Lựa chọn hệ biểu hiện để sản xuất protein ở vi khuẩn Các chủng E.. AD494 đột biến trxB hỗ trợ tạo cầu disulfide tại vùng tế bào chất BL21 bất hoạt protease lon và ompT BL21 trxB
Trang 1Lựa chọn hệ biểu hiện để sản xuất protein ở vi khuẩn
(Các chủng E coli )
Các chủng E coli biểu hiện thịnh
hành
Một số chủng E coli biểu hiện
thịnh hành
Chủng Đặc điểm nổi bật
Trang 2AD494
đột biến trxB hỗ trợ
tạo cầu disulfide tại vùng tế bào chất
BL21 bất hoạt
protease lon và ompT
BL21 trxB
đột biến trxB hỗ trợ
tạo cầu disulfide tại vùng tế bào chất bất hoạt
protease lon và ompT
BL21
CodonPlus-RIL
hỗ trợ biểu hiện protein eukaryote với các codon hiếm như AGG, AGA, AUA, CUA
bất hoạt
protease lon và ompT
BL21 hỗ trợ biểu hiện
Trang 3CodonPlus-RP
protein eukaryote với các codon hiếm như AGG, AGA, CCC bất hoạt
protease lon và ompT
BLR
đột biến recA làm ổn
định các vùng lặp bất hoạt
protease lon và ompT
C41/ C43 đột biến dành cho biểu
hiện protein màng
JM 83
tiết protein tái tổ hợp
ra vùng ngoại vi tế bào chất
Origami B
đột biến trxB/gor hỗ
trợ cực tốt cho việc tạo thành liên kết disulfide
ở tế bào chất
Trang 4bất hoạt
protease lon và ompT
Rosetta-gami
hỗ trợ biểu hiện protein eukaryote với các codon hiếm như AUA, AGG, AGA, CGG, CUA, CCC và GGA
bất hoạt
protease lon và ompT đột biến trxB/gor hỗ
trợ cực tốt cho việc tạo thành liên kết disulfide
ở tế bào chất
Một số promoter biểu hiện
trong E coli
Trang 5Một số promoter biểu hiện trong E coli
Hệ biểu hiện
Mức độ biểu hiện (chất cảm ứng)
Đặc điểm nổi bật
lac promoter
từ thấp đến trung bình (IPTG)
biểu hiện yếu, có điều khiển;
thường thích hợp
để sản xuất những sản phẩm có nồng độ nội bào rất thấp chi phí
cảm ứng khá cao T7 RNA rất cao (IPTG) sử dụng T7
Trang 6polymerase RNA
polymerase Mức độ
biểu hiện rất cao
hệ thống
T7lac có
thể kiểm soát biểu hiện chặt chẽ trong trường hợp tạo chất có tính độc tế bào
chi phí cảm ứng khá cao, đ
Trang 7biểu hiện nền thường phụ thuộc
cả vào chủng vi khuẩn
Phage promoter
PL
tương đối cao (thay đổi nhiệt độ)
cần chủng
vi khuẩn riêng nh nhiệt
độ biểu hiện nền cao ở nhiệt
độ dưới 30°C không c chất cảm ứng
Trang 8tetA promoter
từ trung bình đến cao (an-hydrotetracyclin)
điều khiển chặt
Không ph thuộc mức
độ trao đổi chất và
chủng E
coli
chi phí cảm ứng khá thấp
Độ biểu hiện nền thấp
PRBAD promoter từ thấp đến cao
(L-arabinose)
có thể vi điều chỉnh mức độ
biểu hiện
Trang 9chi phí cảm ứng thấp Độ biểu hiện nền thấp
rha PBAD promoter từ thấp đến cao
(L-rhamnose)
điều khiển chặt Độ biểu hiện nền thấp chi phí cảm ứng khá thấp