Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ tới thành phần hóa học và tác dụng dược lý của vị thuốc hoàng liên

Câc phuong phâp sao khâc nhau thi nhiêt dô tâc dông khâc nhau làm cho thành phân hôa hoc sê bién doi khâc nhau dân toi tâc dung sinh hoc khâc nhau.. Vi vây, chüng tôi nghiên cüu dê tài n

BÔ Y TÉ TRlTÔNG DAI HOC DÜ0C HÀ NÔI

m

N G U Y Ê N A N H LY

NGHIÊN CtJU ÂNH HUÔNG CÜA NHIÊT DÔ TÔI

LŸ CÜA VITHUOC HOÀNG LIÊN

(KHÔA LUÂN TÔT NGHIÊP DLiüc SÏKHOÂ 1990 - 2003)

Nguèi huomg dân: TS PHÙNG HÔA BÏNH

DS NGUYÊN THE MINH

Nai thirc hiên: Bô mon Diïçfc hoc co truyên

Phong Vi sinh - Bô mon Công

nghiêp duac Phong nghiên cuu trung tâm Phong Duac lÿ Viên Duoc lieu Thôi gian thuc hiên: 3/2003 - 5/2003

LÙl CfiM ON!

Trong quâ trinh thuc hiên dê tài này, em dâ nhân duoc su nhiêt tînh giüp do cüa câc thây cô giâo

Dâc b iê t, nhô cô su hctng dân tân tînh, chu dâo cüa thây:

TS Phùng Hôa Binh , em dâ hoàn thành dê tài này Em xin bày

tô long kmh trong và biêt on sâu sàc tcti thây

Em xin chân thành câm on câc thây cô giâo trong bô mon Duoc co truyên, DS Nguyén Thé Minh, thây: TS Cao Van Thu bô môn Công nghiêp Duoc - phong Vi sinh, thây: TS Dô Ngoc Thanh, TS Nguyên Dâng Hoà phông nghiên curu Trung tâm dâ tao diêu kiên giüp dô em hoàn thành dê tài này

Hà Nôi, thâng 5 nam 2003

Sinh viên

Nguyên Anh Ly

MUC LUC

1.1- Dâc diêm thuc vât 21.2- Thành phân hoâ hoc 3

1.6.1 - Mue dîch che bien thuoc co truyên 9

1.6.2 - Câc phifcfng phâp che bien thuoc co truyên 9

1.6.3 - Câc phuong phâp che bien Hoàng liên 11

PHAN 2: THUC NGHIÊM VÀ KÊT QUÂ 122.1 - Nguyên lieu, phuong tien và phuong phâp nghiên cihi 12

2.1.2 - Thiet bi, hoâ chat, sue vât thî nghiêm 12

2.2 - Két quâ thuc nghiêm và nhân xét 16

2.2.1 - Théo doi ânh huông cüa nhiêt dô dén si/ doi màu cüa

2.2.2 - Nghiên cüu su bien doi alcaloid ô câc MNC 16

2.2.3 - Nghiên cûu mot so tâc dung sinh hoc 31

2.3.1 - Phicong phâp dinh hcçfng alcaloid trong Hoàng lien 36

2.3.2 - Ânh huông nhiêt dô tâi thành phàn hoâ hoc 37

PHAN 3: KÉT LUÂN VÀ DE XUAT 39

3.1.1 -Nhiêt dô ânh huông tâi màu sac vi thuô'c 39

3.2 - Mot vài ÿ kien de xuâ't 40

CAC KŸ HIÊU VIÉT TÂT.

