Nghiên cứu về hạt thảo quyết minh, họ vang

Nghiên cứu về hạt thảo quyết minh, họ vang

Luan dn Thae £t Khoa Hoe Hoa Hoe Huynh Bui Link Chi

3.1 XU LY NGUYEN LIEU DUNG TRONG NGHIEN CUU:

Hat Thao Quyét Minh, Cassia Tora, ho Vang (Caesalpiniaceae), sử dụng

trong nghiên cứu đã được nhận danh bởi PGS.Lê Công Kiệt, Bộ Môn Thực Vật,

Trường Đại Học Khoa Học Tự nhiên, Thành phố Hồ Chí Minh

Để thực hiện việc nghiên cứu, chúng tôi đã thu hái trái Thảo Quyết Minh tại Khoa Dược, Bệnh Viện Y Học Cổ Truyền, Thành phố Tuy Hòa, Tỉnh Phú Yên vào tháng 9-l 1 trong năm Sau khi thu hái, phơi khô trái ngoài trời Khi trát

đã khô, tách lấy phân vỏ và phần hạt riêng Sấy phần hạt ở 60°C cho đến khối

lượng không đổi Xay hạt khô thành bột dùng làm nguyên liệu cho nghiên cứu

3.2 XÁC ĐỊNH ĐỘ ẨM, ĐỘ TRO VÀ CÁC NGUYÊN TỐ VÔ CƠ: 3.2.1 Xác định độ ẩm:

Độ ẩm được tính theo công thức sau:

—Ù

pogm = —— x 100

Trong đó: a 1a trong lugng nguyén liéu trước khi sấy

b là trọng lượng nguyên liệu sau khi sấy

Thực hiện thí nghiệm 3 lân với 3 mẫu khác nhau, lấy giá trị trung bình

Bảng 1: Độ Ẩm của hạt Thảo Quyết Minh

Kết luận: Độ ẩm của hạt Thảo Quyết Minh là 44,29%

3 PHAN NGHIEN CUU

3 Xa Ly nguyen ligu ding trong nghién aứu

3.2 Xda dink ds am, de tro vd ede nguyen té vd eo

ĐH.ÉH.TỰ NHIÊN|

THƯ VIỆN

291291 | Trang 1 {

“uân án "Thae 4F Khoa Hoa Ha coe Huynh Bai Link Chi

Trong đó: AÁ là trọng lượng tro

B là trọng lượng mẫu khô

Thực hiện thí nghiệm 2 lân với 2 mẫu khác nhau, lấy giá trị trung bình

Kết quả được trình bày trong bang 2

Bảng 2: Độ tro của hạt Thảo Quyết Minh

Kết luận: Độ tro của hạt Tháo Quyết Minh là 4,2%

3.2.3 Xác định các nguyên tổ vô cơ:

Các nguyên tố vô cơ trong hạt Thảo Quyết Minh được xác định bằng phương pháp phân tích quang phổ phát xạ nguyên tử,

Kết quả cho thấy trong hạt Thảo Quyết Minh thu hái tại Khoa Được, Bệnh viện Y học cổ truyền, thành phố Tuy Hòa, tỉnh Phú Yên cd 14 nguyên tố

v6 cd: Al, Si, Mg, Ca, Fe, Mn, Ti, Ni, Mo, Cu, Ag, Zn, P, Na, trong đó các nguyên tố MẸ, Ca va Na có hàm lượng tưởng đối cao (>3)

Kết quả được trình bày trong bằng 3 (Phụ lục số 1)

3 PHAM NGHIEN C UU

3.2 Xde dink de &m, da tro va ede nguyén £6 05 «Ơ, rangi 2

Luan án Thae at Khoa Hoe Hea Hoe Hunk Bat Link Che

Bảng 3: Các nguyên tổ vô cơ trong hạt Thảo Quyết Minh

3.3.1 Điều chế các loại cao:

Để tìm hiểu sơ bộ thành phân hóa học của hạt Thảo Quyết Minh, chúng

tôi tiến hành xác định một số cấu tử hữu cơ hiện điện trong cây như: sterol,

alcaloid, glicosid, tanin, saponin và antranoid

Mỗi cấu tử hữu cơ được định tính bởi những thuốc thử đặc trưng, thường là các thuốc thử cho phản ứng có mầu hoặc phản ứng trầm hiện Trên kết quả định

tính các cấu tử hữu cơ, chúng tôi tiến hành xác định hàm lượng các cấu tử Sự

khảo sát định tính các cấu tử hữu cơ được thực hiện trên bột khô, cao eter dầu

udn dn Thae ai Khoa Hea cHáa Hoe Hunk Bai Lenk Che

hóa (6-90), 'cao benzen „ cao đicloromelan và cao melanol của bạt Thảo

Quyết Minh, Các đạng nguyên liệu trên được điều chế theo sơ đồ 1:

