nuôi cấy aspergillus oryzae thu nhận lactase - ứng dụng

nuôi cấy aspergillus oryzae thu nhận lactase - ứng dụng

NỘI DUNG

2

2 Giới thiệu về Aspergillus Oryzae

3 Nuôi cấy A.oryzae – thu nhận Lactase

4 Ứng dụng của Lactase

1 Lactose và enzyme Lactase

ENZYME LACTASE

 – galactosidase (còn gọi là Lactase) là enzyme thủy phân đường

lactose tạo thành đường glucose và

đường galactose.

4

Lacta se

5

ENZYME LACTASE

Kluyveromyces lactis Aspergillus niger Lactobacillus acidophilus

NỘI DUNG

7

2 Giới thiệu về Aspergillus Oryzae

3 Nuôi cấy A.oryzae – thu nhận Lactase

4 Ứng dụng của Lactase

1 Lactose và enzyme Lactase

NỘI DUNG

A oryzae tiết ra môi trường các enzyme

thủy phân như pectinase, xylanase, cellulase,

 – galactosidase,…khi sống trên môi trường

có nguồn cơ chất tương ứng: pectin, xylan,

cellulose, lactose,

A oryzae được ứng dụng rộng rãi trong:

 Trong công nghệ sản xuất thực phẩm:

nước tương, miso, rượu sake.

 Trong công nghệ sản xuất enzyme:

cellulase, amylase, protease,

hemicellulase và  – galactosidase.

Các loại thực phẩm

16

Các loại enzyme sản xuất từ A.oryzae

Năm 2001, bộ gene di truyền của A oryzae

đã được phân tích và giải mã

Hệ gene gồm 8 nhiễm sắc thể với 12 ngàn gene và 37 triệu cặp base

(Galagan et al., 2005, Machida et al., 2005)

NỘI DUNG

19

2 Giới thiệu về Aspergillus Oryzae

3 Nuôi cấy A.oryzae – thu nhận Lactase

4 Ứng dụng của Lactase

1 Lactose và enzyme Lactase

NỘI DUNG

SẢN XUẤT CHẾ PHẨM ENZYME

20

Phương pháp nghiên cứu

21

Chủng A oryzae 3 được lựa chọn nghiên cứu

thu nhận enzyme nội bào

Chủng A oryzae 3 được lựa chọn nghiên cứu

thu nhận enzyme nội bào

PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY CHÌM

LỰA CHỌN MÔI TRƯỜNG LÊN MEN

KHẢO SÁT KHẢ NĂNG SINH TỔNG HỢP LACTASE

ẢNH HƯỞNG CỦA NGUỒN CARBON

Ảnh hưởng nguồn Nitơ

Thời gian

(giờ) Nguồn

Hoạt độ β – galactosidase khi nuôi cấy A.oryzae 3 trên môi trường có nguồn nitơ khác nhau

NH4NO3 103.33 304.66 490.68 692.08 969.254g peptone + 2g

NH4NO3 90.62 176.24 390.42 683.93 828.38

Chọn nguồn và nồng độ Nitơ: 1g peptone + 0,5g NH4NO3

Chọn nguồn và nồng độ Nitơ: 1g peptone + 0,5g NH4NO3

8.0 140.57 267.58 475.44 653.01 723.73

ĐỘNG THÁI QUÁ TRÌNH LÊN MEN

Động thái quá trình lên men

PHƯƠNG PHÁP LÊN MEN BỀ MẶT

Solid-state fermentation(SSF)

37

Lên men bề mặt

bình thuỷ tinh borosil 3000 ml

 Làm ẩm với nước cất vô trùng chứa

[ Lactose 12% w/w - NaNO3 1% w/w ]

[ pH đầu 5.0 ]

 Tiệt trùng môi trường

 cấy chuyền 10ml huyền phù

chứa bào tử nấm sợi

 Định lượng hoạt độ bằng oNPG

(Sigma Chemical USA)

1 đơn vị hoạt độ = lượng enzyme giải phóng

1 mmol oNPG / 1 phút, điều kiện thí nghiệm

với Phương pháp Lowry

40

SO SÁNH CÁC NGUỒN CARBON

ẢNH HƯỞNG NGUỒN NITƠ ẢNH HƯỞNG NGUỒN CARBON

ẢNH HƯỞNG CỦA ĐỘ ẨM

42

Độ pH

Tối ưu hóa điều kiện

Thảo luận

 enzyme cố định và tự do

enzyme của vi sinh vật

không giống với điều kiện hoạt động tối ưu của

enzyme

44

SO SÁNH 2 PHƯƠNG PHÁP LÊN MEN

45

YẾU TỐ LÊN MEN CHÌM LÊN MEN BỀ MẶT

Giống VSV Phân lập từ đất nhiễm

chất thải của nhà máy sữa

PTN Hóa sinh- ĐH Bách Khoa Hà Nội

Nguyên liệu- Cơ chất MT lactose cơ bản Cám mì+Trấu

Độ ẩm 90%

Nguồn C Lactose Glucose

Nguồn N Peptone + NH4NO3 NaNO3

Thu enzyme

46

Lên men chìm

SẢN XUẤT ENZYME TINH KHIẾT

47

SẢN XUẤT ENZYME

48

Enzymes từ nấm sợi

 Do đó, ứng dụng của lactase từ nấm sợi giới hạn

ở các sản phẩm có độ acid cao cũng như các dược phẩm.

49

Hướng ứng dụng Lactase

50

NỘI DUNG

51

2 Giới thiệu về Aspergillus Oryzae

3 Nuôi cấy A.oryzae – thu nhận Lactase

4 Ứng dụng của Lactase

1 Lactose và enzyme Lactase

NỘI DUNG

 Enzyme thương mại chủ yếu chiết xuất từ

K marxianus, Candida kefyr

quy mô lớn với cả 2 dạng cố định và tự do.

52

ỨNG DỤNG LACTASE

53

qua đêm trong tủ lạnh: giảm 70% lượng lactose

mạnh nghên cứu và sản xuất

Tác dụng của GOS

55

mềm và xốp phòng chống táo bón

Whey - casein

56

Tại sao sữa cần cả đạm Whey và Casein??

57

Whey - casein

Ứng dụng trong sữa nghèo lactose

 Hàm lượng lactose có trong các loại sữa

58

Ứng dụng trong sữa nghèo lactose

Thiếu lactase tương đối

Tổn thương ruột non

 Dị ứng sữa bò

60

Ứng dụng trong sữa nghèo lactose

Xét nghiệm chẩn đoán

61

Giải pháp

62

Ứng dụng trong sữa nghèo lactose

 Sữa đậu nành có lượng

protein cao gần bằng sữa bò,

nhưng ít canxi hơn sữa bò

 Sữa đậu nành không có

lactose.

 Sữa gạo không có gluten

 Lượng asen trong sữa gạo

 khuyến cáo không nên cho trẻ dưới 4,5 tuổi uống sữa gạo 63

Lactose free milk

64

  – galactosidase mở ra nhiều hướng nghiên cứu mới.

lĩnh vực khác nhau: công nghệ thực phẩm – y học

chế biến sữa và whey

Việc sử dụng β-galactosidase cố định trong thủy

phân lactose là một chủ đề khoa học và công nghệ đáng quan tâm

65

Kết luận

CÁM ƠN SỰ LẮNG NGHE CỦA CÔ

VÀ CÁC BẠN