DÂT VAN DE

Vi thuôc Hoàng liên chân gà (Rhizoma Coptidis) là thân rë cüa nhiêu loài

Hoàng liên thuôc chi Coptis ho Hoàng liên (Ranunculaceae) Thành phân hôa

hoc chinh cüa vi thuôc Hoàng liên là alcaloid, trong dô chû yéu là Ber và Pal

Hoàng liên cô vi dàng tmh hàn, cô tâc dung khâng khuan [3, 7, 12], chông viêm

[22], lai mât [1], ha huyét âp [3, 6]

Théo y hoc co truyên, truôc khi sü dung, câc vi thuôc duçfc ché bién nhàm tâng tâc dung diêu tri giâm tâc dung không mong muôn, tâng dô an toàn Vi

thuôc Hoàng liên duçfc ché bién theo nhiêu phuofng phâp khâc nhau, trong dô cô

phuong phâp sao Phuong phâp sao thuc chat là su tâc dông cüa nhiêt dô dén vi thuôc Câc phuong phâp sao khâc nhau thi nhiêt dô tâc dông khâc nhau làm cho thành phân hôa hoc sê bién doi khâc nhau dân toi tâc dung sinh hoc khâc nhau

Vi vây, chüng tôi nghiên cüu dê tài này vôi mue dîch tîm hiëu su ânh huông

cüa nhiêt dô (â mûc dô nhiêt dô khâc nhau trong khoâng thdi gian khâc nhau) dén Alcaloid cüa vi thuôc Hoàng liên

Nôi dung nghiên cüu gôm:

+ Dinh tïnh Alcaloid bàng phân ûng voi thuôc thü chung

+ Phân tich su bién doi Alcaloid bàng SKLM

+ Dinh luong Berberin, Palmatin

+ Thü mot sô tâc dung sinh hoc: khâng khuan, an thân

PHAN 1: TÔNG QUAN

1.1- DÂC DIÊM THÜC VÂT: • • •

C6 nhiêu loài Hoàng liên chân gà:

Coptis chinensis Franch, Coptis teeta Wall, Coptis teetoides C.Y Cheng,

Coptis deltoidea C.Y Cheng et Hsiao Ho Hoàng liên (Ranunculaceae).

Hoàng liên là cây thâo sô'ng nhiêu nâm cao chùng 1 5 - 3 5 cm, thân moc

thang phfa trên phân nhânh, co nhiêu rê nhô La moc so le tir thân rê lên, cuong

la dài 6 - 12 cm Phién la gôm 3 - 5 la chét, môi la chét lai chia thành nhiêu thùy mép cô nhüng rang ara [3, 2, 6, 7, 9, 12]

Cây thuông ra hoa vào mùa xuân Hoa co 5 la dài màu vàng lue, cânh hoa hïnh müi mâc dài bàng 1/2 la dài, co nhiêu nhi dài bàng cânh hoa Quâ dai co cuong trong chtra 7 - 8 hat màu xâm

Hoàng liên thucmg moc à vùng nui cao 1500 - 2500 m Cây ua noi mât am

thâ'p nhiêt dô 20 - 25 °C, dât dê thâo nuôc [3, 7, 9] Hoàng liên trong bàng hat,

thucmg trong vào mùa xuân [2, 7]

Thu hâi Hoàng liên vào cuôi mùa thu dàu mùa dông thâng 9 - 1 0 [3, 7, 12,

17, 24], néu là cây trong thï thu hâi sau 4 - 5 nâm Hoàng liên moc hoang và trong nhiêu à Trung Quôc (TûXuyên, Hô Bac) Ô Viêt Nam, Hoàng liên moc hoang trên dây nui Hoàng liên Son (Sapa cô Coptis quinquesecta Wang, ô Quang

Ba- Hà Giang cô Coptis chinensis Franch) [3,2,12].