Sơ đề ï; Điều chế cao eter đầu hóa, cao benzen, cao diclorometan và cao

-Tan trich vdi metanol trong Soxhiet, 120 gid

-Cô cạn dụng môi ở 40C dưới áp suất kém

-Trén cao v6i 250g sillicagel

-Tân trích trong Soxhlet với cter dầu hỏa (60-90°C), 60 gid

Lugn dn Thae st Khoa Hoe Hóa Hoe Huynh Bai Link Chi

3.3.2 Khao sat dinh tinh:

Bảng 4: Kết quả định tính sterol trên bột khô, cao metanol, cao eter dầu

hỏa, cao benzen và cao diclorometan của hạt Thảo Quyết Minh

3, PHAN NGHIEN CUU

3.3 %X4a dink một số cấu tử hau eo trong hat Thao Quuất Mink Frang 5

Bảng 5: Kết quả định tính alcaloid trên bột khô, cao metanol, cao eter đầu hóa, cao benzen và cao điclorometan của hạt Thảo Quyết Minh

` Mẫu | Bội khô Cao ! Cao eter Cao Cao

Thuốc thữ metanol ' đầu hóa | benzen | CHạCh

Kết luận: Bột khô, cao metanol, cao cier đầu hỏa, cao benzen và cao

diclorometan của hạt Thảo Quyết Minh không có alcaloid

3.3.2.3, Tanin: [17 }

Tanin được xác định bởi phản ứng có mầu và phấn ứng trầm hiện với các

thuốc thử Suasny, dung địch gelatin mặn, dung dịch acetat chì bão hòa và dung

dịch FeCls 1% Kết quá định tính tanin trong hạt Thảo Quyết Minh được trình bay trong bang 6

Bảng 6: Kết quả định tính tanin trên bệt khô, cao metanol, cao eter dầu hóa,

cao benzen và cao dielorometan của hạt Thảo Quyết Minh

oo Mẫu | Bội khô Cao Cao eter Cao Cao

Thuốc thủ metanol | đâu hỏa | benzen | CH¿ịCh Stiasny + + - - -

Kết luận: Bột khô và cao metanol của hạt Thảo Quyết Minh có tanin

3 PHAAN NGHGIE MN CIM

Xe dink mật số sấu tả bau eo trong Bạt ‘Thao Quyet Mink rang

33

Hugh Bai Link Chi

thuốc thử Baljet và Molish Kết quả định tính glicosid trong hạt Tháo Quyết

Minh được trình bây trong bang 7

Sơ đề 2; Định tính glicosid theo phương pháp SOOS

Trâm hiện PbSOu Địch lọc

-Cô cạn ở 40C dưới áp suất kém

-Hòa tan căn trong alcol etil 95%

Dung dich alcol

Bang 7: Kết quả định tính glicosid trên bột khô, cao metanol, cao eter đầu

hỏa, cao henzen và cao đielororaetan của hạt Thảo Quyết Minh

~~ Mau Botkh6 | Cao | Caoeter | Cao Cao Thuốc thử metanol | đấu hổa | benzen | CH¿Ch

Bảng 8: Kết quả định tính các antranoid trên bét khé, cao metanol, cae eter

dâu hổa, cao benzen và cao điclorometan của hạt Thảo Quyết Minh

~~, Mau | Bét khé Cao | Cao eter Cao Cao

Thuốc thử`- metanol | đầu hóa | benzen | CH;CI;

Borntr aeger + + + + +

Kết luận: Đột khô, cao metanol, cao eter đầu hỏa, cao benzen và cao

diclorometan của hạt Tháo Quyết Minh đều có antranold

3.3.3 Khảo sát định lượng:

Trong phân này, chúng tôi chỉ xác định hầm lượng các cấu tử hữu cơ có

trong hạt Thảo Quyết Minh như: tanin, glicosid va antranoid

3 PHAN NGHIEN OWU

33 Xá dink một số cấu tà hau eo frong hat Thdo Buyet cAMMink, Frangi8

Luan an ‘Thae 4 Khoa Hoe HAéa Hoe cHuunh Bai Link Chi

3.3.3.1 Tanin: [17]

Chúng tôi dùng phương pháp Takashi Yoshida (1998) để xác định hàm

lượng tanin có trong hạt Thảo Quyết Minh:

