protein tái tổ hợp HA và M2 của virus cúm gia cầm H5N1 trong vi khuẩn E.coli ppsx

protein tái tổ hợp HA và M2 của virus cúm gia cầm H5N1 trong vi khuẩn E.coli Bước đầu thu nhận một số kết quả biểu hiện protein tái tổ hợp HA và M2 của virus cúm gia cầm H5N1 trong vi

protein tái tổ hợp HA và M2 của virus cúm gia cầm H5N1

trong vi khuẩn E.coli

Bước đầu thu nhận một số kết quả biểu hiện protein tái tổ hợp HA và M2 của virus cúm gia cầm H5N1 trong vi khuẩn E.coli

Kể từ cuối năm 2003 đến nay, dịch cúm gia cầm H5N1 đã gây thiệt hại

về tài sản và con người ở nhiều nơi trên thế giới Hàng trăm triệu gia

cầm, động vật bị chết do virus H5N1 hoặc bị tiêu hủy để ngăn chặn sự lan rộng của dịch cúm Theo Tổ chức Y

tế thế giới (WHO), trong tổng số 328

ca được ghi nhận bị nhiễm cúm là đã

có 200 ca bị tử vong, trong đó Việt Nam đứng thứ hai trên thế giới, sau Indonesia, có số người tử vong do

cúm H5N1 là 46 ca (theo ghi

nhận của WHOđến

ngày10/09/2007) Hiện nay, chúng ta đang phải đối phó với một thử thách rất lớn do dịch cúm gia cầm H5N1 gây ra Một đại dịch cúm do H5N1

có thể xảy ra do con người không có kháng thể tồn tại đối với virus H5N1 này và do độc lực cao của chúng mà hiện nay vẫn chưa sẵn có vaccine

phòng bệnh cúm H5N1 Trước tình hình cấp thiết đó, chúng tôi tiến hành

nghiên cứu “Tạo kháng nguyên tái

tổ hợp HA, NA, M2 và NS1 của

virus cúm gia cầm H5N1 và thử

nghiệm đáp ứng miễn dịch” Mục

tiêu của chúng tôi là tạo 4 protein

biến đổi (ký hiệu là HAP, NAP, M2

và NS1) của virus cúm H5N1 làm

kháng nguyên Bốn protein này được nhân dòng và biểu hiện

trong E.coli BL21 thông qua plasmid

biểu hiện pGEX 4T-3 Bước đầu đã

có một số kết quả khả quan Chúng tôi đã biểu hiện thành công 2 protein tái tổ hợp HAP và M2 (có trọng

lượng tương ứng 46 kDa và 37 kDa)

trong E.coli BL21 Kết quả biểu hiện

đã được kiểm tra bằng điện di SDS-PAGE và Western blot Hàm lượng protein biểu hiện khá cao

Hình: Kết quả cảm ứng biểu hiện

protein HAP và M2

Giếng 1: BL21 sau 6 giờ cảm ứng

IPTG 0.5mM (phần không tan)

Giếng 2: BL21 sau 6 giờ cảm ứng

IPTG 0.5mM (phần tan)

Giếng 3: BL21-pGEX 4T-3 sau 6 giờ cảm ứng IPTG 0.5mM (phần không tan)

Giếng 4: BL21-pGEX 4T-3 sau 6 giờ cảm ứng IPTG 0.5mM (phần tan)

Giếng 5: BL21-HAP sau 6 giờ cảm

ứng IPTG 0.5mM (phần không tan) Giếng 6: BL21-HAP sau 6 giờ cảm ứng IPTG 0.5mM (phần tan)

Giếng 7: BL21-M2 sau 6 giờ cảm ứng IPTG 0.5mM (phần không tan) Giếng 8: BL21-M2 sau 6 giờ cảm ứng IPTG 0.5mM (phần tan)

Giếng 9: BL21-HAP sau 6 giờ cảm ứng IPTG 0.5mM (trước khi phá vở

tế bào)

M: thang protein (2-212 kDa, NEB)

Khi chúng tôi so sánh kết quả giải trình tự của protein tái tổ hợp HAP, M2 với dữ liệu của GeneBank cho thấy đoạn protein mà chúng tôi thiết

kế có độ tương đồng rất cao (100%)

so với các chủng thuộc clade 1 (ở

Việt Nam, Thái Lan, Campuchia,

Lào) và một số chủng thuộc clade 2 (ở Hàn Quốc, Trung Quốc) Với kết quả ghi nhận được cho chúng tôi hy vọng là sử dụng các protein này làm kháng nguyên thì tiềm năng rất lớn tạo được đáp ứng miễn dịch của các kháng nguyên là trên phổ rộng,

kháng lại nhiều chủng cúm H5N1

gây độc cao Đây là một kết quả thật

có ý nghĩa, mở ra triển vọng rất lớn trong nghiên cứu vaccine phòng

bệnh cúm gia cầm H5N1 Nếu việc nghiên cứu sản xuất vaccine protein tái tổ hợp này phòng được bệnh cúm H5N1 là thành công, sẽ góp phần rất lớn trong việc giảm bớt thiệt hại về tài sản và con người do virus H5N1

gây ra