa nước q trình đơng khơ kéo dài sản phẩm không khô Các yếu tố ảnh hưởng đến chất lượng khung xốp: Là kết tổng họp ảnh hưởng yếu tố thành phần, tá dược độn tạo khung; tá dược chống oxi hóa; tá dược ổn định pH Việc lựa chọn tá dược đưa vào thành phần dung dịch đem đơng khơ phải ý tói khả hút ẩm, trạng thái vật lí tá dược q trình đơng khơ chúng ảnh hưởng tói thuỷ phân dược chất Hàm lượng nước cịn chế phẩm đơng khơ khơng định bỏi thơng số kỹ thuật q trình đơng khơ mà cịn phụ thuộc lớn vào tá dược sử dụng Diện tích bề mặt chiều dày dung dịch đem đông khô: Dung dịch đem đơng khơ chứa dụng cụ phải có diện tích bề mặt chiều dày thích họp để thuận lọi cho q trình thăng hoa nước Ngồi độ dày cấu tạo đáy dụng cụ chứa ảnh hưởng đến trình truyền nhiệt cho sản phẩm suốt q trình đơng khơ nên ảnh hưởng đến chất lượng khung 1.4.2 Các loại tá dược i ể4ể2ểi ề Tá dược độn tạo khung 1.4.2.2 Tá dược chong oxi hóa 1.4.2.3 Tá dược ổn định p H 1.5 CÁC CHẤT TẠO DUNG MÔI 1.5.1 Ethanol 1.5.2 Đặc tính Tert-butanol 1.6 C SỞ LÝ THUYẾT PHÂN TÍCH PHƯƠNG SAI (ANOVA) 1.6.1 So sánh số giá trị trung bình 1.6.2 Bài tốn phân tích phương sai yếu tố (one-way ANOVA) Chưong NHỮNG NGHIÊN c ứ u THựC NGHIỆM 2.1 THỤC NGHIỆM KHẢO SÁT CÁC THƠNG SỐ CHO QUI TRÌNH ĐƠNG KHƠ c BẢN 2.1.1 Thực nghiệm khảo sát nhiệt độ đông lạnh Khi nhiệt xuống đến nhiệt eutecti, điện trở tăng đột biến đến oo Hạ nhiệt độ dung dịch từ từ ghi lại giá trị điện trở theo giá trị nhiệt độ khoảng thòi gian ngắn Nhiệt đông lạnh chọn phải thấp hon nhiệt eutecti khoảng từ 5°c đến 10°c 2.1.2 Thực nghiệm khảo sát thòi gian đơng lạnh Thịi gian đơng lạnh khoảng thịi gian để tồn dung dịch đơng kết hồn tồn ứng vói đường biểu diễn 00 q trình khảo sát nhiệt độ eutecti hạ nhiệt độ dung dịch 2.1.3 Thực nghiệm khảo sát thịi gian đơng khơ Nước đá tạo thành từ giai đoạn đông lạnh thăng hoa trực tiếp điều kiện áp suất buồng đông khô thấp hon áp suất hoi nước đá nhiệt độ giá đỡ khoảng từ -30°c đến +10°c Khi tiến hành đơng khơ, lóp nước đá giảm, vạch phân cách xuống đến điểm thấp lọ thòi điểm kết thúc trình đơng khơ sơ cấp Tính thịi gian mặt phân cách hạ xuống đến điểm thấp lọ, ta xác định thịi gian đơng khơ 2.1.4 Thực nghiệm khảo sát áp suất thịi kỳ đơng khơ Vói áp suất thấp, thịi gian đơng khơ sản phẩm rút ngắn Càng tiến thòi kỳ sấy khơ áp suất buồng phải thấp 2.1.5 Thực nghiệm khảo sát nhiệt độ thòi gian sấy khô Theo phần 1.1.2 cố định nhiệt sấy khô 30°c, thịi gian sấy khơ sản phẩm thay đổi khoảng 10, 15, 20 Ta chọn nhiệt độ sấy khơ 30°c thịi gian sấy khơ 20 2.2 PHƯƠNG PHÁP PHỐI TẠO CƠNG THỨC THC TIÊM ĐƠNG KHƠ CARBOPLATIN 2.2.1 Các thí nghiệm nghiên cứu để phối tạo công thức (1) Chọn tá dược độn tạo khung; (2) Chọn dung môi pha chế; (3) Chọn tá dược chống oxy hóa hiệu cho sản phẩm; (4) Chọn hệ đệm thích họp cho sản phẩm; (5) Nghiên cứu chọn điều kiện pha chế phù họp; (6) Chọn lựa bao bì đóng gói phù họp cho sản phẩm 2.2.2 Các tiêu chí đánh giá sản phẩm * Cảm quan: Quan sát cảm quan hình thức khối bột phải đạt tiêu chuẩn: Bột sau đông khô màu trắng, khơng đóng lọ thủy tinh, khơng teo vón không nứt bể khối Từ thực nghiệm, sản phẩm thu từ q trình đơng khơ mơ tả: (1) Khối sản phẩm màu trắng, xốp, nguyên vẹn, hòa tan lại dễ dàng cho dung dịch trong; (2) Khối sản phẩm bị teo, giảm thể tích khối; (3) Sản phẩm không khô, sau lấy khỏi máy phần khối sản phẩm tan chảy trở lại; (4) Sản phẩm khơng hình thành khối, chất tan tạo lóp nhầy đáy chai * Độ ẩm: Đe xác định độ ẩm ta tiến hành sau: (1) Cân lượng bột thuốc vào chén cân (ni]! gồm bột thuốc chén, m: khối lượng chén); (2) sấy nhiệt độ 105°c giờ; (3) Lấy chế phẩm làm nguội bình hút ẩm Cân khối lượng thuốc lại m2 (bột thuốc lại chén cân); (4) Hàm ẩm xác định: (m, -m ,) a% = -—!— —^-xioo , m, —m Độ khối lượng sấy khô không lớn hon 2,0% Hàm lượng: đạt 90-110 % so vói hàm lượng nhãn Đe xác định hàm lượng Carboplatin sản phẩm ta dùng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 2.2.3 Các thực nghiệm nghiên cứu phối tạo công thửc thuốc tiêm đông khô Carboplatin 50mg Thực nghiệm 1: Nghiên cứu chọn tá dược độn tạo khung Bảng 2.1 Mơ hình thí nghiệm nghiên cứu tá dược độn tạo khung Thành phân Công thức 1A 1B 1C 1D 1E 1F 1G Carboplatin (mg) 50 50 50 50 50 50 50 Manitol (mg) 50 75 100 C 12H 22O 11 H 2O (mg) 0 50 75 100 Nước cât (ml) 5 5 5 Thực nghiệm 2: Nghiên cứu chọn hệ dung mơi 10 Bảng 2.2 Mơ hình thí nghiệm nghiên cứu chọn hệ dung môi Thành phần Công thức 2A 2B Carboplatin (mg) 50 50 Manitol (mg) 50 50 Ethanol- nước tỉ lệ 1:4 thể tích (ml) Tert-butanol- nước tỉ lệ 1:4 thể tích (mĩ) Thực nghiệm 3: Nghiên cứu chọn tá dược chống oxi hóa Bảng 2.3 Mơ hình thí nghiệm nghiên cứu tá dược chống oxi hóa Thành phần Cơng thức 3A 3B 3C Carboplatin (mg) 50 50 50 Manitol (mg) 50 50 50 EDTA (mg) 2,5 2,5 Sục khí N qui trình Sục khí N2 Sục khí N2 Nước cat (ml) 5 Thực nghiệm 4: Nghiên cứu chọn tá dược điều chỉnh pH Bảng 2.4 Mơ hình thí nghiệm nghiên cún tá dược điều chỉnh pH Công thức 50 50 Manitol (mg) 50 50 50 EDTA (mg) 2,5 2,5 2,5 Na2H P0412H20 (mg) 17,9 18,5 21 Nước cất (mi) pH = 5,5 5 II đủ X vừa II H 3PO o\ 50 ►73 Carboplatin (mg) 4C o\ 4B X 4A Uì Thành phần Thực nghiệm 5: Nghiên cứu chọn điều kiện pha chế phù họp 15 hai cơng thức có ý nghĩa Mặt khác cơng thức 1B có RSD% = 1,4314 < 2% cịn cơng thức 1D có RSD% =5,1833 > 