Sơ đồ 3: Xác định hàm lượng tanin theo phương pháp TAKASHI YOSHIDA

-Lam khan với Na;SƠu

-Cô cạn dung môi ở 40°C

Địch nước Dich eter etil Tận trích với alcol n-butil Cô can a

3 PHAN NGHIEN CUU

3.3 Xde dink mot a6 edu td fda eo fuong hat Cháo XQuuết Mink Grang\ 9

Luan dn Thae Ai Khoa Hoe Hoa Hoa

Huynh Bui Link Chi

3.3.3.2 Antranoid:[22]

Antranoid dudc định lượng theo sơ đồ 4

Sơ đồ 4: Xác định hàm lượng antranoid trong hạt Thảo Quyết Minh

-Rửa với nước

-Lbàm khan với CaC];

Chúng tôi tiến hành xác định ham lugng glicosid theo so dé 5

Kết luận: Bột khô hạt Thảo Quyết Minh có 2,6% glicosid

3 PHAN NGHIEN CUU

3.3 Xde định một số cấu tủ hau co trong hat Thdo Quyst Mink GrangW

Ba Dich trich alcol

-Thu hổi dung môi 6 40°C

-Loai tap chat vdi acetat chi 20%

Dịch nước Tram biện

-Loai acetat chì dự với Na;SŠŒ bão hòa,

-Lọc

Tận trích với cloroform

Địch nước Dich cloroform

Tận trích với alcol # -butil Cé can dung mdi

j 3 40°C dưới áp

Dich alcol n -butil Dich nude

-Lam khan với Na;SOa

-Cô cạn dung môi ở 40C dưới áp suất kém

con Tử GHeosid toàn phần ©

“uận án “Tae si Khoa Hee ts Hoa Hugnh Bai Link Chi

3.3.4, Tém tit két qua dinh tính và định lượng một số cấu tử hữu cơ

_ Sự khảo sát sơ bộ về thành phần hóa bọc của hạt Thảo Quyết Minh cho

kết quả như sau:

> Bội khô và cao metanol của hạt Thảo Quyết Minh có sterol, tanin, glicosid và antranoid

» Cao eter dau hỏa có sterol và antranoid,

YX Cao benzen cổ antranoid,

> Cao diclorometan có glicosid và antranoid

Y Ham lượng tanin trong hạt Thảo Quyết Minh là 0,9%

> Hàm lượng antranoid trong hạt Thảo Quyết Minh là 1,58%

>» Hàm lượng glicosid trong hại Thảo Quyết Minh là 2,6%

Bảng 9: Tóm tắt kết quả xác định các cấu tử hữu cơ trong bột khô, cao

metanol, cao eter đầu hóa, cao benzen và cao diclerometan

Luan án Thae at Khoa Hoe Ha Hoe Huynh Bu Link Chi

3.4.2 Phương pháp ly trích các hợp chất từ cao etcr dầu hỏa:

Bột khô hạt Thảo Quyết Minh (3kg) được tận trích với metanol trong Soxhlet khoảng 120 giờ Thu hồi dung môi ở 40°C dưới áp suất kém cho cao

metanol (250g) Trộn cao metanol với silicagel và tận trích hỗn hợp với eter dầu hỏa (60-90°C) trong Soxhlet khoảng 60 giờ Cô cạn dung môi ở 40°C cho cao

eter dầu hỏa (21,23g) dưới dạng xirô Để lắng xirô trong 7 ngày ở nhiệt độ

phòng, lọc cho chất rắn (1g) (sơ đồ 6, trang 24)

Thực hiện sắc ký bản mỏng silicagel trên cao cter dầu hỏa và chất rắn với

hệ dung ly benzen-cloroform tỷ lệ 8:2, thuốc thử H;SO¿ đậm đặc làm hiện 2 vết với chất rắn (hình 3, trang 23)

