Mô hình đánh giá hoạt tính chống béo phì liên quan đến enzyme lipase của cây acacia mearnsii (keo đen mearnsii)

MÔ HÌNH ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH CHỐNG BÉO PHÌ LIÊN QUAN ĐẾN ENZYME LIPASE CỦA CÂY ACACIA MEARNSII KEO ĐEN MEARNSII NHÓM 11... Tác hại của bệnh Béo phì Gây ra các vấn đề về thẩm mỹ và tâm s

MÔ HÌNH ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH

CHỐNG BÉO PHÌ LIÊN QUAN ĐẾN ENZYME LIPASE

CỦA

CÂY ACACIA MEARNSII

(KEO ĐEN MEARNSII)

NHÓM 11

TỔNG QUAN

01

• Tình hình bệnh hiện tại

• Béo phì và tác hại

Tỷ lệ thừa cân / béo phì

theo mức thu nhập quốc

gia

a Quốc gia có mức thu nhập cao

Tỷ lệ thừa cân / béo phì

theo mức thu nhập quốc

gia

b Quốc gia có mức thu nhập thấp và trung bình

o phì

Tác hại của bệnh Béo phì

 Gây ra các vấn đề về thẩm mỹ và tâm sinh lý

 Nguy cơ quan trọng dẫn đến các bệnh nguy hiểm

Việc phòng ngừa và điều trị béo phì là cách để giảm

tỷ lệ hiện mắc và tỷ lệvong của các bệnh m tử

ãn tính

Thuốc ức chế lipase ngoại vi

Thuốc

ức chế thèm ăn trung ương

Lipase là một liên kết este đặc biệt để thủy phân chất

monoglyceride, glycerol và axit béo

Enzym

Lipase

Khi ức chế enzym lipase tuyến tụy, lượng chất béo được hấp thụ vào

cơ thể giảm đáng

kể, từ đó giảm lượng mỡ tích trữ trong cơ thể  Cơ

In Vitro

03

• Quy trình

Giới thiệu cây keo đen mearnsii

● Cây keo đen Mearnsii thuộc họ Fabaceae (họ đậu)

● Có nguồn gốc từ đông nam nước

Úc và Tasmania

● Vỏ của cây có chứa một lượng keo tannin tan trong nước đáng kể

Thành phần hóa học chính của keo tannin

Robinethiol Fisetinidol

- Keo tannin chứa một lượng đáng kể polyphenol

- Chủ yếu bao gồm các đơn vị 5-deoxyflavan-3-ol, như robinetinidol và fisetinidol

Enzyme lipase tuyến tụy xúc tác cho chuyển hóa

chất béo (điển hình là triolein) thành glycerol và

acid béo trong ruột  Gây bệnh béo phì  Cần ức

chế hoạt động này

Giới thiệu biện pháp ức chế enzyme lipase

Để ức chế hoạt động sự chuyển hóa

của triolein có mặt enzyme lipase

=> Sử dụng acacia polyphenol chiết

xuất từ vỏ cây keo đen mearnsii

0 3

0 2

Chuẩn bị keo tannin

Chuẩn bị dung dịch chất nền

0

4

0 1

Quy trình thí nghiệm

- Hỗn hợp huyền phù bao gồm: 3 chất béo trong 9mL dung dịch đệm Tris 0.1M (pH = 7.0) được đánh siêu âm trong 10 phút để hòa tan chất nền

+ 90 μmol triolein

+ 12.6 μmol lecithin

+ 9.45 μmol taurocholic acid

Bước 2 Chuẩn bị dung dịch chất nền

Đóng vai trò chất nhũ hóa

0 0.02 0.1 0.25 0.5 1.0 2.0

Mỗi bình đựng được hòa tan với 0.1M đệm Tris (pH = 7.0)

Bước 3: Chuẩn bị dung dịch mẫu

Chuẩn bị các dung dịch chứa AP và Orlistat theo nồng độ cho trước

Quy trình thí nghiệm

Đo độ hấp thụ của muối đồng II Oleate ở bước sóng 490nm sử dụng thiết bị U – 2800 spectrophotometer

Được loại bỏ

bằng cách hút

Thêm Đồng II Acetate (700 μg.mLL) rồi lắc trong 5 phút và ly tâm với gia tốc quay 1000g trong 5 phút

