Báo cáo tổng hợp về sinh học thực phẩm,sinh học nông nghiệp,chế biến sản phảm nông sản, một số loại như nấm sò , mộc nhĩ

Báo cáo tổng hợp về sinh học thực phẩm,sinh học nông nghiệp,chế biến sản phảm nông sản, một số loại như nấm sò , mộc nhĩ

Phần mở đầu

Trờng THDL KTKT Thăng Long đợc thàn lập vào tháng 8 năm 2001 Với bốn khoa tin học, kế toán, du lịch và công nghệ sinh học thực phẩm, mỗi khoa có một u thế riêng, trờng đã tạo mọi điều kiện học tập cho các khoa, tin học có phòng máy, du lịch có bếp nấu ăn, công nghệ sinh học có phòng thí nghiệm Với ngành công nghệ sinh học thực phẩm chúng tôi là một ngành rất thiết thực tạo ra những sản phẩm thực phẩm phục vụ cho đời sống sinh học hàng ngày Đặc biệt chúng tôi còn tìm ra hớng tiêu thụ, bảo quản chế biến sản phảm nông sản, một số loại nh nấm sò , mộc nhĩ khi cha tiêu thụ đựơc chế biến quả nớc đờng và hơn nữa là biết phân lập và nhân giống đợc một số loại giống nấm ăn và nấm dợc liệu, nhân giống nấm men để tạo giống ban đầu phục vụ cho sản xuất

Do quỹ thời gian thực tập có hạn, bản thân cha có nhiều kiến thức thực tế, kinh nghiệm nghiên cứu còn hạn chế nên báo cáo khó tránh khỏi thiếu sót nhất

định Em rất mong nhận đợc ý kiến đóng góp chỉ bảo của thầy cô của trờgn để bài viết của em đợc hoàn thiện hơn

Qua đây em cũng xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu săc đến các cô Lê Thị Tuyết Mai và Đào Việt hà cùng chị Chi, hớng dẫn và giúp đỡ em hoàn thành báo cáo này

Nội dung của báo cáo đợc chia làm 3 phần chính:

Phần thứ nhất

Phần thứ hai:

A Sinh học thực phẩm

B Sinh học nông nghiệp

Phần thứ ba: kết luận

Phần thứ nhất:sinh học thực phẩm

Bài 1 kỹ thuật sản xuất các loại giống nấm men.

I.Chuẩn bị dụng cụ

- ống nghiệm ,bình tam giác ,phễu thuỷ tinh các loai ,que trang , hộp lồng(đĩa petri),que cấy ,pipet ,(1ml,5ml,10ml) đũa thuỷ tinh ,các loại bình tam giác 100ml,200ml,500ml,đợc rử sạch nhiều lần

- Để khô ráo hết nớc ,cho vào túi nilon buộc chặt miệng túi để thanh trùng

ở áp suất 1,3-1,4at thời gian 1h30’

II.chế tạo môi trờng để phân lập nấm men

1.Chế tạo môi trờng thạch:

Khoai tây ,carôt gọt vỏ rửa sạch thái lát mỏng ,giá rửa sạch cho vào xoong lấy nớc đun sôi trong 15-30’ thì lọc lấy dịnh chiết trong , ta cân các hoá chất và đổ vào môi trờng dịnh chiết trong trên(làm môi trờng nửa lít)

Khuấy đều cho tan hết hoá chất trong dịch chiết đó.Bịt miệng bình bằng nilon chịu nhiệt, cho vào nồi hấp áp lực ở 0.8 at trong thời gian 45 phút.Mục đích

là làm cho tan thạch

Hấp xong 45 phút lấy môi trờng đổ qua phễu vào 10 ống nghiệm lợng đổ vào khoảng 1/3 ống tránh để môi trờng dính vào đầu ống nghiệm.Nút bông vào

10 ống nghiệm cho vào túi nilon chịu nhiệt và đi hấp lần 1 thời gian là 1 h 30’ở

áp suất là 0.8 at(không hấp cao hơn đờng sẽ cháy ,môi trờng sẽ bị đen- còn gọi là caramen hoá)

-Hấp xong lần 1 lấy ra để nguội ở nhiệt độ thờng 24 h sau hấp lại lần 2 cũng ở 0.8 at thời gian là 1h 30’(hấp 2 lần để đảm bảo diệt hết đợc những tế bào

vi khuẩn còn lại trong môi trờng )

Môi trờng hấp xong lần 2 lấy ra đặt nghiêng 10 ống nghiệm sao cho thạch không dính lên bông còn ,môi trờng còn lại ở bình tam giác đổ vào hộp lồng petri

2.Đổ môi trờng vào hộp lồng petri.

