BÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨM

BÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨMBÁO CÁO THỰC TẬP: PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨM

Trang 3

PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH

1 GIỚI THIỆU TRẠM CHẨN ĐOÁN, XÉT

Trang 4

NGHIỆM VÀ ĐIỀU TRỊ

Trang 5

NGHIỆM VÀ ĐIỀU TRỊ

CHỈ TIÊU PHÂN TÍCH

Chất lượng thuốc thú y

Kháng sinh

VitaminĐộc tố vi nấm

Hóa chất cấm

Kháng viêm

Trang 6

2 CƠ SỞ LÝ THUYẾT

TỔNG QUAN VỀ KHÁNG SINH 2.1.

CƠ SỞ LÝ THUYẾT CỦA PHƯƠNG PHÁP HPLC 2.2.

THIẾT BỊ TRONG HPLC 2.3.

Trang 7

2.1 TỔNG QUAN VỀ KHÁNG SINH

Trang 8

Trang 9

 Phân loại:

1 β- Lactam các Penicilin Peniciline, Methiciline, Ampiciline,

2 β- Lactam các Cephalosporin Cefadroxil, Cephalexin, Cefaclor, Cefixime, Ceftriaxone,…

3 Macrolid Erythromycin, Rovamycin, Spiramycin, Azithromycin,…

4 Tetracyclin Tetracyclin, Oxytetracyclin, Doxycyclin, Chlotetracyclin,…

5 Quinolones Norfloxacin, Acid Nalidixic, Lomefloxacin, Ciprofloxacin,

6 Aminosid Amikacin, Tobramycin, Neomycin, Gentamycin,…

7 5 – Nitro - Imidazol Clotrimazole, Metronidazole, Tinidazole, Secnidazole,…

8 Lincosamid Lincomycin, Clindamycin

9 Sulfamid Sulfachlorpiridazine, Sulfadiazine, Sulfadimethoxine,

Trang 10

Tiếp xúc môi trường có chứa kháng sinh Lỗi kỹ thuật khi sử dụng kháng sinh thường xuyên

Ức chế, tiêu diệt vi sinh vật để bảo quản thực phẩm

Bảo quản thực phẩm khi di chuyển đi xa

- Tạo dòng vi khuẩn kháng thuốc.

- Làm tăng nguy cơ lây lan và bùng nổ dịch bệnh.

- Gây ảnh hưởng xấu đến người tiêu dùng.

CẦN PHẢI XÁC ĐỊNH LƯỢNG TỒN DƯ KHÁNG

SINH TRONG THỰC

PHẨM

Trang 11

2.2 CƠ SỞ LÝ THUYẾT CỦA

PHƯƠNG PHÁP HPLC

HPLC là một phương pháp chia tách trong đó pha động là chất lỏng và pha tĩnh chứa trong cột là chất rắn đã được phân chia dưới dạng tiểu phân hoặc một chất lỏng phủ lên một chất mang rắn, hay một chất mang đã được biến bằng liên kết hóa học với các nhóm chức hữu cơ Quá trình sắc ký lỏng dựa trên cơ chế hấp phụ, phân bố, trao đổi ion hay phân loại theo kích

cỡ

Dựa trên ái lực khác nhau giữa các chất với 2 pha luôn tiếp xúc nhưng không trộn lẫn vào nhau: pha tĩnh (trong cột hiệu năng cao) và pha động (dung môi rửa giải) Tùy theo bản chất pha tĩnh, chất tan và dung môi mà quá trình rửa giải tách được các chất khi ra khỏi cột sắc ký

Trang 12

 Phân loại:

1 hấp phụSắc ký

Sắc ký hấp phụ pha

thuận mạnh yếu giữa chất cần Dựa trên sự hấp phụ

phân tích với pha tĩnh và

sự rửa giải của pha động

Không phân cực Phân cực phân cực hoặc không Tách các hợp chất

phân cực có tính chất gần giống nhau

Sắc ký hấp phụ pha

2 phân bốSắc ký

Sắc ký phân bố pha

thường Dựa trên sự phân bố của

chất cần phân tích với pha

tĩnh

Độ phân cực thấp Độ phân cực cao Tách các hợp chất từ không phân cực đến

rất phân cực, hợp chất ion (M<3000)

phosphate, fomate,…

Cột có nhóm trao đổi ion:

Sulfonate, tetraalkylamo nium,…

Phân tích tốt các cation, anion vô cơ, hữu cơ trong nước.

4 Sắc ký rây phân tử Dựa trên kích thước của phân tử. Dung môi hữu cơ, nước,… Silicagel Phân tích polimer, protein.

2.2 CƠ SỞ LÝ THUYẾT CỦA

PHƯƠNG PHÁP HPLC

Trang 13

Trang 14

3 PHÂN TÍCH TỒN DƯ KHÁNG SINH

TRONG THỰC PHẨM

3.1 XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG TETRACYCLIN

3.2 XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG SULFAMID

Trang 15

- Kích ứng niêm mạc dạ dày, buồn nôn, nôn,…

- Xảy ra hiện tượng giảm nhu động, có cảm giác

no lâu, gây nhiễm trùng đường tiêu hóa,…

- Hỏng men răng, xỉn răng, hủy hoại sự phát triển xương ở trẻ em

- Tăng nồng độ ure huyết gây tai biến, hôn mê,…

- Tăng áp lực nội sọ gây tử vong

Tại sao phải xác định dư lượng Tetracyclin?

