ESTIMATION OF MOST PROBABLE NUMBER OF SALMONELLA IN MINCED PORK SAMPLES PHÂN TÍCH VI SINH THỰC PHẨM Đề tài: Kết quả số xác suất lớn nhất của vi khuẩn Salmonella trong các mẫu thịt lợn
Trang 1ESTIMATION OF MOST PROBABLE
NUMBER OF SALMONELLA IN MINCED
PORK SAMPLES
PHÂN TÍCH VI SINH THỰC PHẨM
Đề tài:
Kết quả số xác suất lớn nhất của vi khuẩn Salmonella trong các mẫu
thịt lợn băm nhỏ
Trang 2 Võ Nguyễn Minh Hoang (nhóm trưởng)
Trang 3Nguồn gốc: Brazil (Tạp chí Vi sinh vật học (2007))
Tác giả: 1) Luciane Martins Borowsky
2)Verônica Schmidt
3)Marisa Cardoso
NGUỒN GỐC CỦA BÀI BÁO
Trang 4 TÓM TẮC NỘI DUNG BÀI BÁO
Salmonella sp là một trong những nguồn gây ô
nhiễm trong thực phẩm và cũng là nguyên nhân gây bệnh do thực phẩm ảnh hưởng đến sức khỏe của người tiêu dùng ở nhiều nước, và bài báo này
đã nghiên cứu về cách định lượng salmonellae trong mẫu thịt lợn băm nhỏ được sử dụng để sản xuất xúc xích tươi trong lò mổ ở miền Nam Brazil bằng phương pháp định lượng gián tiếp MPN
Trang 5Salmonella
Là một giống vi khuẩn hình que, gram (-), không tạo bào tử, di động, sinh sống trong đường ruột, có đường kính khoảng 0,7
µm đến 1,5 µm, dài từ
2 µm đến 5 µm và có vành lông rung hình roi hơn 2,500 loại khác nhau
Tác hại của Salmonella
viêm dạ dày-ruột (buồn nôn và tiêu chảy)
Bệnh sốt thương hàn
(xảy ra khi một số sinh
vật salmonella không
bị tiêu diệt bởi hệ miễn dịch bình thường của cơ thể)
Trang 8 PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH
LƯỢNG SAMONELLA
Mẫu phân tích : xúc xích thịt lợn
chưa được xử lý thu được ở Parto
Alegre (Brazil)
Định lượng: 25g
Đăc tính của mẫu: phải chứa vi sinh vật samonella
âm (-) tính.
Chuẩn vi sinh vật: salmonella typhimurium ATCC14028
hoặc cả 2 chuẩn loại của S.Typhimurium (ST1 và ST2)
Phương pháp : định lượng gián tiếp bằng pp MPN
Trang 9
I) Định tính và định lượng Salmonella trong
thịt lợn băm Phương
pháp A Phương pháp B
Rữa mẫu bằng: 225ml nước peptone đệm (BPW)
50ml 5ml 0.5ml
25g mẫu (101 102 103
cfu/g)
10-1ml 10-2ml 10-3ml
Bước 1
TĂNG
SINH
Trang 1050ml 5ml 0.5ml
10-1ml 10-2ml 10-3ml
Nhiệt độ t=37 độ C, Thời gian : 18h
Bước 1
TĂNG
SINH
Trang 11Nhiệt độ t=37 độ C, Thời gian : 18h
Hút 1ml canh khuẩn BPW sang RV (theo tỷ lệ 1:9)
Ủ 42 độ, 18-24g
Phân lập khuẩn lạc đơn ít nhất 2 môi trường
chọn lọc phân biệt XLT4, HE.
Các khuẩn lạc đặc trưng cấy sang canh BHI
hoặc thạch TSA, ủ 24g, 37 độ
Thử nghiệm sinh hóa cho kết quả:
- KIA/TSI: đỏ/vàng, có /không H2S, sinh/không hơi
- Urea (-), indol (+) VP(-)
- LDC (+), ONPG (-)
- Thử nghiệm ngưng kết kháng nguyên huyết thanh:
- Salmonella dương tích/ âm tính trên 25g thực
phẩm
Bước 2
TĂNG
SINH
CHỌN
LỌC
Bước 3
PHÂN
LẬP
Bước 4
KHẲNG
ĐỊNH
Trang 13Sử dụng một khuẩn lạc thuần khiết không tự ngưng kết tiến hành như trong phương pháp kiểm tra sự tự kết dính ở trên, bằng cách thay một giọt kháng huyết thanh O thay cho dung dịch nước muối Nếu xuất hiện dính kết, phản ứng được coi dương tính Sử dụng tuần tự một kháng huyết thanh đa giá và đơn giá
Kiểm tra kháng nguyên O
Trang 14Mẫu Salmonella (+) tiến hành định lượng bằng phương pháp MPN (số có khả năng cao nhất) của khuẩn salmonella nhiễm trong mẫu xúc xích thịt lợn sử dụng bản tra MPN
Trang 1530 mẫu (1 mẫu/200g ) thịt heo băm được tập hợp
tại các lò mỏ ở miền Nam Brazin
25g định lượng
salmonella theo 2 pp A
và B như trên.
Phần còn lại giữ ở
nhiệt độ -18 độ C
28 mẫu định lượng thành
công 20 mẫu ( có số
lượng salmonella trong
khoảng <3 đến 240 cfu/g)
Làm căn tế bào và làm giảm số lượng tế bào sống đến mức không phát hiện được không phát hiện được salmonella trong mẫu
Trang 16Số lượng mẫu MPN salmonella (cfu.g-1)
Phươngpháp A Phươngpháp B
Bảng 1 Số có thể xảy ra nhất của sal sp Xác định bằng
phương pháp A và B trong các mẫu thịt lợn băm nhỏ (n = 20) được thu thập trong các lò mổ ở miền Nam Brazil.
Trang 17 KẾT QUẢ BÀI NGHIÊN CỨU
Số lượng salmonella được tìm thấy trong mẫu
thịt băm ở bài nghiên cứu này phù hợp với kết
quả của báo cáo trước đây
Dịch salmonella liên quan đến thịt lợn ở miền Nam Brazil thấp được giải thích bởi số salmonella có trong mẫu thịt lợn băm của bài báo cáo này thấp Mặt khác, dịch salmonella bùng phát là do sự nhiễm bẩn chéo và gián tiếp qua các dụng cụ và cá thiết bị chế biến
Bài nghiên cứu đánh giá mức độ ô nhiễm của salmonella trong xúc xích làm từ thịt lợn băm và trong các mẫu thực phẩm liên quan đến dịch salmonella ở miền Nam Brazil, đóng góp thêm vào công trinh nghiên cứu về sự nguy hiểm của salmonella trong thịt lợn có thể gây ra cho người tiêu dùng trong khu vực
Trang 18 KẾT LUẬN
Qua bài nghiên cứu này giúp cho ta phân tích định tính và định lượng Salmonella, từ đó
có thể tránh được rủi ro của sự hiện diện của Salmonella trong thực phẩm để đảm bảo chất lượng về sinh an toàn của sản phẩm và bảo vệ sức khỏe cho người tiêu dùng