Thiết kế vector chuyển gen biểu hiện kháng nguyên vi rút PRRS trong tế bào thực vật Lê Thị Thanh Trường đại học Khoa học Tự nhiên.. Bùi Mỹ Duyên 2012, Thiết kế vector biểu hiện một số
Trang 1Thiết kế vector chuyển gen biểu hiện kháng nguyên vi rút PRRS trong tế bào thực vật
Lê Thị Thanh
Trường đại học Khoa học Tự nhiên Đại học Quốc gia Hà Nội
Luận văn Thạc sĩ ngành: Sinh học thực nghiệm; Mã số: 60 42 01 14
Người hướng dẫn: TS Nguyễn Tường Vân, PGS.TS Võ Thị Thương Lan
Năm bảo vệ: 2013
Abstract Thiết kế thành công các đoạn gen ltb-gp5m, ltb-gp5, ltb-gp3 Đồng thời
các đoạn gen này đã được dòng hóa thành công vào vector tách dòng pBT/T và lưu trữ trong tế bào vi khuẩn E coli DH 5α Thiết kế thành công các vector chuyển gen pCB-GW-35S-ltb-gp5m, pCB-GW-35S-ltb-gp5, pCB-GW-35S-ltb-gp3 bằng kỹ thuật Gateway qua hai phản ứng BP và LR Tạo được các chủng Agrobacterium tumefaciens mang các vector chuyển gen trên Đã chuyển thành công các gen ltb-gp5m, ltb-gp5, ltb-gp3 vào tế bào thuốc lá siêu sinh trưởng BY-2 thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens Sàng lọc được dòng BY-2 mang gen ltb-gp5 biểu hiện
ra sản phẩm protein
Keywords Tế bào thực vật; Vi rút PRRS; Sinh học thực nghiệm; Thiết kế Vector;
Gen
Content
Trang 2TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt
1 Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn (2007), Báo cáo kết quả thực hiện kế
hoạch 12 tháng năm 2009, Báo cáo thống kê tháng 12 năm 2007
2 Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn (2008), Báo cáo kết quả thực hiện kế
hoạch 12 tháng năm 2008, Báo cáo thống kê tháng 12 năm 2008
3 Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn (2009), Báo cáo kết quả thực hiện kế
hoạch 12 tháng năm 2009, Báo cáo thống kê tháng 12 năm 2009
4 Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn (2010), Báo cáo kết quả thực hiện kế
hoạch 12 tháng năm 2010, Báo cáo thống kê tháng 12 năm 2010
5 Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn (2011), Báo cáo kết quả thực hiện kế
hoạch 12 tháng năm 2011, Báo cáo thống kê tháng 12 năm 2011
6 Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn (2012), Báo cáo kết quả thực hiện kế
hoạch 12 tháng năm 2012, Báo cáo thống kê tháng 12 năm 2012
7 Bùi Mỹ Duyên (2012), Thiết kế vector biểu hiện một số kháng nguyên của virus
lợn tai xanh (PRRSV) trong tế bào thuốc lá, Khóa luận tốt nghiệp Cử nhân Sinh
học, Đại học Mở
8 Đậu Ngọc Hào, Văn Đăng Kỳ , Nguyễn Văn Long, Tiêu Quang An (2008), “Mô ̣t số đă ̣c điểm di ̣ch tễ Hô ̣i chứng sinh sản và hô hấp (PRRS) ở lợn từ cuối tháng 3
đến đầu tháng 7/2008 tại một số tỉnh trong cả nước” , Tạp chí Khoa học và Kỹ
thuật Thú y, (5), tr 14-20
9 Lê Thanh Hòa, Lê Thị Kim Xuyến, Đoàn Thị Thanh Hương,Trần Quang Vui, Phạm Công Hoạt, Nguyễn Bá Hiến (2009), “Phân tích gen M mã hoá protein
màng của virus gây bệnh lợn tai xanh”, Tạp chí Khoa học và Phát triển, (7), tr
282 – 290
10 Nguyễn Thị Thanh Huyền, Chuẩn hóa phương pháp chuyển gen vào tế bào
thuốc lá BY-2 nhằm biểu hiện protein HA của vius H5N1, Khóa luận tốt nghiệp
Cử nhân Sinh học, Đại học Mở
Trang 311 Võ Thị Thương Lan (2004), Sinh ho ̣c phân tử , Nhà xuất bản Đại học Quốc gia
Hà Nội
12 Trần Thị Lệ, Nguyễn Hoàng Lộc, Trần Quốc Dung (2006), Giáo trình Công
nghệ gen trong nông nghiệp, Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Huế
13 Lê Quỳnh Liên , Phan Tro ̣ng Hoàng , Đỗ Xuân Đồng , Chu Hoàng Hà , Lê Trần Bình (2008), “Biểu hiện kháng nguyên glycoprotein của virus dại trên cây thuốc
lá chuyển gen”, Tạp chí CNSH, (6), tr 445-452
14 Đinh Đoàn Long , Đỗ Lê Thăng (2009), Cơ sở di truyền học phân tử và tế bào ,
Nhà xuất bản Đại học Quốc gia Hà Nội
15 Phan Tuấn Nghĩa (2012), Giáo trình Hóa sinh học thực nghiệm, Nhà xuất bản
Giáo dục Việt nam
16 Trịnh Thị Trang Nhung (2010), Biểu hiện và tinh sạch peptide kháng khuẩn
Cecropin, Khóa luận tốt nghiệp Cử nhân Sinh học, Trường Đại học Khoa học
Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội
17 Nguyễn Văn Uyển, Lê Tấn Đức, Nguyễn Hữu Hổ (2007), “Công nghệ gen thực vật”, Hội nghị Khoa học và công nghệ 2007,5, tr 345-411
18 Nguyễn Tường Vân (2011), “Nghiên cứu biểu hiện gen mã hóa protein vỏ Glycoprotein (GP5) của virus gây bệnh lợn tai xanh trong thuốc lá và đậu tương”, Thuyết minh nhiệm vụ hợp tác quốc tế về KH&CN theo Nghị định thư,
tr 1-25
Tài liệu tiếng Anh
19 Ansari, I.H., Kwon, B., Osorio, F.A., Pattnaik, A.K (2006), “Influence of N-linked glycosylation of porcine reproductive and respiratory syndrome virus GP5 on virus infectivity, antigenicity, and ability to induce neutralizing
antibodies”, J Virol, (80), pp 3994–4004
20 Arakawa T, Chong DK, Merritt JL and Langridge WH (1997),
“Expression of cholera toxin B subunit oligomers in transgenic potato
plants”, Transgenic Research, (6), pp 403-413
Trang 421 Arntzen C, Plotkin S, Dodet B (2008), “Plant-derived vaccines and antibodies:
potential and limitations”, Vaccine, (23), pp 1753–1756
22 Aziz MA, Singh S, Kumar PA and Bhatnagar R (2002), “Expression of protective antigen in transgenic plants: a step towards edible vaccine
against anthrax”, Biochemical and Biophysical Research Communications,
(299), pp 345-351
23 Chia MY, Hsiao SH, Chan HT, Do YY, Huang PL, Chang HW, Tsai YC, Lin
CM, Pang VF, Jeng CR (2010), “Immunogenicity of recombinant GP5 protein
of porcine reproductive and respiratory syndrome virus expressed in tobacco
plant”, Vet Immunol Immunopathol, 135, pp 234-242
24 Dalsgaard K, Uttenthal A Jones TD, Xu F Merryweather A, Hamilton WDO, Langcveld JPM, Boshuizen RS, Karnstrup S Lomonossoff GP, Porta C, Vela
C, Casa] JI, Meloen RH, Rodgers PB (1997), “Plant-derived vaccine protects
target animals against a viral disease”, Nat Biotechnol, 15, pp 248-252
25 Daniell H, Streatfield SJ, Wycoff K (2001), “Medical molecular farming: production of antibodies, biopharmaceuticals and edible vaccines in plants”,
Trends Plant Sci, 6, pp 219-226
26 Diaz I, Darwich L, Pappaterra G, Pujols J, Mateu E (2006), “Different European-type vaccines against porcine reproductive and respiratory syndrome virus have different immunological properties and confer different protection to
pigs”, Virology, 351, pp 249–259
27 Dus Santos MI, Wigdorovitz A, Trono K, Rios RD, Franzone PM, Gil F, Moreno J, Carrillo C, Escnihano IM, Borca MV (2002), “A novel methodology
to develop a toot and mouth disease virus (FMDV) peptide-based vaccine in
transgenic plants”, Vaccine, 20, pp 1141-1147
28 Feng Y, Zhao T, Tung Nguyen, Inui K, Ma Y, Nguyen Thi Hoa, Nguyen Van Cam , Liu D , Bui Quang Anh, To Long Thanh , Wang C, Tian K, and Gao GF (2008), “Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome Virus Variants,
Vietnam and China in 2007”, Emerging Infectious Diseases, 14, pp 1774-1776
Trang 529 Hou YH, Chen J, Tong GZ, Tian ZJ, Zhou YJ, Li GX, Li X, Peng JM, An TQ, Yang HC (2008), “A recombinant plasmid co-expressing swine ubiquitin and the GP5 encoding-gene of porcine reproductive and respiratory syndrome virus
induces protective immunity in piglets”, Vaccine, 26, pp 1438–1449
30 Invitrogen (2010), Gateway® Technology, Version E, Catalog nos 12535-019
and 12535-027
31 Jani D, Meena LS, Rizwan UHQM, Singh Y, Sharma AK and Tyagi AK (2002), “Expression of cholera toxin B subunit in transgenic tomato plants”,
Transgenic Res, 1, pp 447-454
32 Jiang W, Jiang P, Li Y, Tang J, Wang X, Ma S (2006a), “Recombinant adenovirus expressing GP5 and M fusion proteins of porcine reproductive and respiratory syndrome virus induce both humoral and cell-mediated immune
responses in mice”, Vet Immunol, 113, pp 169–180
33 Jiang W, Jiang P, Wang X, Li Y, Wang X, Du Y (2007), “Influence of porcine reproductive and respiratory syndrome virus GP5 glycoprotein N-linked
glycans on immune responses in mice”, Virus Genes, 35, pp 663–671