Trang 16

 Phạm vi áp dụng:

Hiện nay phương pháp này dùng để xác định dư lượng của bốn hợp chất và

các chất biến dị khác: Oxytetracycline

(OTC) và Epi - Oxytetracycline (epi – OTC)

, Tetracycline ( TC) và Epi - Tetracycline

(Epi – TC), Doxycycline và Epi -

Doxycycline (Epi – DTC) , Epi -

Doxycycline (Epi – DTC) Chúng tồn tại

trong thận và cơ của heo, bò

Tetracycline đã chiết được giữ trên pha tĩnh C18 và xác định bằng đầu dò UV tại bước sóng 355 nm Hàm lượng Tetracycline được tính bằng phưong pháp nội suy từ mỗi một đường chuẩn xác định của bốn hợp chất, có tính đến hiệu suất thu hồi

 Nguyên tắc:

Trang 17

- Oxalic acid 0,01M trong methanol

- Citric acid monohydrate

- Dinatri photphat rắn

- Dung dịch Mc.Ilvanine/EDTA

- Dung dịch chuẩn gốc và chuẩn làm việc OTC và CTC; TC và DC; epi-OTC, epi-TC, epi-CTC

Trang 18

 Thiết bị:

chân khôngMáy khuấy điện

Trang 19

 Cách tiến hành:

Trang 20

Trang 21

 Tính toán kết quả:

Lập ra đường chuẩn từ kết quả đo được của dung dịch làm việc Peak tương ứng của Tetracycline và biến dị của nó sẽ được tính toán theo đường chuẩn, được xác định theo phương trình đường thẳng:

Trang 22

Sắc ký đồ xác định dư lượng Tetracycline

Chuẩn Tetracycline 200 ppb Mẫu Tetracycline

Trang 23

 Kết quả phân tích:

.2 1.4 1.6 1.8 2 2.2 0

Đường chuẩn Tetracyclin

Giới hạn (ng/L)

-Mẫu Tên chất Diện tích

-Không vượt ngưỡng giới hạn cho phép.

Trang 24

Tại sao phải xác

định dư lượng

Sulfamid?

- Thận: đau bụng thận, sạn thận, tiểu ra máu

- Hệ tiêu hóa: buồn nôn, nôn, tiêu chảy

- Da: các biểu hiện dị ứng từ nhẹ đến nặng

- Máu: thiếu máu, tan máu, giảm bạch cầu, giảm tiểu cầu, mất bạch cầu hạt, suy tủy

- Gan: vàng da, gây độc

Trang 25

 Phạm vi ứng dụng:

Phương pháp này cho phép xác định hàm lượng tồn dư của Sulfamides có

trong thịt Giới hạn phát hiện (LOD) trong

mẫu thịt của Sulfadiazine (SDZ),

dò UV ở bước sóng 265 nm, cột C18 trong điều kiện thường và pha động là hỗn hợp đệm KH2PO4 và methanol (tỷ lệ 70:30) với tốc độ dòng là 1ml/min

Trang 26

Trang 27

 Thiết bị:

Máy lắc Hệ thống bay hơi Hệ thống bơm hút

chân không

Máy khuấy điện

Máy đo pH Máy đồng nhất Máy li tâm Máy HPLC

Trang 28

 Cách tiến hành:

Trang 29

Trang 30

 Tính toán kết quả:

Lập ra đường chuẩn từ kết quả đo được của dung dịch làm việc Peak tương ứng của Sulfadiazine sẽ được tính toán theo đường chuẩn, được xác định theo phương trình đường thẳng:

Trang 31

Sắc ký đồ xác định dư lượng Sulfadiazine

Chuẩn Sulfadiazine 200 ppb Mẫu Sulfadiazine

Trang 32

Đường chuẩn Sulfadiazine

Nồng độ thật (ng/L)

Giới hạn (ng/L) Sulfa27 22,50952 184,10672 69,04002

Trang 33

TÀI LIỆU THAM KHẢO

[5] PGS.TS Dương Thanh Liêm , Kháng sinh sử dụng trong thức ăn chăn nuôi , sự tồn dư và

tính kháng thuốc của vi khuẩn gây bệnh, Bộ môn dinh dưỡng, khoa Chăn nuôi – Thú y, trường

Đại học Nông Lâm, 2002

[6] Phạm Kim Đăng, Tiếp cận vấn đề phát hiện tồn dư kháng sinh trong các thực phẩm có

nguồn gốc từ dộng vật (phần 1), khoa Chăn nuôi và nuôi trồng thuỷ sản, trường Đại học Nông

nghiệp Hà nội, 2003 [11] Thông tư ban hành “Quy định mức giới hạn tối đa dư lượng thuốc thú

y trong thực phẩm”, Bộ Y Tế, 24/2023/TT – BYT, Hà Nội, 14/8/2013.

[ [14] Mehtabuddin, A A Mian, T Ahmad, S Nadeem, Z I Tanveer, J Arshad, “Sulfonamides

residues determination in commercial poultry meat and eggs”, The Journal of Animal and Plant

Sciences (ISSN 1018-7081), trang 473 – 478, 2012.

Trang 34

TÀI LIỆU THAM KHẢO

[15] Murielle Juhel – Gaugain, B.Anger – Lemaitre, “ Determination of tetracycline reduises in

kidney and muscle by high performance liquid chromatography ” , AFSSA – Fougeres,

Trang 35

CẢM ƠN QUÝ THẦY, CÔ

ĐÃ LẮNG NGHE!!!!!

Định dạng
Số trang	35
Dung lượng	4,33 MB