(TIỂU LUẬN) SENIMER báo cáo kỹ THUẬT KIỂM NGHIỆM dược chủ đề PHƯƠNG PHÁP điện DI

KHÁI NIỆMHiện tượng liên quan đến sự di chuyển của các protein, phân tử hay tiểu phân tích điện hòa tan hoặc phân tán trong dung dịch điện giải khi có dòng điện đi qua... NGUYÊN TẮC Khi

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN

SENIMER BÁO CÁO KỸ THUẬT KIỂM NGHIỆM DƯỢC

Chủ đề: PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN DI

1 Lê Thị Ngọc Trâm B1806589 TS Nguyễn Quốc Châu Thanh

2 Nguyễn Thị Kim Ngân B1806546

3 Hồ Thị Yến Nhi B1907335

4 Trần Khánh Tiên B1907369

5 Nguyễn Thị Hồng Ngọc B1907329

1 KHÁI NIỆM

Hiện tượng liên quan đến sự di

chuyển của các protein, phân tử hay

tiểu phân tích điện hòa tan hoặc

phân tán trong dung dịch điện giải

khi có dòng điện đi qua

2 NGUYÊN TẮC

Khi các phân tử tích điện được đặt trong mộtđiện trường, chúng sẽ dịch chuyển về các cực (+)hoặc (-) tùy theo điện tích của chúng

 Protein có điện tích thực hoặc dương hoặc âm, còncác nucleic acid có một điện tích âm không đổi nhờ khung phosphate củamình và vì thế chỉ dịch chuyển hướng đến cực dương

PHƯƠNG

PHÁP ĐIỆN DI

trong dung dịch

a Điện di trong dung dịch tự do

Protein trong một ống hình chữ U dưới tác dụng của dòng điện sẽ hìnhthành nên các lớp Protein có linh độ giảm dần

Phần dichuyển

KẾT QUẢ nhanh nhất

của Protein

sẽ tách rõrệt khỏiProtein khác

Kiểm tra sựdịch chuyểncác lớp biên

bằng hệthống quanghọc sẽ cho dữliệu để tínhtoán linh độ

điện di

Các thôngtinh về mặtđịnh tính vàđịnh lượngthành phầnProtein

b Điện di trên chất giá (điện di vùng)

Giấy

Polyacry

Agarose

lamid CÁC CHẤT GIÁ

Acetat cellulose Thạch

agar

Dùng để phân tách Protein > 500 kDa

DNA có kích thước > 2000 bp (base

pair)

Agarose gel

Phân lập

Điện di agarose gel

Thiết bị điện di agarose gel gồm 3 bộ

phận cơ bản: nắp, khay vận hành và

buồng điện di.

+ Nắp: trên nắp có đầu ra của dây cáp điện nối điện cực trên buồng điện di với nguồn điện.

+ Khay vận hành bao gồm: khay đổ gel, khuôn đổ gel, lược

+ Buồng điện di: là nơi đặt gel trong quá trình điện di Buồng có rãnh để cài lược, hai điện cực tạo ra điện trường trong dung dịch.

Điện di agarose gel

QUY

TRÌN

H ĐIỆN DI

Điện di

Polyacrylamide gel

3 ỨNG DỤNG

Phân tách các acid amin, protein, DNA trong dung dịch cần phân tách.

Trong Y học:

Điện di phân tách các Protein huyết thanh

Điện di phân tách hemoglobin

Điện di phân tách các isoenzyme trong huyết thanh

Điện di Protein

Trong dd đệm có pH khác

với pHi của Protein, các phân

tử Protein tích điện sẽ chuyển

dịch về các điện cực trái dấu

khi có dòng điện một chiều

chạy qua dd

Điện di Protein

Tốc độ di chuyển của protein trong điện

trường V = E.Q/f Trong đó:

trường

f: hệ số ma sát, tùy thuộc vào khối lượng, hình dạng protein và độ nhớt môi trường.

Các yếu tố ảnh hưởng đến điện di Protein

Dung dịch

Nhiệt độ đệm

Tiểu

thế

Loại chất

a Điện di protein huyết thanh trên giấy

Sơ đồ chậu điện di protein huyết thanh trên giấy

a Điện di protein huyết thanh trên giấy

Kết quả: Điện di protein huyết thanh trên giấy tách được 5-6

thành phần: albumin, globulin 1, 2, 1, 2 và

a Điện di protein huyết thanh trên giấy

b Điện di protein huyết thanh bằng pp

b Điện di protein huyết thanh bằng pp

SDS - Polyacrylamide

b Điện di protein

huyết thanh bằng pp

SDS Polyacrylamide

-w -w -w y o u r -w e b s i t e c o m