Hình 3: Sắc ký bản mồng silicagel của cao eter dầu hỏa và

của chất rắn A: Cao eter dầu hỏa

B: Chất rắn

Hé dung ly : benzen-cloroform 8:2

Thuéc thi : H,SO, dam diac

3 PHAN NGHIEN CUU

3.4 Khao dt héa hoc cao eter dau ha của hat Thdo Quyet Mink Pramg23

Luan dn Thae si Khoa Hoc Hea Hoe Huynh But Link Chi

-Trộn cao vGi sillicagel (250g)

- Tận trích trong Soxhlet với eter dầu

Cô cạn dung môi dưới áp suất

3 PHAN NGHIEN CUU

3.4 Khảo xát Báa họa cao ster dầu bảa aủa hạt Thao Quuết Minh Frangd4

án Thae at Khoa Hoe Ha Hoe huynh Bui Link Chi

3.4.3 Tách chiết và cô lập antranoid E:

Để tách chiết và cô lập chất tỉnh khiết từ chất rắn, chúng tôi sử dụng

phương pháp sắc ký trên cột silicagel, dùng dung môi giải ly là eter dầu hỏa (60-

90°C), benzen, cloroform và hỗn hợp của chúng với độ phân cực tăng dần Theo dõi quá trình sắc ký cột silicagel bằng sắc ký bản mỏng silicagel với dung môi giải ly 14 benzen-cloroform ty lệ 8:2 và thuốc thử làm hiện vết là H;SOx đậm

đặc

Kết quả sắc ký cột silicagel thực hiện trên chất rắn (bảng 10, trang 26)

cho 11 phân đoạn Phân đoạn 3, giải ly với eter dầu bỏa-benzen 99:1 (1000m)),

sau khi cô cạn dung môi, cho bột màu vàng (23,8mg)

Kết tỉnh sản phẩm trong aceton thu được tỉnh thể màu vàng cam (18mg),

đặt tên là E với thu suất 0,0006% tính trên trọng lượng mẫu hạt khô

Sắc ký bản mỏng silicagel trên E cho một vết tròn màu vàng có Re 0,52;

với hệ dung ly là benzen-cloroform tỷ lệ 8:2, thuốc thử làm hiện vết là H;SO¿

đậm đặc (hình 4, trang 25)

Hình 4: Kết quả sắc ký bản mỏng silicagel cla hợp chất E

Dung ly: benzen-cloroform 8:2

Thuốc thử : H;SO¿ đậm đặc

1 vết màu vàng có R; = 0,52

r_ ————=————————————=

3 PHAN NGHIEN CUU

3.4 Khdo sat héa koe cao eter déu héa ala hat Thdo Quyet Mink Grang25

Luan an Thaa Sẽ, Khoa Hoe Hoa cọc

2 IE-B(99:1) | 1500 | 20,5 Can vang Nhiều vết

3 E-B(99:1) | 1600 | 23,8 | Bột màu vàng | Mội vết có Sản

, R,= 0,52 | phẩm E

li B-CC@ :5) | 1000 | 65,3 Căn xanh đen Vết dài

Ghi chil: E: Eter ddu héa; B: Benzen; C: Cloreform

Luan án Thae ab Khoa Hoe Hea Are

Huinh Bui Link Chi

§ Khéi phd MS (phu luc 2): m/z: 254 [M”], 226 [M-CO]", 197 1226 - CHOY’, 181 [M— 737", 152, 127

@ Phé IR (phụ lục 3} Vac (KBr): 3426 (dao động giãn -OH),

1670 (đao động nhóm >C=O tiếp cách >C=C<), 1623 (dao động nối đôi >C=C<)

£@ Phổ 'H-NMR (CDCHXphụ lục 4, 5): Các mũi cộng hưởng đặc trưng

được trình bày trong bang 11

Bang 11; Kết quả phổ TH-NMR của sẵn phẩm E

§ Phổ ”C-NMR kết hợp với kỹ thuật DEPT (phụ lục 6, 7, 8, 9):

Phé °C - NMR va DEPT- NMR có các mũi cộng hưởng tương ứng với các loại carbon như sau (bảng 12):

Bang 12: Két qua phé °C-NMR kết hẹp với kỹ thuật DEPT của E

Phổ °C _.NMR của E (CDCh) Phé DEPT-NMR Loai carbon

Luan an Thee 4a Khoa Hoe ca Hoe Hunk Bai Link Ohi soocananeatmsanasansasEsecnnn comcensos oes ty