2% Kết luận: Chọn cơng thức 1B vói tá dược độn 50 mg Manitol 3.2.2 Chọn dung môi pha chế: Thành phần công thức ta xem bảng 2.2; tiêu chuẩn đánh giá theo 2.2.2 * Kết cảm quan Bảng 3.7 Ket cảm quan sản phẩm công thức 1B, 2A 2B Sô lo thu Cảm quan Công thức đươc (2) (3) (1) 1B 36 35 2A 18 10 35 2B 36 20 8 Các tiêu chuẩn (1), (2), (3), (4) mô tả 2.2.2 Dựa vào bảng ta thấy: Dung mơi nước sản phẩm có hình thức đạt tiêu chuẩn cảm quan cao (cơng thức 1B có 36 lọ đạt tiêu chuẩn (1)) * Kết độ ẩm sản phẩm: Ta tiến hành đo độ ẩm lọ công thức theo cách đo độ ẩm 2.2.2 Bảng 3.8 Ket độ ẩm sản phẩm công thức 1B, 2A, 2B Tiêu chuẩn Công thức Kết 1B 2A 2B 1,02 1,03 1,05 1,01 1,02 1,04 1,03 1,04 1,03 F = 1,0072 1,05 1,03 1,02 Fa = 3,6823 1,02 1,05 1,04 1,04 1,04 1,05 Trung bình 1,0283 1,0350 1,0383 SD 0,0147 0,0105 0,0117 RSD % 1,4314 1,0133 1,1259 Đô âm (%) 16 - Độ ẩm trung bình < 2% - Tương tự cách phân tích độ ẩm phần 3.2.1 ta rút độ ẩm đạt đồng công thức 1B 2A 2B - Ket phân tích ANOVA cho thấy khơng có khác biệt độ ẩm công thức 1B, 2A 2B vói mức ý nghĩa a = 0,05 (F < Fa) Vậy dung môi khảo không ảnh hưởng đến độ ẩm sản phẩm * Kết hàm lượng: Mỗi công thức IB, 2A 2B chọn lọ vị trí khác khơ đem tiến hành xác định hàm lượng Carboplatin theo cách xác định 2ế2ế2 Bảng 3.9 Ket hàm lượng công thức 1B, 2A 2B Tiêu chuẩn Công thức Kết 1B 2A 2B 92,21 93,01 92,32 92,35 92,68 92,65 Hàm lượng 92,32 92,36 92,96 F = 2,3093 (%) 92,33 92,95 93,05 Fa = 92,87 92,73 93,06 3,6823 93,01 92,85 93,45 Trung bình 92,515 92,763 92,915 SD 0,3357 0,2341 0,3878 RSD % 0,3629 0,2523 0,4173 Cũng phân tích kết độ ẩm 3.2.1 Từ giá trị RSD < 2% cho ta biết hàm lượng đạt đồng ba cơng thức Ket phân tích ANOVA cho thấy khơng có khác biệt hàm lượng cơng thức vói mức ý nghĩa a = 0,05 (F < Fa ) Vậy dung môi khảo sát không ảnh hưởng đến hàm lượng Carboplatin ba công thức 1B, 2A 2B 17 Cả công thức đạt tiêu chuẩn độ ẩm, hàm lượng Nhung công thức 1B (dung môi nước) đạt tiêu chuẩn cảm quan cao Kết luận: Nước dung môi phù họp nhất, chọn công thức 1B 3.2.3 Chọn tá dược chống oxi hóa: Thành phần cơng thức ta xem bảng 2.3; tiêu chuẩn đánh giá theo 2.2.2 * Kết cảm quan Bảng 3.10 Ket cảm quan sản phẩm công thức 1B, 3A, 3B , 3C Công thức Số lọ thu Cảm quan (1) (2) (3) 1B 36 35 3A 37 35 1 3B 37 36 3C 36 36 0 Các tiêu chuẩn (1), (2), (3), (4) mô tả 2.2.2 Theo bảng ta thấy: Lượng EDTA thêm vào dung dịch, sục khí nitơ hay nước cất pha chế không ảnh hưởng đến chất lượng khung sản phẩm tạo thành (số lọ đạt tiêu chuẩn (1) công thức nhau) * Kết độ ẩm sản phẩm: Mỗi công thức 3A, 3B 3C lấy lọ noi khác đo độ ẩm theo cách đo độ ẩm 2ế2.2 Bảng 3.11 Kết độ ẩm công thức 