ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MENNẤM MỐC
Trang 1CHÀO MỪNG CÔ
VÀ CÁC BẠN ĐẾN
VỚI BÀI THUYẾT TRÌNH
CỦA NHÓM
Trang 2BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM
ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN
PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU
KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ
NẤM MEN-NẤM MỐC
ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN
PHÂN TÍCH TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU
KHÍ VÀ ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ
NẤM MEN-NẤM MỐCGIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN:
NGUYỄN THỊ MỸ LỆ
Trang 44 Củng cố kiến
thức
4 Củng cố kiến
thức
Trang 5Vi khuẩn hiếu khí là những vi khuẩn tăng trưởng và hình thành khuẩn lạc trong điều kiện có sự hiện diện của oxy phân tử
Tổng số vi khuẩn hiếu khí hiện diện trong mẫu phản ánh vệ sinh chế biến, độ tươi mới hay nguy cơ hư hỏng của thực phẩm
Do đó, chỉ tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí được sử dụng
để đánh giá chất lượng vệ sinh hơn là độ an toàn của thực phẩm
A.VI KHUẨN HIẾU KHÍ
A.VI KHUẨN HIẾU KHÍ
Trang 6 Sử dụng kỹ thuật nuôi cấy vi sinh vật trên môi trường thạch
Sau khi ủ hiếu khí ở nhiệt độ 300 C trong thời gian 72 giờ
Số lượng vi sinh vật trong 1g (ml) mẫu sản phẩm thực phẩm kiểm nghiệm được tính theo số khuẩn lạc đếm được từ các đĩa nuôi cấy theo các nồng độ pha loãng.
1.2 Nguyên lý
Trang 71.3 Dụng cụ
1.3 Dụng cụ
Ống nghiệm(16 mm) Tủ cấy vô trùng
Cốc thủy tinh(100ml, 250ml) Tủ ấm
Bình tam giác (250 ml) Máy dập mẫu( Stomacher) Ống đong (100 ml) Máy trộn mẫu (Vortex mixer) Đầu tip Pipetman (1000, 5000 μl)l) Cân phân tích
Đèn cồn Pipetman (1000, 5000 μl)l)
Lò viba
Trang 81.4 Môi trường và hóa chất 1.4 Môi trường và hóa chất
Saline Pepton Water
Trang 91.5 Quy trình phân tích
1.5 Quy trình phân tích
Định lượng mẫu (10 g hoặc 10 ml)
Đồng nhất và pha loãng mẫu
Cấy mẫu và rót môi trường vào đĩa Petri
Cấy mẫu và rót môi trường vào đĩa Petri
Ủ mẫu (30 1) 0 C trong 72 giờ)
Ủ mẫu (30 1) 0 C trong 72 giờ)
Đếm khuẩn lạc (chọn đĩa có 25 – 250 khuẩn lạc)
Đếm khuẩn lạc (chọn đĩa có 25 – 250 khuẩn lạc)
Trang 11Mật độ tổng vi khuẩn hiếu khí trên 1 g mẫu
được tính như sau:
A(CFU/g) =
Trong đó:
A là số tế bào vi khuẩn /1 g mẫu
N là tổng số khuẩn lạc trên các đĩa đã chọn
n i là số lượng đĩa cấy tại một độ pha loãng
V là thể tích dịch cấy vào petri
f i là độ pha loãng tương ứng
1.6 Kết quả
Trang 13VÍ DỤ :E coli hay còn được gọi là một trong những
loài VK chính ký sinh trong đường ruột của động vật
máu nóng Sự có mặt của E coli trong nước ngầm là một chỉ thị thường gặp cho ô nhiễm phân E coli thuộc họ vi
khuẩn Enterobacteriaceae và thường được sử dụng làm sinh vật mô hình cho các nghiên cứu về vi khuẩn.
Trang 15Thử nghiệm catalase(cơ sở sinh hóa)
có enzyme catalase, có khả năng phân giải
Trang 17Các đĩa petri nuôi cấy vi sinh vật phải được lật úp trước khi nuôi ủ để tránh các khuẩn lạc ở bề mặt mọc loang.
Trong quá trình đếm khuẩn lạc, không được
mở hộp petri.
Que trải thủy tinh dùng để trải dung dịch vi sinh vật được khử trùng bằng cách nhúng vào cồn 96 o rồi đốt, không được hơ trực tiếp trên ngọn lửa đèn cồn.
Trang 18Nấm mốc là vi nấm dạng sợi, sinh sản bằng bào tử hoặc khuẩn ty
Nấm men là những tế bào đơn tính phát triển theo kiểu nảy chồi, thỉnh thoảng có thể tồn tại ở dạng khuẩn ty giả trong
đó các tế bào kết nhau thành chuỗi.
Đơn vị hình thành khuẩn lạc của nấm mốc và nấm men
là mầm để tạo nên một khuẩn lạc khi nuôi cấy trong môi trường Mầm có thể là một bào tử, một tế bào hay một đoạn của khuẩn ty.
