Bài giảng Kỹ thuật nuôi cấy virus: Chương 4 - Kỹ thuật thu nhận và bảo quản virus

Bài giảng Kỹ thuật nuôi cấy virus: Chương 4 - Kỹ thuật thu nhận và bảo quản virus được biên soạn với các nội dung chính sau đây: Các kỹ thuật thu nhận virus sau nuôi cấy; Các kỹ thuật bảo quản virus. Mời quý thầy cô và các em cùng tham khảo!

VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC & CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM

SCHOOL OF BIOTECHNOLOGY AND FOOD

TECHNOLOGY

Chương 4: Kỹ thuật thu nhận và bảo quản virus

4.1 Các kỹ thuật thu nhận virus sau nuôi cấy 4.2 Các kỹ thuật bảo quản virus

Mục đích:

- Loại bỏ các thành phần không mong muốn

- Có thể thực hiện bằng:

+ Ly tâm + Lọc + Sắc ký

Siêu ly tâm:

- Được sử dụng để tách và tinh sạch các kháng nguyên trong sản xuất vaccine

- Cũng được sử dụng để loại bỏ tế bào chết và xác tế bào,…

- Vaccine cúm, dại, viêm gan B, viêm não Nhật Bản

- Các loại ly tâm được sử dụng:

+ Ly tâm phân đoạn + Ly tâm gradient

Ly tâm phân đoạn:

4.1 Các kỹ thuật thu nhận virus sau nuôi cấy

Ly tâm gradient:

trọng của chúng

+ Rate-zonal centrifugation: kích thước, hình dạng, tỷ trọng + Isopycnic centrifugation: tỷ trọng

dịch để đẩy dung dịch đi qua màng lọc

+ Lọc vuông góc + Lọc dòng ngang (lọc tiếp tuyến)

4.1 Các kỹ thuật thu nhận virus sau nuôi cấy

Siêu lọc:

của các hạt được giữ lại ở bề mặt màng

Sắc ký:

phân bố của chúng giữa hai pha động và tĩnh

+ Sắc ký lọc gel + Sắc ký trao đổi ion + Sắc ký ái lực

4.1 Các kỹ thuật thu nhận virus sau nuôi cấy

Quy mô PTN

Quy mô Công nghiệp

Sự bất hoạt virus là làm cho virus mất khả năng xâm nhiễm:

- Tác động vào lớp vỏ hoặc capsid và làm mất đi khả năng xâm nhiễm hoặc tương tác với tế bào chủ

- Phá hủy DNA/RNA và ngăn chặn sự sao chép

Vi khuẩn:

Kỹ thuật bất hoạt

4.1 Các kỹ thuật thu nhận virus sau nuôi cấy

* β-propiolactone:

- Bất hoạt virus dại

* Glutaraldehyde:

- Bất hoạt thành phần độc tố trong vaccine ho gà

- Bất hoạt vi sinh vật hoặc độc tố

- Được loại đi khỏi vaccine

- influenza virus, poliovirus, and diphtheria và tetanus toxins

4.2 Các kỹ thuật bảo quản virus

Đặc tính của sản phẩm đông khô:

- Không thay đổi tính chất ở cả dạng khô và sau

khi hoàn nguyên

Ưu điểm:

- Loại nước ở nhiệt độ thấp

- Phù hợp cho các vật liệu nhạy cảm với nhiệt

- Phù hợp để thực hiện vô trùng

- Phân chia liều lượng chính xác

- Khả năng vô trùng được duy trì

Nhược điểm:

- Kháng nguyên có thể bị phá hủy bởi stress đông đá, đông khô

- Sản phẩm có thể xảy ra sự oxi hóa do độ xốp cao

và bề mặt tiếp xúc lớn

- Giá thành cao

- Thời gian dài