Luận văn Áp dụng kỹ thuật sinh học phân tử phát hiện Đột biến gen btk gây bệnh suy giảm miễn dịch bẩm sinh thể không có gammaglobulin máu liên kết nhiễm sắc thể giới tính x

LỜI CAM ĐOAN Tôi là Ngô Mạnh Tiến, học viên lớp ao học khóa 16B-CNSH, Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội, chuyên ngành Công, nghệ Sinh học, xin cam doan: Day là công trình nghiên cứu của t

Trang 1

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BACII KIIOA IIA NOI

NGO MANH TIEN

ÁP DỰNG KỸ THUẬT SINI HỌC PHẪN TỬ PHÁT IIỆN DOT BIEN GEN 87K GÂY BỆNH SUY GIÁM MIỄN DỊCH BAM SINH THE KHONG CO GAMMAGLOBULIN MAU

LIEN KET NITEM SAC TIM GIOT TINITX

LUẬN VĂN TIIẠC SĨ KỸ THUẬT

CIIUYEN NGANIL CONG NGIIE SINIIIIOC

HA NOI - 2018

Trang 2

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRUONG DAI HOC BACH KHOA HA NOL

NGO MANII TIEN

AP DUNG KY THUAT SINH HQC PHAN 'TU PHAT HIEN

DOT BIEN GEN BTK GAY BENH SUY GIAM MIEN DICH

BẮM SINH TIIỄ KHÔNG CÓ GAMMAGIORULIN MÁU

LIÊN KÉT NHIỄM SẮC THẺ GIỚI TÍNH X

Chuyên ngành: Công nghệ sinh học

VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT

CÔNG NGHỆ SINH HỌC

NGƯỜI HƯỚNG DÂN KHOA HQC:

PGS TS KHUÁT HỮU THANIT

HẢ NỘI - 2018

Trang 3

CỘNG HÒA XÃ HIỘI CHỦ NGIĨA VIET NAM

Độc lập — Tự đo — [lạnh phúc

BẢN XÁC NHẬN CHỈNH SỬA LUẬN VĂN THẠC SĨ

1iọ và tên tác giả luận văn: Ngô Mạnh Tiến

Bể tài liận văn: “Áp dụng kỹ thuật sinh học phân tử phát hiện đột biến gen bịk gây bệnh suy giảm miễn dich bam sinh thé khang có gammaglebulin máu liên kết nhiễm sắc thê giới tính X”

Chuyên ngành: Công nghệ sinh học

Mai sd SV: CB160059

Tac giả, Người hướng dẫn khoa học và Hội đồng cham luận văn xác nhận tác

giả đã sửa chữa, bỏ sung luân văn theo biên bản họp Hội déng ngày 10/10/2018 với cáo nội dung sau

- Trang 1, phan mé dau, thay thé “Cytoplasmic tyrosine kinase” thành

“Bruton tyrosine kinase”

- Trang 4, mục 1.2.2, thay thế “Cytoplasmic tyrosine kinase” thinh “Bruton tyrosine kinase”

bảo mắm tạo máu” thành “tế bảo gốc tạo

mnáu”, thay thể “Tế bảo đầu déng lympho” thanh “Té bao

- Trang 8 muc 1.2.3.3, thay thế “Tế

~ Trmg 14, mục 1.4.2.1, thay thể “suy giâm miễn dịch phối hop tram trong”

thành “bệnh suy giám miễn dịch kết hợp nguy kịch”

Trang 4

Cầu trúc 3 chiều protem BTK

Sơ đỗ quy trình xác định đột biển gen 87% gây bệnh XLA

Anh dién di san pham POR khuéch đại gen BTK người bình thường Kết quả phân tích MLPA trên người bình thường,

Ảnh đột bién c.1735G>C (p.D$79H) trên gen 87K

Ảnh đột biến c.1908+3_11delinsC trên gen 87K”

Ảnh đột biến c.521-IG>A (p.IVS6-1G>A) trên gen B7X

Ảnh đột biến c.1578 1581 del (p.C527WfS*2) trên gen B7E

Ảnh diện di bệnh nhàn XUA-26 và X_LA-27 gen BTK

Kết quá phân tích MI.PA của bệnh nhân XLA-26 và XLA-27

Thân bố các dạng đột biến gen 87K _

ca 47

linh 3.11 Vị trí và tỷ lệ các đột biển gen 2 gây bệnh XLA ở oác bệnh nhân

Trang 5

DANH MUC CAC BANG

Thanh phan phan ting PCR

‘Trinh ty cp méi phan ứng PCR khuếch dai gen #7 Trinh ty méi phản ứng PCR môi đơn,

Thanh phan phân ứng PC mỗi don

Kết quá xác định đột biển bằng kỹ thuật giải trình tự gen

Danh sách đột biến mới trên gen BIKE

Kết quả xác định đột biển bằng kỹ thuật MI,PA, Kiểu gen của 31 bệnh nhân XL.A So ccc

Tỷ lệ các đột biên của gen BTK.