- Bô phân dùng:

Bô phân dùng cüa Hoàng liên là thân rê, dô là nhüng mâu cong queo dài tù

3 cm trô lên, rông 0,2 - 0,5 cm Cô nhiêu dot khüc khuÿu, phân nhânh nhiêu

giông hînh chân gà nên côn goi là Hoàng liên chân gà Mât ngoài thân rê màu

vàng nâu côn vêt tich cûa rê phu và cuô'ng lâ The chat ctfng rân, bê ngang không phâng, phàn gô màu vàng tuai, phân vô và ruôt màu vàng dô [3, 24], không mùi,

vi rat dâng, ton tai lâu trong miêng

9 X

Anh 1.1 : Mâu Hoàng liên lây tai SaPa

Ghi chu: 1: Toàn cây 2: Hoa 3:Thân ré (MNC) 4: Thân rê

1.2- THÀNH PHAN HÔA HOC:

Thành phàn hoa hoc chmh cüa thân rê là Alcaloid (5 -8 %), trong do chü

yéu là Berberin, Palmatin, ngoài ra là Worenin, Coptisin, Jatrorizin, Magnoflorin, Columbamin [3,6, 9, 12]

Hàm lirong Alcaloid trong cây thay doi theo mùa và thcfi kÿ sinh truang cüa cây Hàm luong Ber trong thân rê cao nhât vào thâng 9 - 1 0 , thâp nhât vào thofi kÿ

cây ra hoa Trong la cüng cô Ber, à la già hàm luçmg Ber cao nhât vào thâng 7 -

10 khoâng 2,5 - 2,8 % [3, 20] Ô hoa và hat cüng chüa 1 luong nhô Ber: hoa 0,56

%, hat 0,23 %.

Ngoài Alcaloid trong thân rê Hoàng liên côn cô tinh bot, acid hùu co nhu

acid ferulic [3]

Công thuc eau tao cüa mot so Alcaloid trong Hoàng liên:

Bàng 1.1: Mot sô tmh chat vât lÿ cüa câc Alcaloid

UV X max (nm)

Ber dang base 144 °C 354, 278, 218

Ber dang nitrat ( N+ ) 205 °C 350, 264, 228

Ber clorid 427, 349, 266, 230Pal dang nitrat ( N+ ) 192 °C 340, 270, 224

Pal clorid 430,348,267,227D- tetrahydro Pal 142 °C

L- tetrahydro Pal 147 °C

DL- tetrahydro Pal 148 °C 335, 287

♦♦♦ Tâc dung khâng khudn:

Hoàng liên cô tâc dung khâng khuân manh dâc biêt là trên vi khuân Gram (-)

Trong dô cô nhiêu vi khuân duông ruôt Nuôc sâc Hoàng liên cô tâc dung rïc ché

mot sô' vi khuân: Shigellashiga, Shigella dysenteriae, Vitrio cholerae, Streptococus virideus Bacilhis proteus, Bacillus typhi, Bacillus pyocyaneus, Staphylococus aureus [3,12]

Y hoc cë truyên thucmg dùng Hoàng liên két hop vôi hoàng bâ, hoàng càm, chi tü trong bài Hoàng liên giâi dôc thang dê giâi dôc li truc khuân, tiêu chây

cap, viêm màng nâo [4, 16]

Tâc dung khâng khuân cüa Hoàng liên theo co ché: Ber ûc ché sinh tong

hop ARN, ADN và protein cüa té bào vi khuân [ 20 ,22 ] Ngoài ra Ber côn tàng cucmg chiïc nàng thuc bào vi khuân cüa câc té bào miên dich bach câu [4]

Mot sô vi khuân Staphylococus aureus, Streptococus hemolyticus dê khâng

thuoc vôi Ber sulfat nhung vôi bài Hoàng liên giâi dôc thang lai khô sinh ra tînh

chat khâng thuôc [4, 20]

❖ Tâc dung chong viêm:

Do Ber cô tâc dung \xc ché giâi phông acid arachidonic tir màng té bào, giâm

luong prostaglandin (PGI2) trong huyét tUdng [22], ûc ché hïnh thành u hat trên suc vât thuc nghiêm

❖ Tâc dung trên tim:

Ber làm giâm su co that cüa tim, làm giâm nhip tim trên chuôt thuc nghiêm [22] Fang cho ràng vôi liêu lmg/kg trên mèo thî nghiêm, Ber làm giâm co co tâm thât Ber cô tâc dung chông loan nhip tim, duoc xép vào nhôm thuôc dô'i khâng canh tranh vôi hê a , , a 2 adrenergic [20]

*X* Tâc dung ha huyét âp :

1.3- TAC DUNG:

Do làm dân mach [3,6] thuông dùng dé phong ngùa xü vûa dông mach, do Ber làm giâm luçmg cholesterol trong huyét tuong [20].

