Bài giảng lên lớp của thầy Lò Thanh Sơn về Công nghệ di truyền. Bài giảng gồm các phần: Mở đầu; Các kỹ thuật chủ yếu trong phân tích axit nucleic; Các kỹ thuật chủ yếu trong công nghệ di truyền; Công nghệ di truyền động vật; Công nghệ di truyền thực vật; Công nghệ di truyền đối với con người
Trang 1Bài giảng:
CÔNG NGHỆ DI TRUYỀN
ThS Lò Thanh Sơn Trường Đại học Tây Bắc
Trang 2NỘI DUNG CƠ BẢN
1 Các kỹ thuật chủ yếu trong phân tích axit nucleic
2 Các kỹ thuật chủ yếu trong công nghệ di truyền
3 Công nghệ di truyền động vật
4 Công nghệ di truyền thực vật
5 Công nghệ di truyền đối với con người
Trang 3NỘI DUNG
1 Các phương pháp tách chiết axit nucleic
- Tách chiết ADN
- Tách chiết ARN
- Định lượng và xác định độ tinh sạch của axit nucleic
2 Một số phương pháp phân tích ADN
- Giải trình tự axit nucleic
- Lai axit nucleic
- PCR nền tảng và cải tiến
- Ngân hàng gen (ADN) và ngân hàng cADN
Trang 15Định tính và định lượng axit nucleic
Trang 16- Các kỹ thuật phân tử xác định đa dạng di truyền và
phân loại phân tử
- Ngân hàng gen, cDNA
Trang 17DNA sequencing
• Phương pháp Maxam & Gilbert
• Phương pháp Sanger (dideoxy)
• Máy tự động
– Nguyên lý
– Các yếu tố cần thiết
– Các bước thực hiện
Trang 18Phương pháp Maxam & Gilbert
Dimethyl
sulfat pH = 2 Acid
Hydrazin Hydrazin
(NaCl)
Trang 19Phương pháp Maxam & Gilbert
Trang 21Phương pháp Maxam
& Gilbert
Trang 22Phương pháp Sanger
Trang 23Máy tự động giải trình tự gen
Trang 24Các kỹ thuật lai phân tử
- Southern blotting
- Northern blotting
- In situ hybridization
Trang 34PCR – Polymerase Chance Reaction
• Nguyên lý của kỹ thuật
• Các yếu tố cần thiết
• Chu kỳ lặp lại của phản ứng - kết quả
• Các ứng dụng chủ yếu
• Phát triển kỹ thuật PCR: phức, lồng,
Trang 35PCR – Polymerase Chance Reaction
Trang 37Ứng dụng chủ yếu của PCR
• Tách dòng gen, ngân hàng DNA, cDNA, bản đồ
gen, giải trình tự gen
• Chẩn đoán sớm bệnh nhiễm virus, vi khuẩn,
đột biến rối loạn di truyền
• Đột biến in vitro cho gen mới
• Phân loại phân tử
Trang 48Các kỹ thuật phân tử xác định đa dạng di truyền và phân loại phân tử
Trang 513 Kỹ thuật AFLP
Trang 524 Kỹ thuật phân tích vi vệ tinh SSR