B Nấm men, nấm mốc
B Nấm men, nấm mốc
Trang 192.1 Dụng cụ
2.1 Dụng cụ
Ống nghiệm(16 mm) Tủ cấy vô trùng
Cốc thủy tinh(100ml, 250ml) Tủ ấm
Bình tam giác (250 ml) Máy dập mẫu( Stomacher) Ống đong (100 ml) Máy trộn mẫu (Vortex mixer) Đầu tip Pipetman (1000, 5000 μl)l) Cân phân tích
Đèn cồn Pipetman (1000, 5000 μl)l)
Lò viba
Trang 20Môi trường Hoá chất
Saline Pepton Water
(SPW)
Cồn 90 0 và 70 0
2.2 Môi trường và hóa chất
2.2 Môi trường và hóa chất
Trang 21Định lượng mẫu10 g hoặc 10 ml Định lượng mẫu10 g hoặc 10 ml
Đồng nhất và pha loãng mẫu trong dung dich SPW Trải 0.1 ml dung dịch mẫu lên môi trường DRBC
Ủmẫu (30 1 ) 0 C trong 3 – 7 ngày Ủmẫu (30 1 ) 0 C trong 3 – 7 ngày Đếm khuẩn lạc chọn đĩa có 25 – 250 khuẩn lạc
2.3 Quy trình phân tích
2.3 Quy trình phân tích
Trang 22Cấy trên đĩa môi trường thạch bằng que trải
Trang 23VÍ DỤ: Saccharomyces cerevisiae là một loài nấm men
Loài này có thể xem là loài nấm hữu dụng nhất trong đời sống con người từ hàng ngàn năm trước đến nay.
Nó được dùng rộng rãi trong quá trình lên men làm bánh mỳ, rượu, bia.
Trang 24Saccharomyces cerevisiae
Trang 25Cơ sở sinh hóa
Quan sát nấm men: Tế bào nấm men
S.cerevisiae có hình cầu hay ôvan, có một
số đang ở giai đoạn nảy chồi.
Trong đó cách đo thể tích CO2 được hình thành là đơn giản hơn cả.
Phản ứng với Ba(OH)2
Nếu có mặt của CO2 sẽ tạo thành kết tủa màu trắng do sự tạo thành BaCO3 theo phản ứng :
CO2 + Ba(OH)2 BaCO3↓ + H2O
Trang 28 Trong những năm vi sinh học phát triển một loài sinh độc tố nhưng có ít trong đó
có loại nấm mốc Peniccilium roqueforti
để sản xuất phomat xanh.
Giới thiệu chung Peniccilium roqueforti
Giới thiệu chung Peniccilium roqueforti
Trang 29 Bào tử của nấm mốc Penicilium roqueforti : hình cầu gần như hình tròn nhẵn không có màng tế bào Bào tử có các cuống mọc dày đặc, mượt, màu xanh xanh, Sau đó trở nên tốt hơn Dịch tiết ra từ loài này như giọt pha lê Sau đó màu môi trường thay đổi màu sắc từ màu xanh sang màu xanh đậm.
Cơ sở sinh hóa
Trang 30Hình thái quan sát Penicilium roqueforti
Trang 31Trang 32
Câu 1 Nhiệt độ của thạch đổ là bao nhiêu?
a) Khoảng 45 0 C
b) Khoảng 30 0 C
c) Tùy ý
Câu 2 Nguyên nhân đồng nhất và pha loãng mẫu?
d) Do vsv phân bố không đều và do để mật độ tb
thích hợp dễ quan sát
e) Do vsv phân bố không đều và do tiết kiệm mẫu.
f) Cả 2 câu trên đều đúng.
CÂU HỎI TRẮC NGHIỆM VUI
Trang 33Câu 3 Điểm cần lưu ý khi ủ mẫu ở vi
khuẩn hiếu khí và NM-MO?
a) Vi khuẩn hiếu khí lật ngược còn ở
nâm men- nấm mốc không lật ngược.
b) Vi khuẩn hiếu khí không lật ngược còn
ở nâm men – nấm mốc lật ngược.
c) Cả hai câu trên đều sai.
Trang 34CÂU 1 Tại sao đa số các vi khuẩn không mọc được trong môi trường nuôi cấy DRBC?
VÌ: Môi trường chọn lọc nấm men- nấm mốc ức chế sự tăng trưởng của vi khuẩn do trong thành phần chứa
VK không mọc được.
Trang 35Câu 2 Vì sao trong thí nghiệm vi khuẩn hiếu khí ủ mẫu phải lật ngược?
Không để hơi nước đọng trên nắp rơi
xuống làm nhiễm trong quá trình ủ.
nắp rơi làm hoại nhiễm mẫu.
Câu 3 Ngoài môi trường DRBC còn có môi
trường nào khác nuôi tổng số nấm men, nấm mốc?
Czapek-Dox, PGA
Trang 36 Câu 4: Tại sao cồn 70 0 sát khuẩn hơn cồn 96 0 nhưng lại
do khó bay hơi hơn cồn 96 0 , khi sát trùng bằng cồn 70 0
rồi đốt bằng ngọn lủa đèn cồn thì có khi cồn 70 0 vẫn
chưa bay hơi hết, khi cho vsv vào có thể làm chết vsv đó Ngược lại cồn 96 0 thì vừa có tính sát khuẩn lại dễ bay
hơi, khi đốt bằng ngọn lửa đèn cồn thì sẽ bay hơi nhanh
và dễ dàng hơn, khi cho vsv vào thì lúc này không còn cồn 96 0 nữa, nên vsv có thể tồn tại, sinh trưởng và phát triển được Dùng cồn 96 0 để sát trùng dụng cụ ở giai
đoạn que trải.
Trang 37CẢM ƠN CÔ VÀ CÁC BẠN
ĐÃ CHÚ Ý LẮNG NGHE