♦♦♦ Vôi dudng tiêu hoa:

Hoàng liên vôi liêu nhô kich thich giûp su tiêu hoa tàng co bôp da dày, ruôt,

chûa viêm da dày [3,6,12]

♦♦♦ Tâc dung khâng virût cûm [4,6,20] :

Nuôc sàc Hoàng liên vôi nông dô 50% nghiên cûu trên phôi gà cô tâc dung ûc

chê su phât triën cua virût cüm chung PR8, 56S8 P.M [20]

❖ Ba Protoberberin alcaloid tù dich chiét Hoàng liên cô tâc dung ûc ché monoamino oxydase (MAO), riêng Jatrorrhizin ûc chê' không canh tranh câ

MAOA và MAOB (ô ti lap thé nâo chuôt công trâng) vôi giâ tri IC50 là 4pM và

62 (J.M Côn Ber chî ûc ché canh tranh vôi MAOA vôi IC50 là 126 p,M trong khi Pal vôi IC5() = 200jiM cüng không ûc ché 2 enzim này [23]

❖ Nhüng hop chat protoBer làm giâm hàm luçmg seretonin vôi IC50 cüa Ber là 3,0(xM cüa Pal là 16,5pM Câc hop chat protoBer vôi liêu toi da 20(j,M không dôc hai vôi té bào P815 két quâ là Ber và Pal ûc ché hoat tmh enzim

tryptophan hydroxylase do dô làm giâm hàm luong seretonin à té bào P8i5 [13].

♦♦♦ Ber ûc ché su két tâp tiëu eau, làm giâm luong Thromboxan (TXB2),

do dô cô tâc dung chông thiéu mâu nâo eue bô [22]

♦> Dich chiét tù Hoàng liên cô tâc dung ûc ché su phât triën cüa té bào ung thu, Hoàng liên dâ ûc ché su phât triën khôi u và su hinh thành trong quàn

thë dông té bào ung thu da dày, ruôt két, vü, phu thuôc vào liêu và thôi gian dùng Su phât triën cüa té bào bi ûc ché hoàn toàn sau 3 ngày chiu tâc dung cüa

thuôc à 10|ag/ml duoc thâo Tâc dung ûc ché phât triën khôi u cüa Hoàng liên là

do giân tiép ûc ché hoat tmh cüa CDC2 kinase Tâc dung này nôi bât lên nhu môt mue tiêu diêu tri ung thu bàng hoa liêu phâp [18]

Thuc nghiêm tiê'n hành trên té bào u thân kinh dêm cüa chuôt, Chen choràng Ber ûc ché sinh t6ng hop ARN, ADN và protein và làm giâm nàng luong lase dë tiêu diêt té bào u thân kinh dêm [22]

♦♦♦ Ber co tâc dung vôi dan bào (leihsmania), diêt kÿ sinh trùng sot rét

[2 0 , 21]

❖ Pal rïc ché epinephrine, co tâc dung khâng khuan, hoat hoâ

acetylcholin esterase, hoat hoâ câ enzim anticholin esterase [21]

❖ Dôc tmh cüa Hoàng liên :Ber co LD50 =25 mg/Kg T T , LD50 cüa

hoàng liên sông = 6,875 ± 0,904 g/Kg T.T 0 ].

