Các công đoạn cần thiết trong qui trình sản xuất vaccine phòng cúm H5N1 cho người (tt) doc

Các công đoạn cần thiết trong qui trình sản xuất vaccine phòng cúm H5N1 cho ngườitt Bước 5: Đánh giá và chọn lựa virus ứng cử làm vaccine: Các dữ liệu về đặc điểm kháng nguyên và trì

Các công đoạn cần thiết trong qui trình sản xuất vaccine phòng

cúm H5N1 cho người(tt)

Bước 5: Đánh giá và chọn lựa

virus ứng cử làm vaccine:

Các dữ liệu về đặc điểm kháng

nguyên và trình tự gene cho phép

dự đoán chủng virus cúm sẽ lưu

hoành khoảng 8 tháng trong mùa cúm tới và chọn lựa virus H5N1

triển khai làm vaccine Ngay khi

chủng virus được chọn lựa làm

vaccine thì WHO sẽ khuyến cáo

trên website của WHO cho nhà sản xuất, các viện nghiên cưu, các

phòng thí nghiệm cúm quốc gia…

Bước 6: Sự tái tổ hợp virus cúm bằng kỹ thuật di truyền ngược:

Công đoạn này mất khoảng 6 tuần

và được thực hiện bởi WHO CC ở Atlanta, và Memphis, và các phòng thí nghiệm của FDA và NIBSC

Bằng kinh nghiệm trong nhiều năm nghiên cứu các nhà khoa học thấy rằng virus cúm A hoang dại phát triển kém trong trứng gà Để khắc phục trở ngại này, TS Edwin D

Kilbourne của trường New York

Medical College đã sáng chế ra kỹ thuật tái tổ hợp di truyền ngược

nhằm tạo ra chủng virus tái tổ hợp phát triển tốt hơn trong trứng gà

Kỹ thuật này cho phép 6 gene (mã hóa cho các protein NP, PA, PB1, PB2, M, NS) của virus cúm

A/Puerto Rico/8/34 (thường gọi là PR8) kết hợp với 2 gene mã hóa

cho protein HA và NA (của chủng khuyến cáo làm vaccine) đã được làm giảm độc lực tạo chủng virus mới mang đặc điểm kháng nguyên

HA và NA giống với chủng khuyến cáo làm vaccine và có thể phát triển trong trứng nhanh kịp thời cung

cấp vaccine khi có dịch xảy ra

Hình: Tạo vaccine cúm H5N1 bằng kỹ thuật di truyền ngược

Với virus H5N1, bằng công nghệ

di truyền ngược, người ta tạo ra

chủng virus cúm H5N1 giảm độc lực bằng cách loại bỏ vài acid amin tại vị trí phân cắt HA Sự tái tổ hợp

HA và NA (đã loại bỏ phần gây

độc) của virus H5N1 với các gene còn lại của chủng PR8 tạo nên

chủng virus giảm độc lực có thể

phát triển trong trứng gà Sau đó,

virus được giải trình tự gene, kiểm tra hình thái khuẩn lạc (plaquing),

và độ an toàn trong trứng, gà

và chồn sương trước khi chủng

virus được gửi đến các viện nghiên cứu và nhà sản xuất vaccine

Bước 7: Xác định đặc điểm

kháng nguyên và di truyền của chủng tái tổ hợp

Công đoạn này mất khoảng 4 tuần

và được tiến hành bởi WHO CCs ở Atlanta, London, Melbourne,

Memphis và Tokyo

Virus tái tổ hợp H5N1 được tiêm cho chồn sương để sản xuất kháng huyết thanh nhằm đảm bảo chủng virus tái tổ hợp có cùng đặc tính

kháng nguyên HA và NA của

chủng hoang dại WHO CCs và

NIBSC cũng giải trình tự gene HA

và NA của chủng virus tái tổ hợp

để đảm bảo rằng bấy kỳ sự thay

đổi nào là không ảnh hưởng đến

các acid amin quan trọng đồi với

tính kháng nguyên hay gây bệnh Nếu đặc điểm kháng nguyên và di truyền là không thoã mãn được nhu cầu sẽ phải tiến hành kiểm tra lại và chọn lựa lại virus ứng cử làm

vaccine

Bước 8: Đánh giá đặc tính phát triển của virus tái tổ hợp:

Công đoạn này mất khoảng 3 tuần

và được thực hiện bởi các nhà sản xuất vaccine

Trước khi virus tái tổ hợp được

chọn lọc làm vaccine ứng cử, các nhà sản xuất vaccine phải tiến hành kiểm tra đặc tính phát triển của

chúng trong tế bào nuôi cấy Virus ứng cử là vaccine H5N1 phát triển kém hơn virus cúm A ứng cử làm vaccine phòng cúm theo mùa hàng năm Đây là 1 thách thức lớn cho các nhà sản xuất nếu cần cung cấp lượng vaccne đủ lớn trong 1 thời gian thật ngắn khi có đại dịch xảy

ra

Bước 9: Chuẩn bị các hoá chất

cho vaccine bất hoạt:

Công đoạn này mất khoảng 6 tuần

và được tiến hành bởi nhà sản xuất vaccine và các phòng thí nghiệm

của FDA, NIBSC và TGA

Các hoá chất dùng cho vaccine

H5N1 bất hoạt được tiến hành bởi WHO CC ở Tokyo và các phòng

thí nghiệm quốc gia ở FDA,

NIBSC và TGA Các hoá chất này sao đó được chuẩn hoá bởi các

phòng thí nghiệm của FDA, NIBSC

và TGA

Sau tất cả những công đoạn chuẩn

bị trên được hoàn tất, virus tái tổ

hợp và các hóa chất đã sẵn có được

chuyển đến cho các nhà sản xuất và bắt đầu ngay vào công việc sản

xuất vaccine Tổng cộng thời gian sản xuất vaccine H5N1 cho người

là khoảng 28-52 tuần

Tài liệu tham khảo:

1 E Hoffmann et al,

2002 Eight-plasmid system for

rapid generation of influenza virus

vaccines Vaccine 20 (2002) 3165–

3170

2 Kanta

Subbarao Application of reverse

genetics to influenza vaccine

development.NIAID

3 Ilaria Capua and Stefano Marangon 2003 The use

of vaccination as an option for the

control of avian influenza OIE 71 SG/12/CS3 E

4 WHO 2007 A

description of the process of

seasonal and H5N1 influenza

vaccine virus selection and

development