1B, Tiêu Công thức chuân 1B 3A 3B 1,02 1,04 1.05 1,01 1.03 1.06 Đô ẩm 1.04 1.03 1.03 1,02 1,05 1,01 (%) 1,02 1,02 1,03 1.04 1,01 1.05 Trung bình 1,028 1,042 1,023 SD 0,01 0,01 0,01 RSD % 1,431 1,183 1,413 3A, 3B 3C 3C 1.05 1.06 1,04 1,06 1,03 1,02 1,043 0,02 1,565 Kết F = 2,7559 Fa = 3,0984 18 Cũng phân tích độ ẩm 3.2.1, giá trị RSD < 2% cho thấy hàm lượng đạt đồng bốn công thức Ket ANOVA cho thấy khơng có khác biệt độ ẩm cơng thức vói mức ý nghĩa a = 0,05 (F < Fa ) Vậy lượng EDTA thêm vào sục khí N2 vào nước khơng ảnh hưởng đến độ ẩm sản phẩm * Ket hàm lượng: Mỗi công thức chọn lọ vị trí khác đem tiến hành xác định hàm lượng Carboplatin theo 2.2.2 Bảng 3.12 Kết hàm lượng công thức 1B, 3A, 3B 3C Tiêu chuẩn Công thức 1B 3A 3B 3C 92,21 94,01 95,67 95,92 92,35 94,05 95,43 96,24 Hàm lượng 92,32 94,53 95,88 96,42 (%) 92,33 94,68 95,65 95,97 92,87 94,54 95,72 96,37 93,01 94,65 95,29 96,51 Trung bình 92,515 94,41 95,6067 96,2383 SD 0,3357 0,3005 0,2121 0,2439 RSD % 0,3629 0,3183 0,2218 0,2534 Cũng phân tích kết độ ẩm 3.2.1, íừ giá trị RSD < 2% cho biết hàm lượng đạt đồng công thức Bảng 3.13 Ket xử lý số liệu hàm lượng công thức 3A 1B, 3B 1B, 3A 3B, 3C, 3B Công 3A 1B 3B 1B thức Kêt F = 106,1439 F= 363,6755 Fa = 4,9646 Fa = 4,9646 3A 3C 3C 3B F= 133,9115 Fa = 4,9646 F= 22,9129 Fa =4,9646 19 Dựa vào kết bảng 3.13 ta so sánh chọn công thức đạt tiêu chuẩn cao Các công thức 3A IB; 3B 1A; 3A 1C; 3C 3B có khác biệt hàm lượng công thức với mức ý nghĩa a = 0,05 (F < Fa) Như cơng thức có hàm lượng Carboplatin cao ta chọn Theo kết bảng 3.12 ta chọn công thức 3C (96 ,2383%) Kết luận: Nồng độ EDTA sử dụng 0,05% (g/ml) tiến hành sục khí Nitơ cho dung dịch trước hòa tan Carboplatin đến nồng độ oxy dung dịch < % cho hiệu chống oxi hóa cao Ta chọn cơng thức 3C cho thí nghiệm 3.2.4 Chọn tá dược điều chỉnh pH: Thành phần công thức ta xem bảng 2.4; tiêu chuẩn đánh giá theo 2.2.2 * Kết cảm quan Bảng 3.14 Ket cảm quan công thức 3C, 4A, 4B 4C Công thức Số lọ thu Cảm quan (1) (2) (3) 3C 36 36 0 4A 37 36 4B 36 35 4C 36 35 Các tiêu chuẩn (1), (2), (3), (4) mô tả 2.2.2 Dựa vào bảng ta có nhận xét sau: Cơng thức 3C, 4A, 4B 4C đểu có số lọ đạt tiêu chuẩn (1) cao Vậy lượng chất đệm sử dụng dung dịch không ảnh hưởng đến tiêu chuẩn cảm quan khối sản phẩm * Ket độ ẩm: Mỗi công thức chọn lọ vị trí khác đem tiến hành xác định hàm lượng Carboplatin theo 2.2.2 20 Bảng 3.15 Ket độ ẩm công thức 4A, 4B 4C Công thức Tiêu chuẩn Kết 4a 4B 4C 1.09 1.05 1.06 1.08 1.06 1.09 1.07 1.08 1.08 F = 1,7687 1.06 1.09 1.09 Fa = 3,6823 1.07 1.06 1.09 1.06 1.07 1.08 Trung bình 1.071667 1.068333 1.081667 SD 0.01169 0.01472 0.01169 RSD % 