Dendrobium aduncum hay còn gọi là Hồng câu hay Thạch hộc móc, Hoàng thảo thân gãy,…Đây là loài lan rừng có hoa nhỏ mọc thành chùm, một loài lan trong chi Lan Hoàng Thảo.Lan Dendrobium aduncum hay phong lan nói chung hiện đang được nhiều người ưa chuộng trong nước cũng như trên thế giới.
Trang 1ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA HÓA - BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Đề tài:
Nghiên cứu nhân giống vô tính
in vitro giống lan Dendrobium Aduncum
SVTH: Trần Thị Mơ
ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA HÓA - BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Đề tài:
Nghiên cứu nhân giống vô tính
in vitro giống lan Dendrobium Aduncum
SVTH: Trần Thị Mơ
Trang 2Tổng quan tài liệu
Kết quả và thảo luận Kết luận & định hướng
NỘI DUNG
Đối tương & phương pháp nghiên cứu
1
2
3
4
Trang 3Dendrobium aduncum hay
còn gọi là Hồng câu hay Thạch
hộc móc, Hoàng thảo thân gãy,…
Đây là loài lan rừng có hoa
nhỏ mọc thành chùm, một loài
lan trong chi Lan Hoàng Thảo
Lan Dendrobium aduncum
hay phong lan nói chung hiện
đang được nhiều người ưa
chuộng trong nước cũng như trên
thế giới
Hình 2.1: Lan Dendrobium Aduncum
TỔNG QUAN TÀI LIỆU
Trang 4Quy trình nhân giống in vitro cây lan Dendrobium Aduncum
4 - 8 tuần
4 - 8 tuần
4 - 8 tuần
4 - 8 tuần
4 -8 tuần
(Nguồn vật liệu tự nhiên)
(Chồi phát sinh từ protocorm)
(Protocorm)
(Nhân chồi) (Cây hoàn chỉnh)
(Vườn ươm)
Trang 5ĐỐI TƯỢNG & PHƯƠNG PHÁP
NGHIÊN CỨU
2.1 Đối tượng nghiên cứu
Đối tượng nghiên cứu trong
thí nghiệm này là nguồn mẫu
invitro giống lan Dendrobium
Aduncum có sẵn trung tâm nuôi
cấy mô tế bào thực vật tại trường
ĐH Bách Khoa Đà Nẵng
Hình 2.1: Nguồn mẫu Dendrobium
Aduncum invitro
Trang 6ĐỐI TƯỢNG & PHƯƠNG PHÁP
NGHIÊN CỨU
2.2 Phương pháp nghiên cứu
Môi trường MS có
bổ sung 2% đường
+ 0,8% agar+ AC
+ CW + CĐHST
(Nuôi cấy ở 250C
± 2, ánh sáng
2000-3000 lux)
Thí nghiệm1:
Nhân nhanh protocorm
Thí nghiệm2:
Nhân nhanh chồi Thí nghiệm 3: Tạo cây
hoàn chỉnh
Trang 7KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với NAA đến sự nhân nhanh protocorm.
Bảng 3.1: Kết quả nhân nhanh protocorm sau 4 tuần nuôi cấy
Ghi chú: 0 : protocorm không phát triển mà biệt hóa thành chồi
+ : protocorm phát triển chậm ++ : protocorm phát triển vừa +++ : protocorm phát triển tốt
Trang 83.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với NAA đến sự nhân nhanh protocorm.
Nhận xét:
- Môi trường thích hợp
nhất cho sự phát triển và
nhân protocorm MS + 0,5mg/
l BA + 0,5mg/l NAA + 15%
CW + 0,5 % AC + 2% đường
+ 0,8% agar
- Khi nồng độ cytokinin/
auxin cao thì protocorm có
xu hướng chuyển sang dạng
chồi mạnh
a
d c
b
Hình 3.1: Protocorm sau 4 tuân nuôi cấy
a Protocorm trên môi trường T2;
b Protocorm trên môi trường T3;
c Protocorm trên môi trường T4;
d Protocorm trên môi trường T1(ĐC)
Trang 93.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với NAA đến sự nhân nhanh chồi lan.
Bảng 3.2: Kết quả của việc nhân nhanh chồi
sau 4 tuần nuôi cấy
Trang 10 Nhận xét:
Tất cả các môi trường
đều có sự nhân chồi
- Môi trường thích hợp
nhất cho sự nhân chồi là môi
trường P4 có công thức môi
trường: MS + 1,5mg/l BA +
0,1mg/l NAA + 10% CW +
0,5 % AC + 2% đường +
0,8% agar
3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với NAA đến sự nhân nhanh chồi lan.
Hình 3.2: Chồi lan sau 4 tuần nuôi cấy
a Môi trường 1,5 mg/l BA + 0,1mg/l NAA;
b Môi trường 2 mg/l BA + 0,1mg/l NAA
Trang 113.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ NAA
và BA đến khả năng hình thành rễ của cây lan.
Trang 123.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ NAA
và BA đến khả năng hình thành rễ của cây lan.
Nhận xét:
- Khi cố định nồng độ BA ở
mức 0,1 mg/l, sự phát triển rễ của
các môi trường chứa nồng độ NAA
khác nhau là khác nhau
- Môi trường thích hợp cho
việc tạo cây hoàn chỉnh cho giống
lan Dendrobium aduncum là: MS +
0,9mg/l NAA + 0,1mg/l BA + 10%
CW + 0,5 % AC + 2% đường +
0,8% agar
Hình 3.3: Rễ lan sau 4 tuần nuôi cấy
a Môi trường 0,7 mg/l NAA + 0,1 mg/l BA;
b Môi trường 0,9 mg/l NAA + 0,1 mg/l BA
Trang 133.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ IAA
và Kin đến khả năng hình thành rễ lan.
Trang 143.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ IAA
và Kin đến khả năng hình thành rễ lan.
Trang 153.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ IAA
và Kin đến khả năng hình thành rễ lan.
- Khi sử dụng IAA riêng rẽ kết
quả ra rễ cao nhất tìm được
1,5mg/l IAA + 10% CW + 0,5
% AC + 2% đường + 0,8%
agar
- Môi trường thích hợp nhất
cho sự tạo rễ khi sử dụng kết
hợp IAA với Kin là môi
+ 0,1mg/l Kin + 10% CW +
0,5 % AC + 2% đường + 0,8%
agar
Hình 3.6: Rễ lan phát triển sau 4 tuần nuôi cấy
a Môi trường 1,5 mg/l IAA
b Môi trường 1,5 mg/l IAA + 0,1 mg/l Kin
Trang 16KẾT LUẬN
1 Giai đoạn nhân nhanh protocorm
MS + 0,5mg/l BA + 0,5mg/l NAA + 15% CW + 0,5 % AC + 2% đường + 0,8% agar
2 Giai đoạn nhân nhanh chồi
MS có bổ sung 1,5mg/l BA + 0,1mg/l NAA + 10% CW + 0,5 % AC + 2% đường + 0,8% agar
3 Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh
MS + 0,9mg/l NAA + 0,1mg/l BA + 10% CW + 0,5 % AC + 2% đường + 0,8% agar
Trang 17ĐỊNH HƯỚNG
1
2
3
Tiếp tục khảo sát ảnh hưởng của một số chất ĐHST đến sự nhân nhanh chồi lan
Xây dựng quy trình chuyển cây lan in vitro
ra đất
Thử nghiệm sản xuất trên đồng ruộng, trồng
và chăm sóc hoa thương phẩm
