NGHIÊN CỨU SỰ TẠO DỊCH TREO TẾ BÀO CÂY ĐINH LĂNG POLYSCIAS FRUTICOSA L. HARMS.

NGHIÊN CỨU SỰ TẠO DỊCH TREO TẾ BÀO CÂY ĐINH LĂNG POLYSCIAS FRUTICOSA L. HARMS.

ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC VẬT

ĐỀ TÀI:

NGHIÊN CỨU SỰ TẠO DỊCH TREO

TẾ BÀO CÂY ĐINH LĂNG

GV: Th.S PHAN NGÔ HOÀNG

GIỚI THIỆU:

• Đinh lăng hay cây gỏi cá, nam dương sâm (danh pháp khoa học: Polyscias

fruticosa, đồng nghĩa: Panax fruticosum,

Panax fruticosus) là một loài cây nhỏ

thuộc chi Đinh lăng (Polyscias) của họ

Cam tùng (Araliaceae) Cây được trồng

làm cảnh hay làm thuốc trong y học cổ

truyền

Thành phần hoá học: Trong rễ có

glucosid, alcaloid, saponin triterpen,

tanin, 13 loại acid amin, vitamin B1

Trong thân và lá cũng có nhưng ít hơn Với mục đích thu nhận một lượng lớn saponin thông qua con đường công

nghệ sinh học bằng phương pháp nuôi cấy dịch treo tế bào.

Saponin là gì?

• Saponin là một glicozit tự nhiên thường gặp trong nhiều loài thực vật

• Saponin có tính chất chung là khi hoà tan vào nước có tác dụng làm giảm sức căng

bề mặt của dung dịch tạo nhiều bọt, có tính chất phá huyết, độc đối với động vật máu lạnh nhất là đối với cá

• Dưới tác dụng của enzym có trong thực vật hay vi khuẩn hoặc do axít loãng, saponin bị thuỷ phân

thành các phần gồm genin gọi là sapogenin và

phần đường gồm một hoặc nhiều phân tử đường Các đường phổ biến là D-glucoza, D-galactoza, L-arabinoza, axít galactunoic, axít D-glucuronic

Phần genin có thể có cấu trúc cholan như

sapogeninsteroi hoặc sapogenintritecpen dạng β-amirin (axít olenoic), dạng α-β-amirin (axít asiatic), dạng lupol (axit buletinie) hoặc tritecpen bốn vòng.

tác dụng:

histolytica, làm đơn bào co thành kén và có tác dụng kích thích miễn dịch gây chuyển dạng

lympho bào trong thí nghiệm nuôi cấy in vitro.

thích miễn dịch không đặc hiệu

cholesterol trong máu gây theo cơ chế nội sinh bằng Tween 80

lực ở động vật gây mệt mỏi, tác dụng kéo dài và bền vững

Theo nghiên cứu của Học viện Quân sự Việt Nam, dung dịch cao đinh lăng có tác dụng:

- Tăng biên độ điện thế não, tăng tỉ lệ các sóng alpha, bêta và giảm tỉ lệ sóng delta Những biến đổi này diễn

ra ở vỏ não mạnh hơn so với ở thể lưới

- Tăng khả năng tiếp nhận của các tế bào thần kinh vỏ não với các kích thích ánh sáng

- Tăng nhẹ quá trình hưng phấn khi thực hiện phản xạ trong mê lộ

- Tăng hoạt dộng phản xạ có điều kiện gồm phản xạ dương tính và phản xạ phân biệt

- Nhìn chung, dưới tác dụng của cao đinh lăng, vỏ não được hoạt hóa nhẹ và có tính đồng bộ, các chức năng của hệ thần kinh về tiếp nhận và tích hợp đều tốt hơn

NGUYÊN LIỆU:

• Các mẫu cây con Đinh lăng nuôi trong môi trường MS có 2,4 -D 2mg/l là vật liệu để tạo mô sẹo

PHƯƠNG PHÁP

• Mô sẹo 14 tuần tuổi có nguồn gốc từ lá non Polyscias fruticosa L Harm được

chuyển sang môi trường MS có bổ sung 20% nước dừa và 2,4 –D 1mg/l

KẾT QUẢ

• Sau 8 tuần thu được dịch treo tế bào Sự tăng trưởng của dịch treo tế bào tốt và

tạo được rễ khi trong môi trường nuôi cấy

có sự hiện diện của saccharose 30g/l, 2,4 – D 1mg/l và BA 2,0 mg/l

• Từ vật liệu này có thể tiến hành việc li

trích saponin

THẢO LUẬN

• Sự tăng trưởng của dịch treo tế bào chịu ảnh hưởng của nhiều yếu tố vật lý (nhiệt

độ, ánh sáng, độ thong khí…) cũng như

thành phần và hàm lượng các chất trong môi trường nuôi cấy như saccharose, các chất điều hòa sinh trưởng thực vật, các

chất chống oxy hoá các hợp chất phenol

do tế bào tiết ra môi trường nuôi cấy (acid citric, acid ascorbic…)

Hệ thống Bioreactor trong sản xuất

• Bioreactor với hệ thống cung cấp và xả

môi trường, hệ thống cấp và thoát khí vô trùng được thiết kế có khả năng tạo ra

một môi trường nuôi cấy vô trùng, kiểm soát các yếu tố môi trường bên trong như

sự lắc, sự thoáng khí, nhiệt độ, oxy hòa tan, pH )

Bioreactor có ba loại chính

được phân biệt như sau:

Loại dùng để sản xuất sinh khối (sản

phẩm là khối tế bào, các đơn vị phát sinh phôi, phát sinh cơ quan, chồi, rễ)

- Loại dùng để sản xuất các chất chuyển hóa thứ cấp, enzyme

- Loại dùng cho việc chuyển hoá sinh học các chất chuyển hóa ngoại sinh (là các

chất tiền thân trong quá trình trao đổi

chất)

Hệ thống nuôi cấy tế bào thực vật (Bioreactor and Control System for Plant Cell) ()New Brunswick Scientific, USA.

tách chiết saponin

Muốn thu nhận các hợp chất có trong

nhân sâm người ta thường sử dụng

phương pháp chiết tách (extraction), hiện nay người ta hay sử dụng phương pháp microwave extraction do hiệu suất tách

cao hơn

KẾT LUẬN

• Ứng dụng dịch treo tế bào :

• Giảm sự khai thác quá mức các loại thực vật quý hiếm gây mất cân bằng sinh thái.

• Thu nhận với lượng lớn các hợp chất có giá trị cao trong y học như: nuôi cấy tế bào nhân

sâm(ginsenoside), shikonin, taxol được chiết xuất từ taxus wallichiana zucc (có trong cây thông đỏ) thuốc trị bệnh ung thư…

• Trong sản xuất số lượng lớn cây dược liệu và hoa cảnh.

• Chọn nhanh dòng tế bào kháng bệnh.

• Chuyển gen và lai thể hệ.

TÀI LIỆU THAM KHẢO

/658

%C4%83ng

http://bao-loc.us/diendan/archive/index.php?t-1462.html

http://my.opera.com/kiendat/blog/ung-dung-he-

thong-bioreactor-trong-san-xuat-so-luong-lon-cay-duoc-lieu-va-hoa-ca

nhiên

LỜI CẢM ƠN