1.090866 1.37781 1.080781 Độ âm (%) Giống phân tích kết độ ẩm 3.2.1, từ giá trị RSD < 2% cho thấy hàm lượng đạt đồng ba công thức Ket phân tích ANOVA thấy khơng có khác biệt độ ẩm cơng thức vói mức ý nghĩa a = 0,05 (F < Fa ) Vậy lượng chất đệm đưa vào dung dịch không ảnh hưởng đến độ ẩm khối sản phẩm * Kết hàm lượng: Mỗi cơng thức chọn lọ vị trí khác đem tiến hành xác định hàm lượng Carboplatin theo cách xác định 2.2.2 Ket hàm lượng cơng thức 4A, 4B, 4C so sánh vói kết hàm lượng công thức 3C 21 Bảng 3.16 Kết hàm lượng công thức 4A, 4B, 4C 3C Công thức Tiêu chuẩn 4A 4B 4C 3C 99,36 97,98 97,13 95,92 98,86 98,01 96,89 96,24 Hàm lượng 99,57 98,04 97,06 96,42 (%) 99,62 97,65 96,92 95,97 99,48 97,86 97,21 96,37 98,91 97,59 97,05 99,3 97,855 97,0433 96,51 96,2383 SD 0,3338 0,1930 0,122 0,2439 RSD % 0,3361 0,1972 0,1256 0,2534 Trung bình Giống phân tích kết hàm lượng 3.2.2, RSD < 2% cho ta biết hàm lượng đạt đồng bốn công thức Bảng 3.17 Ket xử lý số liệu hàm lượng công thức 3C 4C; 4B 4C; 4A 4B Công thức Kết 3C 4C 4B 4C 4A 4B F= 52,2858 F= 75,8747 F= 84,2909 Fa= 4,9646 Fa = 4,9646 Fa = 4,9646 Dựa vào kết bảng 3.17 ta so sánh chọn công thức đạt tiêu chuẩn cao Các công thức 3C 4C; 4B 4C; 4A 4B có khác biệt hàm lượng cơng thức vói mức ý nghĩa a = 0,05 (F < Fa) Như công thức có hàm lượng Carboplatin cao ta chọn Theo kết bảng 3.16 ta chọn công thức 4C (99 ,3 %) Ket luận: Thành phần hệ đệm cho sản phẩm Carboplatin 50mg 5ml dung dịch: Na2H P04.12H20 17,9 mg; Acid phosphoric vừa đủ pH = 5,5 Thí nghiệm tiếp ta chọn cơng thức 4A 22 3.2.5 Chọn điều kiện pha chế làm tăng độ ổn định * Điều kiện đem pha chế: Các thí nghiệm 3.2.4, thịi gian từ hịa tan Carboplatin đến chạy máy đông khô Trong phần này, thòi gan để xác định thòi gian ổn định Carboplatin dung dịch Thành phần tá dược nghiên cứu điều kiện pha chế xem bảng 2.5 Tiêu chuẩn đánh giá theo 2.2.2 * Ket hàm lượng: Mỗi công thức chọn lọ vị trí khác đem tiến hành xác định hàm lượng Carboplatin theo 2.2.2 Bảng 3.18 Ket hàm lượng công thức 4A, 5A, 5B Công thức Tiêu chuẩn 5A 5B 4A 99,71 98,12 99,36 99,37 98,08 98,86 Hàm lượng 98,92 97,94 99,57 (%) 99,34 97,86 99,62 99,61 98,21 99,48 99,48 97,92 98,91 Trung bình 99,4050 98,0217 99,3 SD 0,2762 0,1354 0,3338 RSD % 0,2778 0,1381 0,3361 Giống phân tích kết hàm lượng 3.2.2 cho ta biết hàm lượng đạt đồng ba công thức 23 Bảng 3.19 Ket xử lý số liệu hàm lượng công thức 5A 5B; 4A 5A Công thức Kết 5A 5B F= 121,3621; Fa = 4,9646 4A 5A F= 0,3525; Fa = 4,9646 Dựa vào kết bảng 3.19 ta so sánh chọn công thức đạt tiêu chuẩn cao Công thức 5A 5B: Ket cho thấy có khác biệt hàm lượng cơng thức vói mức ý nghĩa a = 0,05 (F > Fa) Theo kết bảng 3.30 hàm lượng Carboplatin công thức 5A (99,405%, thòi gian pha chế giờ) cao hon cơng thức 5B (98,0217%, thịi gian pha chế giờ); Công thức 5A 4A: Kết cho thấy khơng có khác biệt hàm lượng cơng thức vói mức ý nghĩa a = 0,05 (F < Fa) Điều cho thấy độ ổn định sản thòi gian pha chế khác khơng có ý nghĩa Tuy nhiên theo kết bảng 3.18 hàm lượng Carboplatin công thức 5A (99,405%) cao hon công thức 4A (99,3%)- Kết luận: Sản phẩm pha chế thòi gian ổn định pha chế 3.2.6 Bao bì cho sản phẩm * Bao bì điều kiện bảo quản: Thành phần tá dược nghiên cứu chọn bao bì cho sản phẩm Carboplatin 50mg/lọ cơng thức xem bảng 2.6, tiêu chuẩn đánh giá theo 2.2.2 * Ket hàm lượng: Tiến hành định lượng sản phẩm công thức 6A, 5A theo cách xác định 2.2.2 sau đông khô mẫu sau tuần bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc Cơng thức 6A, 5A sau tuần bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc kí hiệu 5A-CT, 6A-CT 24 Bảng 3.20 Kết hàm lượng công thức 5A, 6A 5A-CT, 6A-CT Sau tuần bảo quản Sau đông khô Nhiệt độ: 40 ± 2°c Tiêu chuẩn 5A 6A 5A-CT 6A-CT 99,71 99,34 99,31 98,46 99,37 99,25 99,05 99,03 Hàm lượng 98,92 99,47 99,16 98,37 (%) 99,34 98,82 98,76 98,61 99,61 98,91 98,91 99,10 99,48 99,08 99,15 98,28 Trung bình 99,4050 99,1450 99,0567 98,6417 SD 0,2762 0,2529 0,1965 0,3463 RSD % 0,2778 0,2551 0,1984 0,3510 Giống phân tích kết hàm lượng 3.2.2 cho ta biết hàm lượng đạt đồng bốn công thức Bảng 3.21 Ket xử lý số liệu hàm lượng công thức 5A 6A; 5A-CT 6A-CT Công thức Kết 5A 6A F = 2,8926; Fa = 4,9646 6A-CT 5A-CT F = 6,5186; Fa = 4,9646 Dựa vào kết bảng 3.21 ta so sánh chọn công thức đạt tiêu chuẩn cao 25 - Công thức 5A 6A: Ket cho thấy khơng có khác biệt hàm lượng cơng thức vói mức ý nghĩa a = 0,05 (F = < Fa) nên khác biệt hàm lượng hai loại chai - Công thức 6A-CT 5A-CT: Kết cho thấy có khác biệt hàm lượng cơng thức vói mức ý nghĩa a = 0,05 (F = < Fa) Điều cho thấy có khác biệt hảm lượng hai công thức, sau tuần bảo quản điều kiện nhiệt độ 40°c Theo kết bảng 3.34 hàm lượng Carboplatin công thức 5A-CT (99,0567%) cao hon công thức 6A-CT (98,6417%) Ta chọn công thức 5A-CT Kết luận: Dùng chai nâu 20 mi có đường kính đáy khoảng 2,8 cm để chứa sản phẩm đông khô Carboplatin 50 mg 26 KÉT LUẬN VÀ KIÉN NGHỊ l ễ Kết luận Thành phần công thức thuốc tiêm đông khô Carboplatin 50mg/lọ dùng điều trị bệnh ung thư sau: Tá dược độn tạo khung 50 mg Manitol; Dung mơi thích họp nước dùng để pha chế dung dịch Carboplatin 50 mg/5ml; Tá dược chống oxi hóa dùng EDTA với nồng độ sử dụng dung dịch đem đông khô 0,05% (g/ml) tiến hành sục khí Nitơ dung dịch trước hòa tan Carboplatin đến nồng độ oxy dung dịch