1.4- CÔNG DUNG:

*Theo y hoc co truyên, Hoàng liên cô tâc dung thanh nhiêt tâo thâp, thanh

nhiêt tâ hôa [2,4]

*Hoàng liên cô vi dàng, tmh hàn, quy vào nàm kinh: tâm, tÿ, vi, can, dai

tràng [4, 5 ,7, 20]

* Công nâng chü tri:

■ Thanh nhiêt tâo thâ'p:diêu tri li, viêm ruôt Hoàng liên cô tmh khâng

khuan manh phé rông nên dùng dé tri li amip, li truc khuan [3,4, 24]

■ Thanh tâm trùphiên: dùng dë diêu tri chùïïg tâm hôa thinh gây ra hôi

hôp mât ngü, bon chôn, niêm mac luôi miêng phông dôp [4,24]

■ - Thanh can sang mât: tri chiïng can hôa gây ra dau mât dô , sot cao

xuât huyét hoàng dân , diên cuông phâ phâch ( can hoâ vuang ) [2, 7 ]

■ Chi huyêt: dùng cho truông hap huyét nhiêt dân dén chây mâu cam,

non ra mâu [4, 6]

■ Gidi dôc ha hôa: diêu tri ung nhot dôc bên trong, sot cao mê sâng

phât cuông [4, 6]

Trong dân gian thuàng dùng dich nuôc sàc Hoàng liên dë tri chûng dau mat

dô, dùng ngoài dë tri nam ngoài da, eczema, viêm tai giûa cô mü [3,24] bôi ngoài diêu tri trê em tua luôi ,sung luôi ,viêm miêng , lô môi [7]

Can chu y; Hoàng liên vi rat dàng không nên dùng liêu cao kéo dài dë gây

non, liêt thân kinh vi giâc, ton thuang dich vi, ân không biét ngon [4]

1.5- DINH LÜONG ALCALOID:

De dinh luçmg Alcaloid trong Hoàng liên cô nhiêu phuong phâp:

• Dinh luong bàng phiïüng phâp cân [3,5,11 ]

Nguyên tâc: Chiét alcaloid trong duoc lieu bàng côn, két tüa Ber bàng dung

dich Kl, thêm aceton, kiêm hoa bàng amoniac de tao tüa phüc Loc lày tüa sày khô dem cân

lg tüa tuong duong 898,2 mg Berberin

lml dich loc tuong ûng 0,0272 mg Berberin

Duoc diën Viêt Nam I quy djnh duoc lieu phâi cô ft nhât 4% Berberin

• Phtfcfng phâp acid base [3,11]

Nguyên tac: Chiét alcaloid trong duoc lieu duôi dang base bàng dung môi

hüu co ft phân eue, acid hoa dich chiét chuyën alcaloid sang dang muôi tan duoc trong nuôc Gan lây lôp nuôc, kiêm hoa bàng NaOH, làc vôi dung môi hüu co ft phân eue de chuyën hét alcaloid base sang pha dung môi Thêm chmh xâc mot luong acid HC1 Chuân dô HC1 du bàng NaOH, chî thi dô Methyl, tù dô trnh luong alcaloid

• Phtfong phâp dùng sac kÿ chê'hoâ de tâch roi do quang [11,24]

Nguyên tâc: dùng SKLM dë tâch riêng câc alcaloid khôi hôn hop, cao lày

riêng câc vét, phân hâp phu bàng dung môi thich hop, do quang ô buôc sôngthïch hop Mât dô quang tî le vôi nông dô dung dich alcaloid

• Phtfcfng phâp sâc kÿ long hiêu nâng cao (HPLC) [15]

Nguyên tac: Dich chiét alcaloid duoc tiêm vào côt sâc kÿ pha dông

duoc bom liên tue qua côt tâch riêng câc alcaloid khôi hôn hop Môi alcaloid khi ra khôi côt duoc detector UV nhân biét, biéu hiên ra bàng 1 pic Diên tich pic tuong ung vôi nông dô alcaloid trong dung dich tiêm vào côt

1.6 CHÉ BIEN:

1.6.1 Mue dîch che bién thuôc co truyên:

> Loai bô nhüng thành phân không can thiét làm vi thuôc tôt hon lên Giâm dôc tmh cüa vi thuôc vî du Ban ha ngâm trong nirôc vôi giâm hét vi ngüa, ché phu tu thành bach phu diêm phu dë giâm dôc tmh cüa aconitin [4, 12 , 14]