Hộp lồng petri( đã đợc thanh trùng )khi lấy ra cho vào buồng cấy vô trùng thời gian bật đèn cực tím 15-30 phút sau đó tắt đi,15 phút sau bắt đầu vào cấy.Lúc cấy ta lau cồn vào tay và mặt bàn cấy

Môi trờng vào petri thì mở hé độ dày đổ là 3 mm.Thao đổ càng nhanh càng tốt để tránh môi trờng bị đông lại, để thạch trong hộp lồng nguội và đông

cứng hoàn toàn thì ta lật hộp lồng để mặt thạch quay xuống dới để ở nhiệt độ th-ờng

3.Phân lập nấm men.

Kiểm tra lại môi trờng đổ vào hộp lồng sau 24h nếu hộp lồng nào bị nhiễm

ta tiến hành loại bỏ ngay,còn lại tiến hành phân lập nấm men.Lấy một ít men khô (khoảng nh hạt gạo)

cho vào 10 ml nớc cất nguội ,lắc thật đều cho tế bào men phân tán hết trong nớc.ta bật đèn cồn ,vô trùng tay và mặt bàn cấy trớc khi cấy

Dùng ống hút 1 ml đã vô trùng lấy một ít dịch mở hé petri nhỏ 1 đến 2 giọt lấy que trang đã vô trùng trang đều mặt thạch tránh cho thạch bị xứơc cấy xong lấy báo bọc kín để ở nhiệt độ thờng sau 24 đến 36 h trên mặt thạch mọc lên những con khuẩn lạc.Lấy một chút khuẩn lạc bỏ vào 10 ml nớc đã vô trùng rồi kiểm tra trên kính hiển vi xác định nấm men thuần

Ta kiểm tra nếu thấy hộp lồng nào bị nhiễm ta loại bỏ còn những hộp lồng nào không bị nhiễm ta chọn để nhân sang ống thạch nghiêng

4.Cách cấy

Vô trùng phòng cấy : ta đa hộp lồng đã kiểm tra có chứa nấm men và ống thạch nghiêng vào phòng cấy thực hiện thao tác cấy truyền ,bật đèn cồn dùng que cấy nấm men đầu tròn lấy một chút khuẩn lạc trên hộp lồng cấy rích rắc lên mặt phẳng nghiêng Đóng nút bông trên ngọn lửa đèn cồn thao tác thực hiện nhanh ,xong để ở nhiệt độ thờng sau 2 ngày khuẩn lạc sẽ mọc lên theo đờng cấy rich rắc trong ống thạch nghiêng,sau ta kiểm tra ống nào bị nhiễm thì loại

bỏ Nếu ta dùng dần thì bảo quản lạnh

III.Cách nhân giống nấm men.

1.Chế tạo môi trờng

Cân 400 g malt đã nghiền nhỏ chia đều ra 4 bình tam giác 500 ml và đổ n

-ớc ấm 40-450C vào 4 bình mỗi bình trên 500 ml nớc

Tiến hành đờng hoá để 4 bình vào xoong đun cách thuỷ nâng nhiệt độ các

dịch chuyển sang màu trắng sữa thì kết thúc quá trình đờng hoá Trong suốt quá trình đờng hoá ta dùng đũa thuỷ tinh khuấy liên tục để malt đạt đợc độ đờng hoá cao nhất.Trong quá trình đờng hoá malt không nên nâng nhiệt độ lên quá và cũng không nên đờng hoá ở nhiệt độ thấp quá dẫn tới dịch đờng thu đợc có độ đ-ờng thấp

Dùng khăn vải xô lọc bỏ bã malt chiết dịch trong lấy khoảng 2.5 l.Dịch

đ-ờng vào ống đong 500 ml dùng dụng cụ đo độ đđ-ờng thả vào trong dịch phải để

thì phải pha thêm đờng kính trắng hoặc đờng hoá thêm malt hoặc thêm nớc cất nếu độ đờng cao hơn

Sau khi đo xong ta đổ dịch malt vào và chia ra 10 ống nghiệm mỗi ống 10

ml ,6 bình tam giác 200 ml,9 bình tam giác 100 ml , 12 bình tam giác 30 ml

Tất cả đậy miệng bằng nút bông và bọc lại bằng nilon chiu nhiệt cho vào nồi hấp để thanh trùng lần 1 ở 0.8 at thời gian 1 hâSau 24 h sau hấp lại lần 2 cũng nh lần 1

