Nuôi cấy và dung hợp tế bào trần pptx

TRƯỜNG ĐẠI HỌC THÀNH TÂYKhoa công nghệ nông – thực phẩm Thảo luận Nuôi cấy và dung hợp tế bào trần Gv hướng dẫn : ths.. Phương pháp Dung hợp protoplast 4.Ứng dụng và các tồn tại của kỹ

Công nghệ tế bào thực vật

Nuôi cấy và dung hợp tế bào trần

TRƯỜNG ĐẠI HỌC THÀNH TÂY

Khoa công nghệ nông – thực phẩm

Thảo luận

Nuôi cấy và dung hợp tế bào trần

Gv hướng dẫn : ths BÙI VĂN THẮNG

Nhóm sinh viên thực hiện :

1 DƯƠNG TUẤN BẢO

2 NGUYỄN VĂN SINH

2

Nội Dung

1 Phương pháp tách protoplast

2 Nuôi cấy protoplast

3 Phương pháp Dung hợp protoplast

4.Ứng dụng và các tồn tại của kỹ thuật protoplast

6

2 Nuôi cấy protoplast

2 Nuôi cấy protoplast

2.2 Môi trường nuôi cấy

2 Nuôi cấy protoplast

2.3 Điều kiện nuôi cấy

• Cường độ ánh sáng

• Chất lượng ánh sáng

• Nhiệt độ

3.Phương pháp dung hợp protoplast

3.1 Dùng hóa chất

• Xử lý bằng NaNO3

• Xỷ lý bằng PEG

10

3.Phương pháp Dung hợp protoplast

3.1.1 xử lý bằng NaNO 3

• Power và cs đã dùng

NaNO3 (0,25 M) kích thích dung hợp hai protoplast

• phương pháp này cho

hiệu suất thấp vì NaNO3không thích hợp với tế bào bị không bào hóa mạnh như protoplast từ

• Tác nhân PEG (polyethylen glycol)

• PEG có 2 tác dụng:

 Hoạc cung cấp một cầu nối Ca2+ có thể liên kết các bề mặt màng với nhau

 Hoạc dẫn đến sự rối loạn

3.1.2 xử lý bằng PEG

3.Phương pháp Dung hợp protoplast

12

3.Phương pháp Dung hợp protoplast

3.2 Dùng xung điện

• Nguyên tắc : các

protoplast tích điện nên dịch chuyển trong điện trường tạo chuỗi giữa hai thanh điện cực, xung điện làm thủng màng khiến protoplast hòa trộn vào nhau

3.Phương pháp Dung hợp protoplast

14

3.Phương pháp Dung hợp protoplast

3.3 các khả năng xảy ra khi dung hợp

16

4.Ứng dụng và các tồn tại của kỹ thuật

4.Ứng dụng và các tồn tại của kỹ

thuật protoplast

4.1.1 nuôi cấy tế bào protoplast thuốc lá

 Chuẩn bị môi trường :

4.Ứng dụng và các tồn tại của kỹ

thuật protoplast

 Ngày thứ 3 : chuyển sang

nuôi cấy ở ánh sáng yếu

(10-20 µmol.sec/m2)

 Ngày tứ 5 : chuyển sang nuôi cấy ở ánh sáng có cường độ cao hơn (50-75 µmol/sec/m2)

 Ngày thứ 7: kiểm tra số lượng tế bào phân chia, kiểm tra xem có dấu hiệu của sự nhiễm bẩn không

20

4.1.1 nuôi cấy tế bào protoplast thuốc lá

4.Ứng dụng và các tồn tại của kỹ thuật

protoplast

Cây cà chua lai khoai tây

4.Ứng dụng và các tồn tại của kỹ thuật

protoplast

4.2 các tồn tại của kỹ thuật protoplast

 Các quy trình nuôi cấy tế bào phức tạp, yêu cầu các

 Khả năng ứng dụng của lai soma vào lai xa còn han chế

do có thất thoát NST của thể tái sinh

22