Bài giảng HIV : Các phương pháp xét nghiệm HIV part 1 ppsx

Các phương pháp xét nghiệm HIV Nguyen Thi Nhu Ha... Kỹ thuật SFD HIV 1/2 PA Nh Nhữ ững hạt gelatin được gắn với các thành phần kháng nguyên của ng hạt gelatin được gắn với các thành phầ

Các phương pháp

xét nghiệm HIV

Nguyen Thi Nhu Ha

XÐt nghiÖm ph¸t hiÖn sµng läc

C¸c kü thuËt ELISAC¸c kü thuËt ELISA

+ HIV Uniform II plus O

+ Genscreen HIV 1/2 version 2

+ Murex HIV 1/2

C¸c xÐt nghiÖm nhanhC¸c xÐt nghiÖm nhanh

+ SFD HIV 1/2 PA

+ Determine HIV 1/2

+ Multispot HIV

+ Multispot HIV 1/HIV1/HIV 22

+ Genie II HIV 1/2

Kỹ thuật SFD HIV 1/2 PA

 Nh Nhữ ững hạt gelatin được gắn với các thành phần kháng nguyên của ng hạt gelatin được gắn với các thành phần kháng nguyên của virut HIV(gp41, p24 của HIV1 và gp36 của HIV2) sẽ tạo ngưng kết khi có sự hiện diện của kháng thể đặc hiệu trong huyết thanh (hoặc huyết tương) bệnh nhân cho phép phát hiện đồng thời

kháng thể của virut HIV 1 và 2

 Trong phản ứng ngưng kết, mẫu thử được tiến hành đồng thời

trên hai giếng: với hạt gelatin không gắn kháng nguyên (giếng

chứng âm) và các hạt gelatin có gắn kháng nguyên (giếng phản ứng)

 Không có phản ứng ngưng kết khi các hạt gelatin tự động lắng

xuống, gom lại thành nút nhỏ dưới đáy giếng

 Có phản ứng ngưng kết khi các hạt gelatin kết hợp tạo thành một mạng liên kết phủ đều trên giếng

Điều kiện để đọc kết quả iều kiện để đọc kết quả

* Không có sự ngưng kết ở các giếng chứng âm Trong trường hợp có hiện tượng ngưng kết ở các giếng chứng âm phải sử lý huyết thanh

bằng cách cho hấp phụ các yếu tố làm ngưng kết ngẫu nhiên trong huyết thanh thử nghiệm với các hạt gelatine không gắn kháng nguyên

và làm lại phản ứng

Đọc và biện luận kết quả ọc và biện luận kết quả

 Mẫu âm tính: không có sự ngưng kết ở cả hai giếng chứng âm và giếng phản ứng

 Mẫu nghi ngờ: không có sự ngưng kết ở giếng chứng âm, có sự ngưng kết không rõ ràng ở

giếng phản ứng

 Mẫu dương tính: không có ngưng kết ở giếng chứng âm, có ngưng kết rõ ở giếng phản ứng

Ưu điểm của kỹ thuật SFD

Dễ thực hiện Dễ thực hiện

Thao tác đơn giản Thao tác đơn giản

Có thể làm hàng loạt Có thể làm hàng loạt

Cho kết quả sau 2 giờ và đọc bằng mắt thường Cho kết quả sau 2 giờ và đọc bằng mắt thường Sinh phẩm có tính đặc hiệu cao Sinh phẩm có tính đặc hiệu cao

Tỷ lệ dương tính giả tương đối thấp hơn so với Tỷ lệ dương tính giả tương đối thấp hơn so với

kỹ thuật ELISA

Genscreen HIV1/2 version 2

Là kỹ thuật ELISA “sandwich” với hai giai đoạnLà kỹ thuật ELISA “sandwich” với hai giai đoạn

Sử dụng giếng microplate có gắn kháng nguyên tinh Sử dụng giếng microplate có gắn kháng nguyên tinh chế là các protein tái tổ hợp và tổng hợp của Gp160, p25 và gp36 của HIV1 và HIV2

Nếu trong mẫu thử có kháng thể kháng HIV1/HIV2, Nếu trong mẫu thử có kháng thể kháng HIV1/HIV2, kháng thể này sẽ gắn đặc hiệu với các kháng nguyên

cố định trên giếng

Cộng hợp được cho vào ở giai đoạn hai là kháng Cộng hợp được cho vào ở giai đoạn hai là kháng

nguyên đánh dấu bằng men Peroxidase

Phức hợp Kháng nguyênPhức hợp Kháng nguyên Kháng thểKháng thể Cộng hợp sẽ được Cộng hợp sẽ được phát hiện bằng phản ứng hiện màu với cơ chất