2.Nhân giống F1

Môi trờng chuẩn bị và thanh trùng kĩ 2 lần để nguội ta thực hiện nhân giống F1

-Bật đèn cực tím 15-20’rồi tắt đi 15’sau là nhân giống đợc ,ống giống F 1

đợc nhân là ống nghiệm 10ml ta đem 10 ống nhgiệm và môi trờng cần cấy giống vào ,bật đền cồn và thực hiện các thao tác cấy trên ngọn lửa đèn cồn xong

ta để ở nhiệt độ thờng thực hiện nhân giống đợt tiếp

3.Nhân giống F2 và F3 tạo giống sản xuất

Ta lấy 9 ống từ 10 ống nghiệm thực hiện cấy truyền còn 1 ống dùng để kiểm tra sự phát triển của nấm men

Nhân giống F2 :Sau khi cấy đợc 24h ta lấy ống giống F1 dùng để nhân giống F2 lắc đều ống nghiệm cho tan hết chất kết lắng và đổ vào bình chứa 30ml dịch môi trờng hơ bình và đóng nút bông trên ngọn lửa đèn cồn

Để nhân giống F3 thì sau 24h ta lại tiếp tục lấy giống F2 cấy vào bình 100ml ta đợc giống nấm men F3 dùng để sản xuất nếu cha dùng ngay thì cần bảo quản lạnh

Trong quá trình nhân giống ta luôn luôn phải kiểm tra sự phát triển của nấm men

Kiểm tra giống F1:(lấy một lọ đã đánh dấu đợc cấy truyền từ F1 đến F3 để kiểm tra liên tục lọ đó )

Pha loãng môi trờng (cách pha dùng pipet 1ml lấy 1mlgiống cho vào 10ml nớc cất đợc tỷ lệ 1/10tiếp tục lấy 1ml ở 1/10 pha với 10ml nớc cất ta đợc tỷ lệ 1/100)

Kiểm tra giống là tỷ lệ 1/100 ta dùng kính hiển vi điện tử đếm số tế bào nảy trồi, chết bằng cách nhuộm xanh metylen ở 3 kính trờng khác nhau đợc :

-Nảy trồi :1/3, 0/3, 2/12.

-chết :0/3, 1/3, 2/12

KIểm tra giống F2 :cũng nh F1 ta đếm đợc

-Nảy trồi :0/5, 0/8 ,0/3

-Chết :0/5 ,0/8, 1/3

Ta dùng giống nấm men F3 để lên men bia và một số sản phẩm thực phẩm chính mỗi loại thực phẩm cần một lọng giống nhất định

Bài 2 Kỹ thuật lên men để sản xuất một số sản phẩm thực phẩm chính

I lên men bia.

Đờng hoá 600g malt đã đợc nghiền nhỏ cũng đun cách thuỷ thời gian và nhiệt độ nh làm giống ta tiến hành thử iot thấy dịch đờng chuyển màu trắng sữa

là đợc Xong ta lấy khăn vải xô lọc lấy dịch trong khoảng hơn 3l .Dung dịch malt này để nguội đến 200C ta đo đợc độ đờng là 130Bx đạt độ đơng cho phép

1g/11 dung dịch này đợc đun trong 1h để ngập 2/3bình .Tiến hành lọc bã hoa ,đậy nút bình đem hấp lần 1 với p=0,8at thời gian 1h , sau 24h hấp lần 2 thời gian và nhiệt độ nh lần 1

Sau khi đờng hoá malt ta để lại 1 ít lợng để chuẩn độ dịch đờng ,chuẩn tới khi màu xanh không còn là đợc Xác định hàm lọng đờng khử bằng phơng pháp lain –reynol

Dùng pipet lấy :2,5ml feling A ,2,5ml felingB, 10ml nớc cất,3 giọt xanh metylen lắc đều đun 3-4’sôi đều thì chuẩn độ đờng Ta tính số mg đờng trong 1l dịch malt lấy trung bình 3 lọ ta đợc

Fx0.005x5x100/m=2.5xf/m(g/100ml)

=2,5x1/0,4(g/100ml)

0,005:lọng glucozetơng ứng với 1mlhỗn hợp feling (g)

m :số ml dịch đờng tiêu hao để làm mất màu xanh metylen

F :hệ số hiệu chỉnh hỗn hợp feling (F=1)