34 Jiang Y, Xiao S, Fang L, Yu X, Song Y, Niu C, Chen H (2006b), “DNA vaccines co-expressing GP5 and M proteins of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) display enhanced immunogenicity”,
Vaccine, 24, pp 2869–2879
35 Kim TG, Gruber A and Langridge WHR (2004), “HIV-1 gp 120 V3 cholera
toxin B subunit fusion gene expression in transgenic potato”, Protein
Expression and Purification, 37, pp 196-202
36 Lamphear BJ, Jilka JM, Kest L, Welter M, Howard JA, Streatfield Si (2004),
“A corn-based delivery system or animal vaccines: an oral transmissible
gastroenteritis virus vaccine boosts lactogenic immunity in swine”, Virology,
22, pp 2420-2424
37 Lauterslager TGM, Florack DEA, Wal TJV, Molthoff JW, Langeveld JPM, Bosch D, Boersma WJA and Hilgers LAT (2001), “Oral immunisation of
Trang 6naive and primed animals with transgenic potato tubers expressing LTB”,
Vaccine, 19, pp 2749-2755
38 Mason HS, Warzecha H, Mor T and Arntzen CJ (2002), “Edible plant vaccines: application for prophylactic and therapeutic molecular medicine”,
Trends in Molecular Medicine, 8, pp 324-329
39 Ostrowski M, Galeota JA, Jar AM, Platt KB, Osorio FA, Lopez OJ (2002),
“Identification of neutralizing and nonneutralizing epitopes in the porcine
reproductive and respiratory syndrome virus GP5 ectodomain”, J Virol, 76, pp
4241–4250
40 Palmer K E, Schnippenkoetter WH, Rybicki EP (1998), “Geminivirus isolation
and DNA extraction” In Plant Virology Protocols: From Virus Isolation to
Transgenic Resistance, pp 41-52 Edited by G Foster & S Taylor Totowa,
NJ:Humana Press
41 Perlak FJ, Fuchs RL, Dean DA, McPherson SL and Fishhoff DA (1991),
“Modification of the coding sequence enhances plant expression of insect
control protein genes”, Proc Natl Acad Sci USA, 88, pp 3324-3328
42 Plagemann PG (2004), “GP5 ectodomain epitope of porcine reproductive and
respiratory syndrome virus, strain Lelystad virus”, Virus Res, 102, pp 225–230
43 Rebay Lab (2013), Transformation of Bacteria via Electroporation Protocol
44 Sambrook J., Russell D.W (2001), Molecular Cloning, Third Edition, Volume
1, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York
45 Sambrook J., Russell D.W (2001), Molecular Cloning, Third Edition, Volume
2, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York
46 Sambrook J., Russell D.W (2001), Molecular Cloning, Third Edition, Volume
3, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York
47 Streatfield SJ and JA Howard (2003), “Plant-based vaccines”, Int J Parasitol,
33, pp 479-493
48 Thermo sciencetific (2006), CloneJET TM PCR Cloning Kit procedure
Trang 749 Thermo sciencetific (2008-2009), Molecular Biology Catalog and Product
Application guide
50 Thermo Scientific (2006), GeneJET Gel Extraction Kit Procedure
51 Thermo Scientific (2006), GeneJE TTM PCR Purification Kit Procedure
52 Thermo Scientific (2006), GeneJET™ RNA Purification Kit Procedure
53 Thermo Scientific (2006), RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit
Procedure
54 Wasin Charerntantanakul (2012), “Porcine reproductive and respiratory
syndrome virus vaccines: Immunogenicity, efficacy and safety aspects”,
Virology, 1(1): 23-30
55 Zheng Q, Chen D, Li P, Bi Z, Cao R, Zhou B, Chen P (2007), “Co-expressing GP5 and M proteins under different promoters in recombinant modified vaccinia virus ankara (rMVA)-based vaccine vector enhanced the humoral and cellular immune responses of porcine reproductive and respiratory syndrome
virus (PRRSV)”, Virus Genes, 35, pp 585–595
Trang web
56 http://www.bio.davidson.edu/Courses/Molbio/molStudents/spring2003/McCord /electroporation.htm
57 www.bio.utk.edu/cellbiol/prot/by2-medium.pdf
58
http://www.protocol-online.org/prot/Molecular_Biology/DNA/DNA_Extraction_Purification/DNA_ Extraction_from_Plants/
59 http://www.prrs.org/Elimination/93/RegionalElimination.aspx#.Ui2T639EnqE
60 http://www.prrssymposium.org/default.aspx
61 http://www.respig.com/diseases/prrs.asp
62 http://www.thepigsite.com/diseaseinfo/97/porcine-reproductive-respiratory-syndrome-prrs