Trang 6

ca 47

Trang 7

1.1 Bệnh suy giảm miễn địch bAm sinh sec

1.2 Bệnh suy giảm miễn địch thé không gammaglobnlin mán liên lrết nhiễm sắc

In ¬

1,3,1 Vị trí và câu trúc gen BTK

1.3.2 Câu trúc vá chức năng protein [#IK< "—

1.3.3 Đặc điểm di truyền và đột biến gen BK - 11

1.4 Chấn đoán bệnh XL/A on nneeeiereraerroroo.T2

1.4.1 Tiêu chuẩn lâm sảng occcvsvvvverrrevrrrrree sessed

1.4.3 Xét nghiệm sinh học phản tử phân tich gen 8#ZE L8

1.5.2 Tỉnh hình nghiên cứu tại Việt Nam BH 4

vi

Trang 8

DANH MUC CAC BANG

Trang 9

LỜI CAM ĐOAN

Tôi là Ngô Mạnh Tiến, học viên lớp ao học khóa 16B-CNSH, Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội, chuyên ngành Công, nghệ Sinh học, xin cam doan:

Day là công trình nghiên cứu của tối trực tiếp thục hiện dưới sự hướng dẫn của thầy PGS TS Khuất Hữu Thanh

Công trình này không trùng, lặp với bắt kỷ nghiên cửu nào khác được công,

bổ tại Việt Nam

Các số liệu và thông tín trong nghiên cứu là hoàn loàn chính xác và trung thực, một phần đã được công bổ trên các tạp chi khoa học chuyên ngành với sự

đồng ý và cho phép của các đồng tác giả

Phân còn lại chưa được at công bồ trơng bắt kì công trình nào khác

Trang 10

~ Trang 35, mục 3.3.1, bổ sung “các đột biến được thể hiện ở phụ lục 3”

- Trang 37, mục 3.3.1, thay thé “sự sau khác trong quả trinh dịch mã tao mRNA” (hanh “lam thay đổi các vị trí bảo hiệu cho việc cất chính xác

lơ đoạn

introng”

- Trmg 40, múc 3.3.1, bổ sung “Các đột biển vùng phép nối exon/intron

cần phải khẳng định thêm bằng thực nghiệm thông qua phân tích mRMA.”

- Trang 47, mục 3.3.3, bỗ sung “Trong số 31 bệnh nhân nghỉ ngờ mắc

bệnh XL.A, 04 bệnh nhân có biểu hiện lâm sảng ”

gay 08 tháng 11 năm 2018 viên hướng dẫn Tác giá luận văn

CHỦ TỊCH HỘI ĐÔI

Trang 11

DANH MUC CAC BANG

Trang 12

LỜI CAM ĐOAN

Trang 13

LỜI CAM ĐOAN

Trang 14

In ¬

vi

Trang 15

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIET TAT

Tên đây đủ Nghĩa tiếng việt

Burton's tyrosine kinase

Cộng sự

Deoxyribomuelerie acid Dideoxynucleoside triphosphale Lthidium bromide

Kilo base

Ko Dallon

Multiplex Ligation-dependent Kỳ thuật khuếch đại đa môi dựa

Probe Amplification vào phân ứng nỗi

Ribonucleic acid Nhiễm sắc thể

Polymerase chain reaction Phan ứng chuỗi trùng hợp

Surface Immunoglobulin Khang thé bé mat

Single nucleotide Ba linh nucleotid don

polymorphisms

Suy giảm miễn dich

Suy giảm miễn địch bằm sinh

'Tư vấn di truyền X-linked agammaglobulinemia Hệnh suy giảm miễn địch bếm sinh

thể không gammaglobulin mau Bên kết nhiễm sắc thể giới tinh X

Trang 16

Fim xin chan thành cảm ơn B8 Ngõ Diễm Ngọc, trưởng khoa Di truyền và Sinh học phân tứ- Bệnh viện Nhi Trung Ương đã tạo đạo điều kiện chơ em hoàn thành nghiên cứu này

Tìm xin câm ơn các thấy cô bộ tuôn Công nghệ Sinh học và Công nghệ thực phẩm, trường Dại học lách Khoa L1 Nội đã truyền đạt kiến thức cho em trong quả trình học tập và rên luyện

Trong thời gian học lập và nghiên cứu em đã nhận được sự giúp đỡ lận tình đây động viên khích lệ của tập thẻ cán bộ nhân viên khoa Di truyền và Sinh học phân tử, em xin chân thành cảm on những giúp đỡ quý báu đỏ

Cuối cùng, pho phép cúm gửi lời cấm ơn chân thành tới gia dình, bạn bê dã luôn quan tâm, cô vũ chơ tôi vững bước trên con đường, học tập vả nghiên cửu

Ngô Mạnh Tiến

Trang 17

lơ đoạn

introng”

Trang 18

Ngô Mạnh Tiến

Trang 19

In ¬

vi

Trang 20

Cộng sự

Kilo base

Ko Dallon

polymorphisms

Trang 21

lơ đoạn

introng”

Trang 22

Ngô Mạnh Tiến

Trang 23

ca 47

Trang 24

LỜI CAM ĐOAN

Trang 25

lơ đoạn

introng”

Trang 26

Cộng sự

Kilo base

Ko Dallon

polymorphisms

Trang 27

ca 47

Trang 28

Ngô Mạnh Tiến

Trang 29

LỜI CAM ĐOAN

Trang 30

LỜI CAM ĐOAN

Trang 31

DANH MUC CAC BANG

Trang 32

In ¬

vi

Trang 33

ca 47

Trang 34

Ngô Mạnh Tiến

Trang 35

In ¬

vi

Trang 36

Cộng sự

Kilo base

Ko Dallon

polymorphisms

Trang 37

Ngô Mạnh Tiến

Tiêu đề	Áp dụng kỹ thuật sinh học phân tử phát hiện đột biến gen btk gây bệnh suy giảm miễn dịch bẩm sinh thể không có gammaglobulin máu liên kết nhiễm sắc thể giới tính x
Tác giả	Ngô Mạnh Tiến
Người hướng dẫn	PGS. TS. Khuất Hữu Thạnh
Trường học	Trường Đại Học Bách Khoa Hà Nội
Chuyên ngành	Công nghệ sinh học
Thể loại	Luận văn thạc sĩ
Năm xuất bản	2018
Thành phố	Hà Nội

Định dạng
Số trang	75
Dung lượng	152,45 KB