5 :số ml hỗn hơp feling A+B

Mà hàm lợng đờng chuẩn đợc là 0,4ml

-Kỹ thuật lên men chính bằng cách làm lạnh :Dịch malt đợc thanh trùng lần 2 xong thì cho vào phòng cấy vô trùng để thực hiện quá trình lên men bia Để nguội sau khi thanh trùngthì ta cấy giống nấm men bia ta đã nhân trong bình tam giác 100mlcủa men đã phát triển ,ta lắ dịch lên rồi thực hiện cấy trên ngọn lửa

đèn cồn phải hơ miệng 2bình đổ lợng dịch sang bình tam giác chứa 500mldịch

malt vừa thanh trùng xong để nguội Giữ ở nhiệt độ lạnh8-10 thực hiện quá trìng lên men chính Trong suốt quá trình lên men chính cứ 2 ngày ta kiểm tra quá trình 1 lần

Sau 2 ngày lên men chính ta kiểm tra lần 1

Cũng cách pha loãng 1/100 ta kiểm tra sự phát triển của men Mỗi lần kiểm tra ta lấy 50mldịch ta đợc :PH=4,3

Số ml dung dịch đờng tiêu hao để làm mất màu xanh metylen :m=3,6ml Làm tiêu bản đếm số tế bào nảy trồi ,chết bằng cách nhuộm xanh metylen

ở 3 kính trờng khác nhau đợc :

-Nảy trồi :0/7,0/7,1/5

-Chết :1/7,1/7,2/5

Sau 4 ngày lên men chính :

PH=4,5

Dịch đờng tiêu hao là m=4,06ml

Số tế bào nảy trồi ,chết :

-Nảy trồi :1/7,0/4,0/20

-Chết :0/7,0/4,0/20

Sau 6 ngày lên men chính :

PH=4,6

Dịch đờng tiêu hao là m=7,8ml(g/100ml)

Số tế bào nảy trồi ,chết :

-Nảy trồi :2/8,3/8,0/19

-Chết :0/8,1/18,2/19

*Nhận xét :Sau quá trình lên men chính ta thấy quá trình biến đờng thành rợu và CO tăng Chất dinh dỡng trong dịch ổn định tạo điều kiện thuận lợi cho nấm men sinh trởng và phát triển,sản phẩm của quá trình lên men chính là bia non có vi đắng nhiều bọt và có màu vàng

Lấy bình tam giác chứa dịch lên men chính ta gạn lấy dịch trong cho nvào

lọ vitan để ở nhiệt độ 0-40Ctrong thời gian 20-180 ngày để lên men phụ

Trong quá trình lên men phụ cần xác định độ axit của dịch lên men :Lấy

phenol ftalein lắc đều Dùng NaOH 0,1 N chuẩn cho tới lúc dịch lên men chuyển sang màu hồng nhạt

X= =0,2V

V:Số mlNaOH 0,1N dùng để chuẩn

10:Hệ số quy đổi dung dịch NaOH 0,1 N ra NaOH 1N

Ta dùng hết 13,5ml để chuẩn độ Vậy

X=0,2x13,5=2,7

Ta kiểm tra PH=4,6

Lợng đờng khử dùng là 18,4ml

II.lên men rợu

1.Sản xuất các loai nấm men rợu

Làm môi trờng nớc :

Làm nh môi trờng giống men bia ,nhng thêm hoá chất :

- (NH4)2SO4 : 0,5g

Trên đây là làm cho môi trờng 1/2lít

Khuấy đều cho tan hoá chất và môi trờng chiết trong ở trên ,ta lấy cho vào 2 bình tam giác nhỏ mỗi bình 100ml và 2 ống nghiệm mỗi bình 10ml Đậy nút bông và đem hấp 45’với áp suất 0,8at ,thanh trùng xong để nguội lấy giống

đã đợc phân lập trên mặt thạch nghiêng cấy truyền vào ống nghiệm 10ml, phơng pháp cấy truyền làm nh giống men bia trong phòng cấy đã đợc vô trùng

Xong để ở nhiệt độ thờng 24h sau kiểm tra nếu không bị nhiễm ta lại cấy truyền sang ống 100ml , kiểm tra tiếp và lại cấy truyền sang bình tam giác còn lại môi trờng men này dùng để sản xuất

a.Men khô có độn

Dùng 0,5kg bột gạo tẻ sử dụng môi trờng men nớc đã nhân ở trên nhào với bột (không nhão ,không khô) để ủ trong 8-10h ở nhiệt độ thờng sau đó viên thành những viên nhỏ ,phơi khô cho vào túi nilon hàn kín miệng túi rồi để nơi khô ráo dùng dần

b.Lên men tạo thành nớc uống có gaz.

