Trong các vật dụng như kim loại, cao su, thủy tinh, nước cất, môi trường nuôi cấy; nếu đem khử trùng thì loại nào khử trùng nhiệt khô và khử trùng nhiệt ướt.. *Yêu cầu kỹ năng sinh viên
Trang 1BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
BÀI PHÚC TRÌNH THỰC TẬP VI SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG
(MSHP: CS113)
Giảng viên hướng dẫn Sinh viên thực hiện Mã số sinh viên
Nguyễn Quốc Thuận
Đỗ Thị Bích Tuyền Nguyễn Ngọc Hân Nguyễn Thị Mộng Thu Châu Rich Tha
B2109163 B2102143 B2102037 B2100000 B2100000
Trang 2THÔNG TIN SINH VIÊN
1 Họ tên: Nguyễn Quốc Thuận
MSSV: B2109163
Mã Lớp: DA266A1
2 Họ tên: Đỗ Thị Bích Tuyền
MSSV: B2102143
Mã Lớp: DA266A1
3 Họ tên Nguyễn Ngọc Hân
MSSV:
Mã Lớp:
4 Họ tên: Nguyễn Thị Mộng Thu
MSSV:
Mã Lớp:
5 Họ tên: Chau Rich Tha
MSSV
Mã lớp:
6
BÀI PHÚC TRÌNH THỰC TẬP
Bài 1: KÍNH HIỂN VI VÀ MỘT SỐ THIẾT BỊ THƯỜNG SỬ DỤNG TRONG
PHÒNG THÍ NGHIỆM VI SINH VẬT HỌC
I TRẢ LỜI CÂU HỎI
1
Trang 3TT Câu hỏi Trả lời
1 Vai trò của dầu cèdre khi sử
dụng vật kính X100
Dầu cèdre có chiết xuất tương tự như thuỷ tinh (n=1,5) nên tạo ra môi trường đồng chiết suất nên ánh sáng ít
bị khúc xạ tập trung vào khẩu độ X100 nên giúp quan sát ảnh rõ hơn.
2 Cách bảo quản vật kính X100
sau khi nhỏ dầu Cách bảo quản vật kính X100:
Bước 1: Đầu tiên dung giấy sạch (giấy lau mặt) lau qua lớp dầu cèdre dính trên vật kính X100
Bước 2: Dùng một tờ giấy sạch thứ hai thấm một ít xylol (dung môi hữu cơ) hay một hỗn hợp cồn cao độ+erther lau cho hết dầu còn xót lại trên vật kính X100
Bước 3: Cuối cùng dung tờ giấy sạch thứ
ba lau lại cho sạch dầu và xylol hay cồn+erther vì hai loại này có thể làm tan lớp keo dán thấu kính trên ống kinh của vật kính X100
3 Trong các vật dụng như kim loại,
cao su, thủy tinh, nước cất, môi
trường nuôi cấy; nếu đem khử
trùng thì loại nào khử trùng nhiệt
khô và khử trùng nhiệt ướt
Vật dụng khử trùng nhiệt khô: kim loại, thủy tinh
Vật dụng khử trùng nhiệt ướt: cao su, nước cất, môi trường nuôi cấy
4 Tại sao khi bắt đầu khử trùng với
nồi khử trùng nhiệt ướt thì phải
xả hết không khí trong nồi ra?
Vì nếu không loại bỏ không khí thì nhiệt độ trong nồi là 100℃ (212℉), mà khử trùng nhiệt ướt là thiết bị cần sử dụng hơi nước ở nhiệt độ cao ( 121℃ ) bằng cách nâng áp suất trong nồi lên cao để khử trùng Vì vậy muốn đưa hơi nước lên 121℃ phải nâng áp suất trong nồi khử trùng bằng cách xả hết không khí trong nồi ra
5 Nếu là môi trường lỏng nên khử
trùng bằng thiết bị nào cho thích
hợp? tại sao?
Nên khử trùng bằng nồi khử trùng nhiệt ướt (Autoclave) vì nó sẽ không làm cho môi trường lỏng bị bốc hơi nước và không khí làm biến tính môi trường
II PHẦN THỰC HÀNH
Trang 4*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên sử dụng kính hiển vi để quan sát thấy
được vi sinh vật, đặt biệc là thấy được vi khuẩn
*Yêu cầu báo cáo: Phần thực hành sử dụnh kính hiển vi sinh viên kết hợp với Bài 3,
Bài 4, Bài 6, Bài 7 và Bài 8
3
Trang 5Bài 2: MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY & CÁC NGUỒN VI SINH VẬT
I TRẢ LỜI CÂU HỎI
1 Cho biết công dụng của agar
trong môi trường nuôi cấy Thử
phân loại môi trường khoai tây
-agar thuộc loại môi trường gì?
- Agar có công dụng làm chất chống đỡ
và tạo môi trường đặc
- Theo trạng thái vật lí môi trường khoai tây – agar là môi trường đặc
- Theo nguồn gốc vật liệu: môi trường khoai tây agar là môi trường thiên nhiên
- Môi trường khoai tây – agar phân loại theo công dụng và là môi trường cơ bản
2 Nếu môi trường khoai tây - agar
khử trùng bằng tủ khử trùng
nhiệt khô ở 121o C, có được
không? Tại sao?
- Không nên Vì sẽ xảy ra sự bốc hhoiw nước gây biến tính hoặc hư hỏng môi trường, đồng thời tủ khử trùng nhiệt khô
ở 1210C có thể không tiêu diệt đc toàn sinh vật
3 Tại sao phải mở cửa, mở quạt
máy trong thí nghiệm lấy vi sinh
vật từ không khí?