> Giâm tâc dung không mong muôn, thay doi tâc dung cüa thuôc, vî du: Hà thü ô ché vôi dàu den dë giâm anthranoid, giâm tâc dung nhuân tay [4,

> Giüp bâo quân thuôc tôt hon: làm on dinh duoc lieu trânh nam môc,

vî du Hoè hoa trong diêu kiên am, men rutinase phân huÿ rutin thành queexetin làm hoè bi xâm di [4, 12]

> Làm thay doi tmh vi quy kinh cüa thuôc tù dô làm thay doi tâc dung cüa thuôc, vî du: Sinh dia vi dang tmh hàn, tâc dung thanh nhiêt luong huyét, sau khi ché vôi sa nhân, gùng, ruou duôi tâc dung cüa nhiêt trü thành thuc dia vi ngot tînh ôn cô tâc dung bo huyét ; hoàng kÿ trîch mât tàng quy kinh tÿ , tâng tâc dung bo khî [4, 7, 12]

> Làm tâng tâc dung cüa thuôc do làm giâm dô bên co hoc, tâng khânâng giâi phông hoat chat, làm mât mot sô thành phân không can thiét, sinh ra mot sô thành phân moi cô tâc dung diêu tri bênh Vî du thâo quyét minh vi sao

cô tâc dung nhuàn tây , sao vàng cô tâc dung nhuân ha, ha âp, sao chây cô tâc dung an thân [4]

1.6.2 Câc phuong phâp ché bién thuoc co truyên:

Cô ba phuong phâp co bân ché bién thuôc co truyên: hoâ ché, thuÿ ché, thuÿ hoâ hop ché [4, 12]

♦> Hoâ che: là phuong phâp ché bién chî dùng lüa, nhàm mue dîch:

- Giâm dôc tînh, giâm tâc dung quâ manh cüa vi thuôc

- On dinh hoat chât trong vi thuôc

- Giâm dô bên co hoc cüa vi thuôc

Câc phuong phâp hoâ ché duoc ghi à bâng 1.2

Bàng 1.2: câc phuong phâp hoâ ché.

Câc phirang phâp hoâ

che

Nhiêt dô (°C) '

Màu sac vi thuôc

thô 100 -140 Vàng Cân bàng âm dueng cho vi thuoc Sao den

(hâc sao) 180 - 240

Mat ngoài màu den, bên trong màu vàng

Tàng tâc dung tiêu thuc giâm tmh mânh liêt cüa vi thuôc

Sao chây 180-240

Mât ngoài màu den, bên trong màu nâu den

Tàng tâc dung câm mâu

Sao câch cât 200 - 250

Truyên nhiêt dô dông dèu vào vi thuôc.

Sao câch câm

Tàng tâc dung kiên tÿ, giâm tmh khô tâo cüa vi thuôc

Sao câch hoat thach hoac van câp

Tinh ché thuôc cô nguôn khoâng vât,

à nhiêt dô cao câc hoat chat thàng hoa

tâch ra khôi tap

giâm tmh kich ufng cüa vi thuôc Nirâng Làm chin, giâm tmh mânh liêt cüa vi

thuôc Hoâ phi

Làm thay doi tmh chat vi thuôc loai trîr nuôc trong câu truc phân tu tàng khâ nàng hüt nuôc làm sàn se

Mot so công trinh nghiên cuu vê ânh huông cüa nhiêt dô tôi thành phàn hoâ hoc cüa duoc liêu cho thày : ô mue t° < 80° C ( tuong duong phuong phâp sao qua cüa YHCT ) thành phàn hoâ hoc cüa vi thuôc ft thay dôi : diosgenin trong

thân rê mot sô loài thuôc chi Dioscorea L ft thay doi à mire t° 50-60°C[ 10] Ô

mûc t° cao (180 -200° C) tuong duong sao chây cüa YHCT thành phàn hoâ hoc thay doi rat lôn

