Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN VÀ XÃ HỘI BỘ MÔN SINH HỌC ĐỀ TÀI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG CÁC GIỐNG CHÈ TR
Trang 1Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN
KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN VÀ XÃ HỘI
BỘ MÔN SINH HỌC
ĐỀ TÀI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC
NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG CÁC GIỐNG CHÈ TRỒNG Ở THÁI NGUYÊN BẰNG KỸ THUẬT
SINH HỌC PHÂN TỬ
Giáo viên hướng dẫn: ThS Hoàng Thị Thu Yến Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thị Thu Phương
Thái Nguyên 2008
Trang 2Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Më ®Çu
Tæng quan tµi liÖu
§èi tîng vµ ph¬ng ph¸p nghiªn cøu
KÕt qu¶ nghiªn cøu vµ th¶o luËn
KÕt luËn vµ kiÕn nghÞ
Néi dung b¸o c¸o
Trang 3Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Më §ÇU
Cây chè Việt Nam đã đóng góp một phần không nhỏ vào sự phát triển đất nước theo hướng công nghiệp hóa - hiện đại hóa
Cây chè còn góp phần giữ gìn bản sắc văn hoá dân tộc Uống chè đã trở thành loại hình nghệ thuật trong nghệ thuật ẩm thực Việt Nam
Chè là một dược liệu quý trong dân gian chè chữa một số bệnh đường ruột, lợi tiểu, bệnh tim, béo phì, ung thư…và nhiều loại vitamin và axitamin cần thiết cho cơ thể
Trang 4Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Việc tìm ra những biện pháp đẩy mạnh năng suất và nâng cao năng lực cạnh tranh là vấn đề cần thiết với người trồng chè, cần có nhiều nghiên cứu sâu rộng về cây trồng này
Sinh học phân tử là một công cụ hỗ trợ chính xác trong việc phân tích di truyền để chọn giống
Hiện nay, việc đánh giá hệ gen cây chè vẫn còn
là vấn đề khá mới mẻ Để làm rõ hơn vấn đề này chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài: “Nghiên cứu đa dạng các giống chè trồng ở Thái Nguyên bằng kỹ thuật sinh học phân tử ”
Trang 5Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Nội dung nghiên cứu đề tài bao gồm
Thu mẫu lá chè
Tách chiết DNA tổng số
Đo quang phổ DNA
Nghiên cứu tính đa hình của genome chè bằng
kỹ thuật RAPD
Phân tích sản phẩm RAPD bằng phần mềm sinh học phân tử
Trang 6Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
1 Khái quát về cây chè
1.1 Nguồn gốc của cây chè
Vân Nam-Trung Quốc
Vùng Atxam thuộc Ấn Độ
Việt Nam
Tæng quan tµi liÖu
Trang 7Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
1.2 Sự phân loại cây chè
Trang 8Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
1.1.2 Đặc điểm sinh học của cây chè
Trang 9Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Lá chè là loại lá đơn, nguyên, có hệ gân lá rất rõ, có nhiều hình dạng khác nhau: thuôn, mũi mác, ô van,
trứng gà và gần tròn
Quả chè thuộc loại quả nang, có từ 1- 4 hạt; hình
tròn, tam giác, vuông
bình là 1,0 - 1,6g, hình cầu, tam giác, bán cầu
Hoa chè là loại lưỡng tính, có 5 - 9 cánh màu trắng
Trang 10Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
2.2 Các hoá chất và thiết bị
Các hoá chất: ethidium bromid, phenol, Các primer dNTP, Buffer Taq DNApolymerase…
Trang 11Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Các thiết bị Sản xuất
Trang 12Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
2.3 Quy trình nghiên cứu
Tách chiết và thu nhận
genome tổng số
Tiến hành kỹ thuật RAPD
Điện di kiểm tra kết quả
Kiểm tra độ tinh sạch của DNA băng máy quang phổ
Thiết lập mối di truyền giữa
các giống
Nguyên liệu lá chè
Trang 13Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
2.3 Các phương pháp nghiên cứu
Phương pháp tách chiết DNA tổng số
Phương pháp đo quang phổ trên máy quang phổ tự ghi
Phương pháp điện di
Phương pháp RAPD
Phương pháp xử lý số liệu bằng phần mềm NTSYS 2.0
Trang 14Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
3.1 Kết quả tách chiết DNA tổng số
Trang 15Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
3.2 Kiểm tra độ tinh sạch của DNA bằng máy quang phổ
Hình 1: Phổ hấp thụ DNA từ giống Tri 2024
Trang 16
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Hình 2: Phổ hấp thụ DNA từ giống Iakatamidori
Trang 17Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Giống LDP2 PH1 TDLN Iakatamidori Tri777 Tri2024 PT95 KTT
+ Kết quả đo độ tinh sạch DNA
A 260 nm = OD 260nm và A 260nm = OD 280nm ; tính tỉ lệ
Trang 18Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
+ Kết quả nồng độ DNA của các mẫu thu được như sau
Bảng 1: Nồng độ của DNA tách chiết được
Trang 19Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
3.3 Kết quả phân tích đa hình bằng kỹ thuật RAPD
Trang 20Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Trang 21Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Trang 22Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Trang 23Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Bảng 4: Số phân đoạn DNA xuất hiện và số phân
đoạn DNA đa hình đối với mỗi mồi
Mồi Phân đoạn DNA nhân bản Phân đoạn DNA đa hình Tỷ lệ % phân đoạn đa hình
Trang 24Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
3.4 Mối quan hệ di truyền giữa các giống chè trồng ở Thái
Nguyên dựa trên phân tích RAPD
* Kết quả hệ số tương đồng di truyền giữa các giống chè
Bảng 5 Hệ số tương đồng giữa các giống chè
Trang 25Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Sơ đồ phả hệ của 8 giống chè trồng ở Thái Nguyên
Hình 5 Sơ đồ quan hệ di truyền giữa các giống chè
Trang 26Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
Kết luận
1 Đã tách chiết được DNA của 8 giống chè với hàm
lượng DNA khá cao
2 Kết quả nhận được sau khi nghiên cứu tính đa hình
DNA được nhân bản ngẫu nhiên đã chứng tỏ sự sai khác nhau trong cấu trúc hệ gen của các giống chè
3 Khi sử dụng 2 mồi ngẫu nhiên cho thấy cả 2 mồi đều
biểu hiện tính đa hình với tỉ lệ các phân đoạn dao động
từ 14,3% - 90%
4 Hệ số di truyền giữa các giống dao động từ 0,3 – 0,9
Trang 27Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Kiến nghị
1 Số lượng mồi ngẫu nhiên sử dụng trong nghiên cứu đa
hình các giống chè cần có nhiều hơn
2 Cần kết hợp nhiều phương pháp sinh học phân tử
khác: SSR (Simple sequence region), RFLP, xác định trình tự DNA… cùng với kỹ thuật RAPD để có kết quả chính xác trong nghiên cứu đa dạng giống chè
Trang 28Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Xin CHÂN THÀNH CẢM ƠN !