Acid shikimic từ lâu được biết đến là một hợp chất trung gian quan trọng trong quá trình sinh tổng hợp một số acid amin thơm như phenylalanine, tyrosin, tryptophan; và một số hợp chất alcaloid. Acid shikimic có thể được phân lập từ vi khuẩn như E. coli hay từ một số loài thực vật.
Trang 1GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC ACID SHIKIMIC TRONG MỘT SỐ CÂY
THUỐC Ở VIỆT NAM
Trang 3Đặt vấn đề
KN và vai trò của acid shikimic (SA)
Nguồn nguyên liệu sản xuất SA và những khó khăn gặp phải
Tính cấp thiết của đề tài
Trang 4Đặt vấn đề
Định tính SA trong một số dược liệu
Bước đầu NC xây dựng quy trình chiết tách và tinh chế SA từ DL có
Định lượng SA trong các dược liệu bằng phương pháp HPLC
Nội dung đề tài
3
2
1
Trang 52
3
Trang 6Tổng quan
ACID SHIKIMIC
CTPT: C7H10O5
CTCT:
Trang 7Tổng quan
ACID SHIKIMIC
Trang 8• PP Sắc ký khí lỏng
(GLC).
• PP chuẩn độ.
Trang 9Tổng quan
Chất quan trọng trong quá trình STH h/c tự nhiên
Ngliệu để BTH oseltamivir làm thuốc trị cúm gia cầm
VAI TRÒ đường shikimat của TV, VSVChất trung gian trong con
Trang 13Tổng quan
Đại Hồi
Trang 15Đối tượng và PP NC
1 Nguyên liệu
Hồi: thu hái tại Bạch Mã, Bà Nà, Pù Mát.
Đài hoa bụp giấm thu hái tại Bắc Giang.
Cỏ ngọt, Ban tròn : khoa PT, Viện Dược liệu.
Dây thìa canh : ThS Ngô Quốc Luật - TT cây thuốc HN cung cấp.
Trang 16Đối tượng và PP NC
Dịch chiết của các DL được xử lý với các dung môi, sau đó được sử dụng
để tiến hành chấm SKLM so sánh với SA chuẩn
Trang 18Đối tượng và PPNC
Dung dịch chuẩn: Pha dd chuẩn mẹ có nồng độ
0,4mg/ml, sau đó pha loãng để có các nồng độ thích
Trang 192
3
Trang 20Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
Định tính SA trong các dược liệu
• Dịch chiết của các DL sau khi chấm SKLM so sánh với
chuẩn đều có vết có cùng Rf với chuẩn và có màu tương đương chuẩn sau khi phun TT KL sơ bộ các mẫu thử đều có SA
• Các mẫu thử được ĐT lại bằng HPLC, so sánh pic acid và
phổ hấp thụ UV của thử và chuẩn
Trang 21Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
Trang 22Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
Trang 23Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
Từ diện tích của pic SA trên sắc ký đồ tính nồng độ SA của dd thử dựa vào
đường chuẩn hồi quy
Title in here
Tính hàm lượng SA/dược liệu theo
So sánh tr và phổ UV-VIS của pic trên sắc ký đồ của dd thử với dd chuẩn để
xác định pic SA
Xử lý kết quả
Trang 24Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
ACID SHIKIMIC Sigma
Shikimic acid Std 0,54mg-ml -5uL- 030210-001.dat
Retention Time Area
Hình 1: Sắc ký đồ HPLC của
dung dịch acid chuẩn
Hình 6: Sắc ký đồ HPLC của
dịch chiết lá Cỏ ngọt
Trang 25Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
STT Dược liệu Dt pic
(mAUs)
Hàm ẩm (%)
HL SA/dl (%)
Trang 26Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
Dịch trong
Sơ đồ chiết
tách SA
Trang 27Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
Cặn SA thô
Dịch MeOH-H 2 0 Dịch trong
Trang 28Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
Trang 29Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
Bàn luận
1 Về kết quả đinh tính SA trong các DL
Các DL qua thử định tính bằng SKLM và pp HPLC đều cho thấy có chứa SA Đây là lần đầu tiên tại VN SA được nghiên cứu trên các DL này.
2 Về kết quả định lương SA trong các DL bằng pp HPLC
PP HPLC với các đk đã chọn là phù hợp cho ĐT, ĐL SA trong DL.
Trang 30Thực nghiệm-Kết quả-Bàn luận
Bàn luận
3 Về kết quả NC xây dựng quy trình chiết tách và tinh chế SA
Đã xd và thực hiện thành công quy trình chiết xuất và tinh chế SA từ dược liếu lá Ban tròn
Trang 312
3
Trang 33Kết luận và kiến nghị
• KIẾN NGHỊ
Sàng lọc trên diện rộng hơn nữa
về các dược liệu có chứa SA
Sàng lọc trên diện rộng hơn nữa
về các dược liệu có chứa SA
Với các DLsàng lọc, cần NC về khả năng cung ứng của các DL đó, về
tính ứng dụng của đề tài
Với các DLsàng lọc, cần NC về khả năng cung ứng của các DL đó, về
tính ứng dụng của đề tài
1
2
Trang 34Xin chân thành cảm ơn!!!