Nguyen liệu quả chín tơi giàu đờng (dứa ,xoài ,mít )gọt sạch vỏ bỏ hạt rửa sạch bằng nớc ozon rồi xay nhỏ bằng máy xay sinh tố ,ta tiến hành lọc trong nớc

đổ nớc quả vào bình (đã thanh trùng ) bịt kín miệng bình rồi đem đi thanh trùng

ở 0,5at và giữ trong thời gian 20’

Thanh trùng xong lấy ra để nguội nhiệt độ 30-320Cthì cấy giống men vào (dùng men bia cấy lợng nhỏ bằng hạt gạo )vẫn bịt kín sau 24h có thể sử dụnh

đ-ợc

Kết quả của quá trình lên men nớc hoa quả thu đợc nớc uống lên men có

vị ngọt ,có gaz,có mùi vị đặc trng cho từng loại quả khác nhau nhng đều phải có màu vàng sáng mùi thơm dễ chịu

c.Lên men sản xuất rợu từ tinh bột gạo

Gạo nếp lật (xay bỏ vỏ trấu )đem đồ lần 1thời gian 30-45’cho gần chín tuỳ sô lợng gạo xong cho ra giá vo nhẹ qua nớc lạnh rồi để ráo đem đồ lần

2 .để nguội rồi rắc men bánh khô vào với tỷ lệ 1kg cho 3-4 bánh men khô ta rắc theo từng lớp nh: men –lớp gạo –men để 2-3 ngày là ănđợc khi ăn thấy có

vị ngọt rất ngon

Bài 3 kỹ thuật lên men bbột mì và sữa

I.Lên men bột mì

-20gđờng kính trắng

-20g men khô

đổ vào trộn với 1kg bột mì nhào trộn kỹ Rồi lại 3-4h cho bột nở (khi nào thấy khối bột nở 2-3 thể tích khi mới nhào trộn ) thì ta dùng khối bột này để tạo ra các sản phảm khác nhau :bánh mì quẩy ,bánh bao

Chú ý :Tuỳ theo sản phẩn có thể cho các phụ gia khác nhau :

+Bánh mì mặn cho thêm 1%đờng ,1,2% muối ăn

+Bánh ngọt cho 10%đờng

II.Lên men sữa

Sữa lên men có thể tạo ra rất nhiều sản phẩm khác nhau

vv

phần thứ hai :sinh học nông nghiệp

Bài1 .kỹ thuật sản xuất một số loại giống nấm chính

*Chuẩn bị dụng cụ :đèn cồn ,que cấy ,bình thuỷ tinh ,ống nghiệm ,bông nút ,lọ giống cấp 2

túi pp4cchịu nhiệt

*Nguyên liệu :thóc tẻ ,thạch,pepton , cám gạo tẻ ,bột nhẹ CaCO3 và một

số nguyên phụ liệu khác

*Thiết bị :tủ ấm, tủ sấy, tủ lạnh ,nồi cách thuỷ ,cân kỹ thuật ,buồng cấy vô trùng

I.sản xuất ban đầu

1.Chế tạo môi trờng thạch

-200g giá đỗ

-200gkhoai tây

-100g carot

Carot,khoai tây gọt vỏ sạch thái lát giá đỗ rửa sạch đổ nớc vào đun sôi khoảng 20-30’ sau đó lọc lấy dịch chiết trong

Các hoá chất :

Trên đây ta làm môi trờng 1lit Ta lấy dịch chiết trong khuấy tan cùng các hoá chất lấy chun buộc lọ đem môi trờng vào hấp cho tan thạch ở 0,8at trong thời gian 45’.đủ thời gian rót môi trờng qua phễu vào 1/3 ống nghiệm ,nút bông lại bó 10 ống một ,dùng túi nilon chịu nhiệt bọc để tránh nút bông bị ớt cho môi trờng vào hấp thanh trùng lần 1 thời gian 1h30’ở áp xuất 0,8at Sau 24h hấp lại lần 2cũng thời gian và nhiệt độ nh lần 1

