Bài giảng nuôi cấy tế bào động vật – kĩ thuật và ứng dụng bài 2 – ts vũ bích ngọc (2017)

SINH HỌC CỦA TẾ BÀO ĐỘNG VẬT Đặc điểm sinh học của tế bào Các yếu tố ảnh hưởng đến sự thành công của nuôi cấy tế bào 10/1/17 TS.. Chu kì tế bào M Mitosis G1 Gap1 G2 Gap2 G0 S Synthes

10/1/17 TS Vũ Bích Ngọc-vbngoc@hcmus.edu.vn 1

SINH HỌC CỦA TẾ BÀO ĐỘNG VẬT

Đặc điểm sinh học của

tế bào

Các yếu tố ảnh hưởng đến sự thành công của nuôi cấy tế bào

10/1/17 TS Vũ Bích Ngọc- vbngoc@hcmus.edu.vn

ĐẶC ĐIỂM CỦA TẾ BÀO ĐỘNG VẬT

Tính cơ học yếu (dễ vỡ)

Tăng trưởng, phân chia chậm (20-40 giờ) Hiệu suất sinh chất có hoạt cnh sinh học thấp

10/1/17 TS Vũ Bích Ngọc- vbngoc@hcmus.edu.vn

Chu kì tế bào

M Mitosis

G1 Gap1

G2

Gap2

G0

S Synthesis

G1 check point

•  cell big

•   environment suitable

G2 check point

•  DNA replicated

•  cell big

•   environment suitable

Metaphase check point

•  chromosome align on spindle

Chu kì tế bào

•  Interphase:

–  Nhìn chung kéo dài từ 12-14 giờ trong mô động vật có vú

–  Tế bào đang tổng hợp RNA,tạo protein và phát triển về kích thước

•  Gap 0 (G0): tế bào thoát ra khỏi chu kì tế bào và không phân chia

•  Gap 1 (G1): tế bào gia tăng kích thước, tổng hợp RNA và protein, có 1 G1

Checkpoint

•  S Phase: sự nhân đôi DNA xảy ra

•  Gap 2 (G2): tế bào sẽ cếp tục phát triển và sản xuất các protein mới Có 1 G2

Checkpoint

•  Mitosis hay M Phase:

–  Sự phát triển và tổng hợp protein

–  Tế bào chia thành 2 tế bào giống nhau

–  Mitosis thường xảy ra từ 1-2 giờ

–  Có Checkpoint trong giữa kì của Mitosis (Metaphase Checkpoint) để đảm bảo

tế bào hoàn thành xong sự phân chia

•  Là điểm quan trọng quyết

định sự phân chia của tê

sbaof

•  Khi tế bào vượt qua điểm

này, đi vào phase S, quá trình

phân chia không thể đảo

ngược

Chu kì tế bào

•  Đảm bảo tế bào phân chia thuận lợi

•  Nếu tế bào bị lỗi hoặc tổn thương, G” checkpoint sẽ dừng lại để sửa chữa

•  Nếu tổn thương không thể đảo ngược, tế bào đi vào quá trình apoptosis à đảm bảo DNA hư hỏng tế bào không truyền cho thế hệ sauà quan trọng trong ngăn ngừa ung thư

Chu kì tế bào

Chu kì tế bào

SỰ TĂNG SINH IN VITRO

•  Sự TĂNG SINH của tế bào trong nuôi cấy phụ thuộc:

–  Trạng thái tự nhiên của tế bào:

•  Vai trò của bộ gen – Giới hạn Hayflick

•  Vai trò của sự biểu hiện gen

–  Môi trường nuôi cấy

•  Cơ chất tế bào bám

•  Thành sinh lí và sinh hoá của môi trường nuôi

•  Thành phần của phase khí

•  Nhiệt độ nuôi

•  Tương tác tế bào-tế bào và tế bào-chất nền

trong suốt quá trình nuôi trong khi ở hASC, rASC,

hBMMSC thời gian này tăng gấp 2

Izadpanah R, Trygg C, Patel B, et al Biologic ProperŠes of Mesenchymal Stem Cells Derived

From Bone Marrow and Adipose Tissue Journal of cellular biochemistry 2006;99(5):1285