3.4.4.2 Biện luận kết quả:

Dựa trên các tài liệu tham khảo [22](23]{24], khi đối chiếu các số liệu

của sản phẩm E với các số liêu của Chrysophanol (1,8-đihydroxy-3-metyl-

antracen-9,10-dion), chúng tôi thấy phù hợp nên đùng các số liệu của hợp chất trên làm chuẩn để so sánh,

Phổ MS cho thấy có một số mảnh đặc trưng phù hợp với công thức phân

tử của Chrysophanol như sau:

Bang 13: So sánh phổ MS của E với phổ MS của Chrysophanol [221123]

Phổ khối lượng, m/2

3 PHAN NGHIE AM CUU

3-4 KKhdo sdt fda hoe aac eter dầu kảa sủa hạt Thdo Kuuết Mink 2x28

Luan dn Thao at, Khoa Hoe Hea Hoe Hugh Bat Link Chi

vy

NMR của sản phẩm E và của Chrysophanol [24]{25] gần như nhau, được trình

bay trong bang 16

Bang 16: So sdnh phé “C- NMR va DEPT-NMR cilia E với phổ C.NMR

cia Chrysophanol [24][25]

£ Kết luận:

Như vậy, qua các số liệu đối chiếu giữa sắn phẩm E và Chrysophanol

chúng tôi nhận thấy phù bợp nên để nghị cơ cấu của sản phẩm E là

Chrysophanol,

3 PHAAN NGHIEN CUU

3.4 Khdo sdt hóa hoa eao ster ddu hda cla hat Thao Quyet Mink Frang3

Luan án Thae at Khoa Hoe Héa He Huynh Bai Linh Chi

a

35 KHAO SAT HOA HOC CAO BENZEN CUA HAT THAO QUYET MINH:

3.5.1 Đại cương:

Hai nhà hóa học ACNARYA T K và CHATTERJEE I B [26] đã cô lập

được antranoid trong cao benzen của hạt Thảo Quyết Minh Sự tách chiết được thực hiện bởi sắc ký trên cột silicagel với dung môi giải ly là benzen, cloroform

3.5.2 Phương pháp ly trích các hợp chất trong cao benzen:

Sau khi khử chất béo, sterol, triterpen trong bột hạt khô Thảo Quyết Minh

bằng cách tận trích hỗn hợp cao metanol và silicagel với eter dầu hỏa (60-90°C)

trong Soxhlet theo sơ đỗ 6 (trang 24), phần bã được tiếp tục tận trích với benzen Thu hổi dung môi dưới áp suất kém cho cao benzen (9g)(sơ đồ 7, trang 32) Thực hiện sắc ký bản mỏng silicagel trên cao benzen với hệ dung ly cloroform- metanol 99:1, thuốc thử H;SOx đậm đặc cho nhiều vết (hình 5, trang 31)

Hình 5: Kết quả sắc ký bản mỏng

silicagel của cao benzen

Hệ dung ly : cloroform-metanol 99:1 Thuốc thử : H;SO¿ đậm đặc

3 PHAN NGHIEN CUU

3.5 Khảo sat héa hoe cao benzen cia hat Thao Quuết Mink Prang3

-Tan trich vdi metanol trong Soxhlet, 120 giờ

_ Loc C6 can dung môi dưới áp suất kém ở 40C

- trộn cao với silicagel (250g)

~Tận trích trong Soxhlet với eter đầu

hóa (60-90”C), ó0 giờ,

-Phơi khô Cô cạn dung môi ở

-Tận trích với benzen khoảng 60 giờ | 40°C dưới áp suất kém

(Hiệu suất là 0,3% tính trên trọng lượng bột hạt khê)

3.5.3 Tách chiết và cô lập 3 hợp chat antranoid B,, B, va Bạ trong cao benzen:

Sự tách chiết và cô lập các hợp chất trong cao benzen của bột khô hạt Thảo Quyết Minh được thực biện bởi phương pháp sắc ký trên cột siicagel,

dùng dung môi giải ly là benzen, cloroform, metanol và hỗn hợp của chúng với

độ phân cực tăng dẫn (bằng 17, trang 36)