1.6.3 Câc phuong phâp ché bién Hoàng liên:

• Hoàng liên dé sông dùng dé tâ tâm hoâ, tri chüng phât ban diên

cuông phiên khât

• Hoàng liên trich ruçru sao qua tâc dung tâp trung à nüa nguôi phia

trên, tri viêm mât, lô miêng luôi [20 , 24]

• Hoàng liên trich nuôc gùng tâng tâc dung à trung tiêu dùng trong

truông hop dày bung, buôn non, non do câm mao phong nhiêt [20 , 24]

• Hoàng liên trich nuôc ngô thù du cô tâc dung thanh can, diêu hoà

truông vi, chông non, o chua [24]

• Hoàng liên tâm giâm tri can hu hoâ [1]

• Hoàng liên sao vôi hoàng thé cô tâc dung tiêu thuc chûa bênh cam ô

trê con

• Hoàng liên trich mât lçm tri can dôm thuc hoâ.

Mot sô công trînh dâ nghiên cüu vê ché bién Hoàng liên cho thây: Hoàng

liên trich gùng cô tâc dung loi mât, ha sot tôt hon Hoàng liên sông Hoàng liên

ché giâm cô tâc dung loi mât tôt hon câ Hoàng liên trich gùng [1]

1.7 NHÂN XÉT CHUNG:

Viêc ché bién làm ânh huông râ't nhiêu tôi tfnh chat cûa vi thuoc, qua ché bién tâc dung cüa vi thuoc cüng thay doi Do dô cân nàm chàc duoc quy

luât cüa ché bién dé tao ra nhüng tâc dung diêu tri bênh theo y muôn chü

quan De tâng giâ tri su dung cüa vi thuoc cân lua chon nhüng phuong phâp ché bién phù hop

Tuÿ theo mue dich sir dung mà ta lua chon phuong phâp ché bién khâc

PHAN 2: THÜC NGHIÊM VÀ KÊT QUÂ

2.1- NGUYÊN LIÊU PHI/ÛNG TIÊN, PHI/ONG PHÂP NGHIÊN CÜU: 2.1.1 Doi ttrong nghiên cuti:

Chüng tôi tien hành nghiên cüu trên thân rê cây Hoàng liên (Rhizoma

Coptidis) thuôc chi Coptis ho Ranunculaceae Mâu lây tai Sapa thâng 9/2002.

2.1.2 Thiét b i , hoâ chat ,suc vât thî nghiêm

- Tü sây: Memmert, SHELLAB

- May xâc dinh dô âm Précisa HA60 (Thuy Sï)

- Cân phân tîch

- Bô Shoxhlet 150 ml

- May sâc kÿ long (HPLC) Thermo Finnigan.

- Dung eu thüy tinh

- Chat chuân: Ber clorid, Pal sulfat do Viên Duçfc lieu cap

Rotundin do khoa Duoc Hoc viên Quân y cap

- Bân mông Silicagel GF254 Merck

Hôa chat dat tiêu chuân phân tich (P.A): Methanol, Buthanol, acid

clorydric, acid acetic dàc, Natrilauryl sulfat, Kalidihydrophosphat

- Chüng vi khuan do phông vi sinh, Bô mon công nghiêp duçfc cap

2.1.3 Phirong phâp nghiên cuti:

2.1.3.1 Chê bien:

- Sây câc mâu Hoàng liên à câc müc nhiêt dô khâc nhau (tù 100° C dén 220

°C ) trong khoâng thefi gian 10’, 20’, 30’.

- Nhân xét câm quan trên co sô màu cüa câc mâu nghiên cüu

- So bô dânh giâ mâu cô nhiêt dô và thôi gian cho sân phâm tuong duong sao vàng, sao chây

2.1.3.2 - Nghiên cüu su: bien doi thành phân hôa hoc

* Chiê't xuâ't: chiét bàng acid loâng trong MeOH [15]