Slide 1 LỄ BẢO VỆ KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KỸ THUẬT Y HỌC BỘ MÔN HOÁ SINH Hà Nội 2009 © www kythuatyhoc com TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN NGỌC DŨNG CHUẨN HOÁ KỸ THUẬT PHÂN TÍCH GENE SOD1 Ở TẾ BÀO[.]
Trang 1LỄ BẢO VỆ KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP
CỬ NHÂN KỸ THUẬT Y HỌC
BỘ MÔN HOÁ SINH
Hà Nội -2009
© www.kythuatyhoc.com
Trang 2TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI
NGUYỄN NGỌC DŨNG
CHUẨN HOÁ KỸ THUẬT PHÂN TÍCH GENE SOD1
Ở TẾ BÀO ỐI BÀ MẸ MANG THAI
NGHI HỘI CHỨNG DOWN
LUẬN VĂN CỬ NHÂN KỸ THUẬT Y HỌC
Người hướng dẫn:
TS Đặng Thị Ngọc Dung
Hà Nội -2010
Trang 3HC Down:
Là 1 trong số các bệnh DT hay gặp
Có nhiều cách CĐTS HC Down, thông qua TB ối
là phương pháp phổ biến hiện nay
© www.kythuatyhoc.com
Trang 4MỤC TIÊU
1 Chuẩn hóa quy trình tách chiết DNA
từ tế bào ối của phụ nữ mang thai
2 Tối ưu hóa phản ứng PCR với gene
SOD1 ở BN mang hc Down với BN chứng
Trang 5Khoảng 92% thể 3 nhiễm 21 thuần, 2%-3% thể khảm, 4%-5% thể chuyển đoạn
© www.kythuatyhoc.com
Trang 6TỔNG QUAN
CĐTS HC Down:
Thông dụng : triple test, siêu âm, sinh thiết tua
rau,…
Hiện nay : phân tích TB ối cho kết quả chính xác
và độ tin cậy cao bằng cách nhuộm băng NST và
PCR phân tích gene SOD-1
Trang 7ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC
1 Đối tượng NC
Bà mẹ mang thai BT ( 4 mẫu )
Bà mẹ mang thai đã được chẩn đoán trước sinh thai bị Down ( 1 mẫu )
Các mẫu TB ối này đều lấy từ các phụ nữ trong độ tuổi từ 37-43, được nuôi cấy và bảo quản ở -200C tại Bộ môn Di truyền Trường ĐHYHN
© www.kythuatyhoc.com
Trang 8ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
NC
2 Phương pháp nghiên cứu
Nghiên cứu mô tả
Trang 9ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
Trang 10ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
Trang 11ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
NC
Kỹ thuật đánh giá kết quả tách chiết:
Đo mật độ quang: Độ tinh sạch và [DNA]
Điện di DNA tổng số: Chất lượng DNA
Chạy PCR với mồi của gene GAPDH: Chất lượng, độ đặc hiệu của DNA
Phương pháp SHPT sử dụng kỹ thuật PCR:
Tiến hành chạy PCR với primer của gene
Trang 12MÔ HÌNH NGHIÊN CỨU
TÁCH DNA
ĐiỆN DI DNA TỔNG SỐ
HÌNH ẢNH THU ĐƯỢC
Trang 15KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
2 Kết quả điện di DNA tổng số
1 2 3 4 5
© www.kythuatyhoc.com
Trang 16KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
3 Kết quả điện di sản phẩm PCR với mồi GAPDH
1 2 3 M
Trang 18KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 4 Kết quả điện di các mẫu chạy PCR với
primer SOD-1 lần 2 :
3 4 5 M
Trang 19KẾT LUẬN
1 KT tách chiết DNA từ TB ối theo quy trình
trên đã có sự thay đổi là rất phù hợp, vì
lượng DNA thu được nhiều hơn mà vẫn
giữ được chất lượng của DNA
© www.kythuatyhoc.com
Trang 20KẾT LUẬN
2 Việc tối ưu hóa phản ứng PCR đã cho kết quả phân tích exon 3 của gene SOD-1 rõ ràng, dễ dàng, góp phần phục vụ chẩn đoán trước sinh hội chứng Down