BUỔI 1Nội quy phòng thực tập Cách sử dụng KHV vật kính dầu Soi tươi và nhuộm đơn vi khuẩn ThS.. KÍNH HIỂN VI QUANG HỌCCấu tạo: • Cơ học: chân kính, thân kính, bàn kính, thanh trượt di ch
Trang 1BUỔI 1
Nội quy phòng thực tập
Cách sử dụng KHV vật kính dầu
Soi tươi và nhuộm đơn vi khuẩn
ThS BS Hoàng Thị Phương Dung
Trang 2• Đưa lam đã dùng vào hũ ngâm lam.
• Vệ sinh chỗ ngồi trước khi ra về.
Trang 3Kính hiển vi
KÍNH HIỂN VI TRONG VI SINH
- Đơn vị đo kích thước vi sinh vật:
Trang 4KÍNH HIỂN VI QUANG HỌC
Cấu tạo:
• Cơ học: chân kính, thân kính,
bàn kính, thanh trượt di
chuyển tiêu bản, ốc di chuyển
thanh trượt, ốc sơ cấp, ốc thứ cấp,…
• Quang học: nguồn chiếu sáng,
tụ quang, thị kính, vật kính,
Độ phóng đại:
ĐPĐ của KHV = ĐPĐ của vật kính x ĐPĐ của thị kính
(40x, 100x, 400x, 1000x) = (4x, 10x, 40x, 100x)*(10x)
Trang 5Cách nhận biết vật kính 100x:
- Ký hiệu trên thân vật kính: 100x, oil
- Thường có vòng đen, trắng, chìm hoặc nổi ở
Trang 6– Định luật truyền thẳng của ánh sáng:
“Trong 1 môi trường trong suốt và đồng tính
ánh sáng truyền theo đường thẳng”
– Hiện tượng khúc xạ ánh sáng: hiện tượng
ánh sáng đổi hướng khi đi qua mặt phân cách giữa hai môi trường trong suốt có chiết suất
khác nhau
Trang 7bên kia pháp tuyến
so với tia tới
Trang 8Đường đi của ánh sáng khi sử dụng VK 100x:
Công dụng của lớp dầu cèdre: làm giảm hiện
tượng khúc xạ ánh sáng, tăng độ tập trung ánh sáng vào vật kính
Trang 93 Nhỏ 1 giọt dầu Cèdre lên tiêu bản
4 Đặt tiêu bản vào bàn kính, chỉnh giọt dầu
nằm giữa tia sáng
5 Xoay VK 100x về đúng khấc trên trục ánh sáng
Trang 106 Mắt nhìn ngang, từ bên ngoài: dùng ốc to
nâng bàn kính từ từ đến khi đầu VK ngập trong dầu thì dừng lại
7 Mắt nhìn vào thị kính: xoay ốc to từ từ theo
chiều ngược lại cho tới khi thoáng thấy được vi trường
+ không chớp mắt khi đang vặn ốc (vì hình
ảnh vi khuẩn thoáng qua rất nhanh)
+ tránh làm vỡ tiêu bản
Trang 11Quan sát tiêu bản:
- Nhìn vào thị kính
- Sử dụng ốc thứ cấp điều chỉnh cho hình ảnh luôn
rõ nét
- Sử dụng 2 ốc di chuyển thanh trượt để di chuyển
vị trí quan sát theo hình chữ chi
- Que chỉ
Ghi nhận: hình thể, tính chất bắt màu, phương
pháp nhuộm, cách sắp xếp của vi khuẩn
Trang 12Lưu ý:
- Khi sử dụng KHV, phải quan sát bằng cả
2 mắt
- Với kính mẫu: chỉ được sử dụng ốc nhỏ,
không sử dụng ốc to, không di chuyển tiêu bản
Trang 13Soi tươi
Mục đích:
– Xác định khả năng di động.– Quan sát hình dạng thật
Phương pháp:
+ Giọt ép:
+ Giọt treo:
Trang 14Giọt ép Giọt treo
dễ đọc KQKhuyết điểm Thời gian quan
Trang 20Nguyên lý:
- Chỉ dùng 1 loại thuốc nhuộm và thuốc màu gì thì VK bắt màu đó
- 1 số thuốc nhuộm thường dùng: bleu
methylen, violet de gentian, red fuschin,
Trang 21Sinh viên thực tập
– Làm tiêu bản và nhuộm đơn
– Xem kính mẫu: hình dạng, cách sắp xếp, tính chất bắt màu và phương pháp nhuộm
Câu hỏi:
– Mô tả vi khuẩn trong bệnh phẩm
– Mô tả vi khuẩn ở kính mẫu