Chú ý :Thanh trùng các lần đến 0,5at thì xả để đuổi hết không khí và cho

lên 0,8at thì mới tính thời gian

Kết thúc quá trình hấp ta đem ống nghiệm ra đặt nghiêng trên mặt phẳng

đầu ống nghiệm có kê giá đỡ để tránh nút bông bị dính vào môi trờng thì sẽ bị nhiễm ngay Khi thạch đã đông cứng để ở nhiệt độ thờng khoảng 2 ngày theo dõi thì có thể dùng để cấy mô hoặc nhân giống đợc

2.cấy mô tạo giống ban đầu

Quả thể chọn để cấy môphải to nhiều thịt và khô ráo -đặc trng cho từng loại ,khi lấy mẫu phải đựng vào túi nilon vô trùng

Thực hiện phân lập :Trớc khi phân lập ta bật đèn cực tím 15-20’để vô trùng phòng cấy sau 15’ thì có thể vào cấy trớc lúc cấy phải lau tay và mặt bàn cấy bằng cồn

Dùng dao mảnh tách một chút mô nấm ở chỗ tiếp giáp giữa cuống nấm vtán nấm cấy vào chính giữa mặt thạch nghiêng trong ống nghiệm tránh xây xát

mặt thạch ta nuôi nấm ở nhiệt độ 30-320Csau 6-7 ngày sợi nấm sẽ ă trắng hết trên mặt ống thạch nghiêng Kiểm tra loại bỏ các ống bị nhiễm khuẩn ,nhiều nấm mốc và các hiện tợng di dạng khác ta sẽ có ống giống nấm cấy mô ban

đầu Để có thể dùng dần ta cần bảo quản lạnh nhnh chỉ ở nhiệt độ 15-160c

3.Nhân giống cấp 1

Môi trờng thạch và cách làm môi trờng thạch giống nh cách làm cho môi trờng cấy mô.Chọn những ống nghiệm cấy mô mà sợi nấm ăn kín trắng đều trên mặt thạch nghiêng Lấy một chút sợi nấm ở ống giống ban đầu đặt ở giữa mặt thạch nghiêng tránh xây xát mặt thạch nghiêng ,để ở nhiệt độ ấm một tuần sau sợi nấm phát triển trắng nh bông ta đợc ống giống goi là giống cấp1

Chú ý :Thao tác cấy trong phòng vô trùng

III.sản xuất giống cấp 2

1.Chế tạo môi trờng

Sử dụng thóc tẻ làm môi trờng của giống cấp2 cách làm :

-dùng thóc tẻ hạt dai loai không dính ,khô ráo(thuỷ phần của thóc khoảng 13%) đem ngâm cho ngập trong nớc thời gian khoảng từ 6-8h tuỳ theo khí hậu ngoài trời thì ta đem đãi thóc ,nhặt sỏi sạn Xong cho vào xong luộc chí thóc nhìn thấy thóc nứt vỏ thấy bột ở trong và mềm là đợc

Chú ý :thóc không đợc luộc nát quá(kĩ quá)khi cấy giống dễ bị

nhiễm,luộc không nứt nấm khó phát triển

Luộc xong vớt thóc ra rổ giá ,để ráo nớc và nhặt hạt đen nát quá

Bổ sung thêm các hoá chất và chất phụ trợ 0,2%pepton,0,1%K2HPO4, 0,1%(NH4)2SO4, 3%cám gạo tẻ ,0,1%bột nhẹ CaCO3 so với lợng thóc ,trộn đều với thóc nếu khô quá cho thêm một ít nớc đủ ẩm Ta lấy chai khô rửa sạch cho thóc vào chai thuỷ tinh không cho đầy để còn đủ chỗ cấy giống Ta đậy nút bông

và bịt nilon chịu nhiệt đem đi thanh trùng lần 1 ở 1,3at thời gian 1h30’,24h sau

ta lại thanh trùng lần 2 cũng nh lần 1 về áp suất và thời gian

Hấp xong lần 2 ta để nguội rồi đem vào phòng cấy giống để cấy

Chú ý :khi hấp 2 lần trên đến 0,5 at để đuổi hết không khí và đến 1,3atthì

tính giờ giữ ở nhiệt độ đó

-Phòng cấy phải đợc bật đèn cực tím trớc khi cấy 15-20’sau đó mới vào cấy giống khi cấy ta lau tay và mặt bàn cấy bằng cồn cấy trên ngọn lửa đèn cồn

2.Cách cấy giống

Hơ chai thóc và giống cấp 2 ở đầu ống ,rồi ta dùng que cấy đợc vô trùng lấy1/3hoặc 1/2 ống giống cấp1 (lấy cả thạch) kều nhẹ nhàng sang chai sao cho