Lấy 0.5mL pha hữu cơ (chứa muối đồng II Oleate) tác dụng với 0.5 mL dung dịch bathocuproine 0.1% trong chloroform có chứa 0.05% 3-(2)-tert- butyl-4-hydroxyanisol (BHA)

Kết quả:

Inhibitory effects of AP (filled circle) or orlistat (open circle) on pancreatic lipase.The inhibitory activity of AP or orlistat on pancreatic lipase was measured as described in Methods section Data represent means ± SD

In Vivo

04

• Quy trình

Chuột ICR

o Giữ ở nhiệt độ phòng (22 ± 1 ° C),

độ ẩm 55 ± 10%, với chu kỳ sáng / tối 12 giờ (chiếu sáng nhân tạo: 08: 00–20: 00 giờ)

o Thích nghi trong 1 tuần trước khi thí nghiệm

Đánh giá khả năng hấp thu lipid

trên chuột ICR

I Chuột bình thường Uống nước cất

II Chuột bệnh 5 ml.kg -1 dầu ô liu

III Chuột bệnh được điều trị 5 ml.kg -1 dầu ô liu + 0.25 g.kg -1 AP

IV Chuột bệnh được điều trị 5 ml.kg -1 dầu ô liu + 0.5 g.kg -1 AP

V Chuột bệnh được điều trị 5 ml.kg -1 dầu ô liu + 1.0 g.kg -1 AP

- 5 nhóm:

- Chuột không được cho ăn trong 18 giờ trước khi thử nghiệm

- Lấy 60 μg.mLL mẫu máu từ mắt của chuột tại

thời điểm uống và sau khi uống 1.5, 3, 4.5

và 6 giờ.

Đánh giá khả năng giảm nồng độ

chất béo của AP trên chuột ICR

o Mô hình gây tăng lượng chất béo trong máu thành công.

o AP ức chế sự gia tăng nồng độ chất béo trong huyết tương

(a) Mô tả nồng độ triglycerid trong huyết tương.

(b) Mô tả ΔAUC AUC của triglycerid trong huyết tương trong vòng 6 giờ sau khi dùng dầu ô liu.

o Khi dùng 0.5 g.kg -1 AP, nồng độ chất béo giảm xuống khoảng 40% so với nhóm chỉ dùng dầu

ô liu.

AP có tác dụng chống béo phì

Tài liệu tham khảo:

[1] Nobutomo Ikarashi, Rumi Takeda, Kiyomi Ito, Wataru Ochiai, Kiyoshi Sugiyama, “The Inhibition

of Lipase and Glucosidase Activities by Acacia Polyphenol”,Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, Vol 2011,2011

[2] Nobutomo Ikarashi, Takahiro Toda, Takehiro Okaniwa, Kiyomi Ito, Wataru Ochiai,Kiyoshi Sugiyama, “Anti-Obesity and Anti-Diabetic Effects of Acacia Polyphenol in Obese Diabetic KKAy

Mice Fed High-Fat Diet”, Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, Vol 2011,

2011

[3] Sosuke Ogawa, Yoshikazu Yazaki, Tannins from Acacia Mearnsii De Wild Bark: Tannin Determination and Biological Activities,Molecules, 2018, vol 23, no 4, 837.

[4] Homayoun L Daneschvar, MD, Mark D Aronson, MD, Gerald W Smetana, MD,”FDA-Approved

Anti-Obesity Drugs in the United States”,The American Journal of Medicine, vol 129, no 8,2016 [5] T T Liu, X T Liu, Q X Chen, and Y Shi, “Lipase Inhibitors for Obesity: A Review,” Biomed Pharmacother., vol 128, no November 2019, 2020

[6] D M Williams, A Nawaz, and M Evans, “Drug Therapy in Obesity: A Review of Current and

Emerging Treatments,” Diabetes Ther., vol 11, no 6, pp 1199–1216, 2020.

[7] G W Kim, J E Lin, E S Blomain, and S A Waldman, “Antiobesity pharmacotherapy: New

drugs and emerging targets,” Clin Pharmacol Ther., vol 95, no 1, pp 53–66, 2014

[8] Shekar, Meera, and Barry Popkin, eds 2020 Obesity: Health and Economic Consequences of

an Impending Global Challenge Human Development Perspectives series Washington, DC: World Bank

THANKS FOR

YOUR ATTENTION