3.5.3.1 Cá lap antranoid By:

Kết quả sắc ký cột silicagel trén cao benzen cho 11 phan doan Phan doan

2, giải ly với dung môi benzen (150ml), sau khi cô cạn dụng môi, cho cin mau

9 PHAN NGHIEN OWN

3.5 Kkdo adt héa hoa cao benzen ala hat Thao Quyst Mink Frang32

Luan an Thee si Khoa Hoe Hoa Hoe Hhugnh Rui Link Chi

tiến hành sắc ký bản dày điều chế trên cặn màu vàng (251,5mg) với dung môi

giải ly là cloroform-metanol 99:1, dung môi rửa giải chất ra khỏi silicagel là

aceton Kết quả thu được hợp chất dưới dạng tỉnh thể màu vàng (96mg) với thu

suất là 0,0032% tính trên trọng lượng hạt khô, đặt tên Bị

Sắc ký bản mỏng silicagel trên Bị với hệ dung ly và thuốc thử làm hiện hình vết như trên cho một vết tròn màu vàng có R;=0,47 (hình 6, trang 33)

Hình 6: Kết quả sắc ký bản mong silicagel ca hgp chat B,

Dung ly: cloroform-metanol 99:1

Thuốc thử : H;SO¿ đậm đặc

1 vết màu vàng có Ry = 0,47

3.5.3.2 Cô lập antranoid B;:

Phân đoạn 3, giải ly với benzen (1300m)), sau khi cô cạn dung môi, cho

cặn màu vàng có lẫn tỉnh thể (886,4mg) Sắc ký bản mỏng silicagel thực hiện

trên cặn với dung ly cloroform-metanol 99:1, thuốc thử H;SOx đậm đặc cho 3 vết

màu vàng, một vết đậm R/=0.41 ; 2 vết mờ R¿=0,39 và R,=0,31

3 PHAN NGHIEN CUU

3.5 Khao sat kéa koe cao Genzen cita hat Thao Quuết Mink Prang33

Chúng tôi cũng tiến hành sắc ký bản dày điều chế trên cặn vàng này với

dung môi giải ly là cloroform-metanol 99:1, dung môi rửa giải chất ra khỏi silicagel 14 aceton Kết quả thu được hợp chất dưới dạng tỉnh thể màu vàng

(42mg) với thu suất là 0,0014% tính trên trọng lượng hạt khô, đặt tên Bạ

Sắc ký bản mỏng silicagel trên B; với hệ dung ly cloroform-metanol 99:1

và thuốc thử làm hiện hình vết như trên cho một vết tròn màu vàng có R/=0,41

(hình 7, trang 34)

tình 7: Kết quả sắc ký bản mong silicagel cia hợp chất B,

Dung ly: cloroform-metanol 99:1 Thuốc thử : H;SO¿ đậm đặc

1 vết màu vàng có R; = 0,41

3.5.3.3 Cô lập antranoid Ba:

Phân đoạn 4, giải ly với benzen (4250m]), sau khi cô cạn dung môi, cho

cặn màu vàng có lẫn tỉnh thể (1006,2mg) Sắc ký bản mỏng silicagel thực hiện trên cặn với dung ly cloroform-metanol 99:1 thuốc thử H;SO¿ cho 3 vết vàng, 2

vết mờ R;=0,41 và R;=0,39, một vết đậm R¿=0,31

Tiến hành sắc ký bản dày điều chế trên cặn vàng với dung môi giải ly là cloroform-metanol 9:1, dung môi rửa giải chất ra khỏi silicagel là aceton Kết quả thu được hợp chất dưới dạng tỉnh thể màu vàng (35mg) với thu suất là

0,0012% tính trên trọng lượng bạt khô, đặt tên Bà

3 PHAN NGHIEN CUU

3.5 Khdo aát héa hee cao benzen cita hat Thao Quyet Mink Grang34

Sắc ký bản mỏng silicagel trên Bạ với hệ dung ly và thuốc thử làm hiện hình vết như trên cho một vết tròn màu vàng có R/=0,31 (hình 8, trang 35)

Hình 8: Kết quả sắc ký bản mỏng silicagel của hợp chất Bạ

Dung ly: cloroform-metanol 99:1

Thuốc thử : H;SO¿ đậm đặc

1 vết màu vàng có R; = 0,31

Hình 9: Kết quả sắc ký bản mỏng

silicagel cua 3 hgp chat B,, B va B;

Dung ly: cloroform-metanol 99:1

Thuốc thử : H;SO¿ đậm đặc

3 PHAN NGHIEN CUU

3.5 Khdo sdt kda lạc cao benzen cia kat Théo QDuyst Minh Frang35