Luận văn : NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔ HỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ part 8 doc

Dung dịch trypsin 0,25% Phenol red 0,002 g Nước cất vừa đủ 100 ml Khử trùng bằng lọc chân không vô trùng nếu số lượng lớn hoặc lọc bằng lọc syringe khi cần lọc với thể tích nhỏ... MÔI TR

Dung dịch PBS

-NaCl 8 g

KCl 0,2 g

Na2HPO4 1,15 g

KH2PO4 0,2 g

Nước cất vừa đủ 1 l

Dung dịch borat 0,01 M, pH 8,5

- Pha dung dịch borat 0,1 M, pH 8,5

1,2366 g acid boric trong 200 ml nước cất, điều chỉnh pH bằng NaOH

- Pha 10 ml dung dịch borat 0,1 M, pH 8,5 với 90 ml nước cất

Dung dịch trypsin 0,25%

Phenol red 0,002 g

Nước cất vừa đủ 100 ml

Khử trùng bằng lọc chân không vô trùng nếu số lượng lớn hoặc lọc bằng lọc

syringe khi cần lọc với thể tích nhỏ

Dung dịch versen 0,2%

Nước cất vừa đủ 1 l

MÔI TRƯỜNG DMEM

AMINOACIDS

INORGANIC SALTS

Sodium Phosphate Monobasic

Anhydrous

109 mg/l

VITAMINS

Folic acid 4 mg/l

OTHER COMPONENTS

Hình 1: Tế bào vero

Hình 2: Tế bào vero chịu tác động của độc tố VT2e

Hình 3: Thú thí ngiệm

Hình 4: Tiêm protein MBP-VT2eB cho thỏ

Hình 6: Tủa kháng thể với ammonium sulfate

100%S Hình 5: Lấy máu tĩnh mạch tai thỏ

63

BẢNG SỐ LIỆU OD620 CỦA PHẢN ỨNG CHUẨN ĐỘ ĐỘC TỐ VT2e

1 2 3 4 5 6 7

E 0,101 0,179 0,502 1,093 1,130 1,130 1,007

F 0,106 0,149 0,445 0,936 1,006 0,967 1,060

G 0,087 0,147 0,374 1,015 1,017 1,042 1,194

H 0,197 0,150 0,353 0,891 1,055 1,085 1,128

Cột 1 → cột 6: Độc tố pha loãng từ nồng độ ½ đến nồng độ 1/2x105 Cột 7: Đối chứng tế bào

64

BẢNG SỐ LIỆU OD620 CỦA PHẢN ỨNG TRUNG HÒA ĐỘC TỐ VT2e TRÊN MÔI

TRƯỜNG TẾ BÀO VERO

Mẫu kháng huyết thanh thỏ 4 (ngày thứ 7 sau mũi nhắc lại 3)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

A 1,116 1,146 1,153 1,022 0,856 0,676 0,417 1,267 0,145 0,922

Cột 1 → cột 6: Kháng huyết thanh pha loãng từ nồng độ ½ đến nồng độ 1/128 ủ với độc tố VT2e Cột 8: Đối chứng huyết thanh

Cột 9: Đối chứng độc tố Cột 10: Đối chứng tế bào

65

A 1,135 1,007 0,804 0,717 0,564 0,553 0,383 0,425 0,270 0,298 1,006 0,224

B 1,023 1,058 0,823 0,713 0,698 0,639 0,590 0,571 0,458 0,374 1,094 0,247

E 0,383 0,356 0,498 0,436 0,358 0,196 0,134 0,134 0,119 0,120 0,498 0,314 0,077

F 0,334 0,439 0,328 0,452 0,413 0,200 0,186 0,142 0,141 0,126 0,448 0,329 0,079

Hàng A → D: Mẫu kháng huyết thanh thỏ 4 (mũi nhắc lại 3)

Cột 1 → cột 10: Kháng huyết thanh pha loãng từ nồng độ 1/20 đến nồng độ 1/10240 ủ với độc tố VT2e Cột 11: Đối chứng huyết thanh

Cột 12:

- Hàng A, B: Đối chứng độc tố

- Hàng C, D: Đối chứng tế bào Hàng E → H: Mẫu kháng huyết thanh thỏ 5 (mũi nhắc lại 4)

Cột 1 → cột 10: Kháng huyết thanh pha loãng từ nồng độ 1/20 đến nồng độ 1/10240 ủ với độc tố VT2e Cột 11: Đối chứng huyết thanh

Cột 12: Đối chứng tế bào Cột 13: Đối chứng độc tố

66

A 0,785 0,845 0,911 0,899 0,919 0,885 0,575 0,609 0,541 0,405 0,914 0,785 0,326

B 0,788 0,735 0,801 0,676 0,949 0,789 0,597 0,602 0,466 0,397 0,657 0,739 0,326

Hàng A → D: Mẫu kháng huyết thanh thỏ 3 (mũi nhắc lại 4)

Hàng E → H: Mẫu kháng huyết thanh thỏ 2

Cột 1 → cột 10: Kháng huyết thanh pha loãng từ nồng độ 1/20 đến nồng độ 1/102408 ủ với độc tố VT2e Cột 11: Đối chứng huyết thanh

Cột 12: Đối chứng tế bào Cột 13: Đối chứng độc tố