- Vì để cho không khí trong phòng thí nghiệm xáo trộn mang theo nhiều loài vi sinh vật hơn bám vào môi trường
II PHẦN THỰC HÀNH
*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện được nút gòn và nắp giấy
sử dụng trong nuôi cấy vi sinh vật
*Yêu cầu báo cáo:
Hình nút gòn và nắp giấy do nhóm sinh viên thực hiện
Trang 7Bài 3: QUAN SÁT VI SINH VẬT
I TRẢ LỜI CÂU HỎI
II PHẦN THỰC HÀNH
*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được:
- Quan sát bằng mắt: Sinh viên phân biệtt được 2 dạng khuẩn lạc của vi sinh vật
khi phát triển trên môi trường đặc: “Khuẩn lạc vi khuẩn – nấm mem” và “khuẩn lạc nấm mốc”
- Quan sát bằng kính hiển vi: Sinh viên phân biệt được 3 nhóm vi sinh vật: vi
khuẩn, nấm men và nấm mốc
*Yêu cầu báo cáo:
- Quan sát bằng mắt:
1 Hình Khuẩn lạc vi khuẩn – nấm
mem 1:
-Hình dạng: hình tròn
- Độ nỗi: mô
- Dạng bìa: Chia thùy
-Màu sắc:Trắng
-Kích thước:Lớn
2 Hình Khuẩn lạc vi khuẩn – nấm
mem 2:
-Hình dạng: Hình tròn
- Độ nỗi: Mô
- Dạng bìa: Phẳng
-Màu sắc:Trắng
-Kích thước:Nhỏ
Trang 8TT Mô tả Hình
3 Hình Khuẩn lạc nấm mốc:
-Hình dạng: Rễ cây sợi
- Độ nỗi: Nỗi lài
- Dạng bìa: Sợi
-Màu sắc: Trắng đục
-Kích thước: Lớn
- Quan sát bằng kính hiển vi:
1 Hình vi khuẩn:
2 Hình nấm mem:
3 Hình nấm mốc:
7
Trang 9Bài 4: NHUỘM VI SINH VẬT
I TRẢ LỜI CÂU HỎI
1 Nếu sau khi trải vi sinh vật không
cố định mẫu vật trước khi
nhuộm, kết quả như thế nào?
Nếu không cố định mẫu vi sinh vật sẽ bị rửa trôi khi nhuộm và rửa nhiều lần và vi sinh vật không chết nên sẽ không bắt màu phẩm nhuộm
2 Cho biết ích lợi của việc nhuộm
đơn Làm cho mẫu ngấm phẩm nhuộm, dễ quan sátdưới kính hiển vi
3 Cho biết ích lợi của việc nhuộm
kép Làm cho mẫu ngấm phẩm nhuộm, dễ quan sátdưới kính hiển vi Phân biệt vi khuẩn Gram
dương và Gram âm
II PHẦN THỰC HÀNH
*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện được kỹ thuật nhuộm đơn
và nhuộm kép vi sinh vật
*Yêu cầu báo cáo:
1 Hình mẫu nhuộm đơn với nấm men:
- Đánh giá trải mẫu: trải dài tương
đối đều
- Đánh giá độ bắt màu của mẫu: Tế
bào nấm men bắt màu lam nhạt,
không bào không bắt màu
2 Hình mẫu nhuộm kép với vi khuẩn:
- Đánh giá trải mẫu:
- Đánh giá độ bắt màu của mẫu:
- Kết luận: mẫu là vi khuẩn Gram
âm
Trang 11Bài 5: KỸ THUẬT GIEO CẤY (CHUYỂN)
VÀ PHÂN LẬP (TÁCH RÒNG) VI SINH VẬT
I TRẢ LỜI CÂU HỎI
1 Có thể xác định độ thuần (ròng)
của vi sinh vật bằng mắt được
không?
Không thể xác định độ thuần (ròng) của vi sinh vật bằng mắt thường vì tế bào vi sinh vật có kich thước quá nhỏ so với độ phóng đại của mắt
2 Tại sao khi phân lập phải vẽ
thành nhiều đường?
Để tách từng tế bào ra và để từng tế bào phát triển thành một khuẩn lạc độc lập
3 Tại sao phải hơ lửa miệng ống
nghiệm trước khi đưa kim cấy
vào bên trong ống nghiệm?
Để tránh sự tạp nhiễm của các vi sinh vật bên ngoài môi trường và trong môi trường nuôi cấy
II PHẦN THỰC HÀNH
*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện được kỹ thuật cấy chuyễn
và kỹ thuật phân lập
*Yêu cầu báo cáo: Sinh viên thực tập rèn luyện kỹ năng cấy phân lập.
Trang 12Bài 6: ĐO VÀ ĐẾM VI SINH VẬT
I TRẢ LỜI CÂU HỎI
1 Tìm hệ số đo vật kính X40. x= N
nx10 = 4
2 x10 = 2 μm
2 Đo tính diện tích thị trường X40
3 Cho biết lý do sự khác biệt về
mật số cho bởi phương pháp đếm
gián tiếp và trực tiếp
Mật số phương pháp đếm trực tiếp thường cao hơn mật số phương pháp đếm gián tiếp Do phương pháp đếm trực tiếp không phân biệt tế bào sống hay chết, còn phương pháp đếm gián tiếp chỉ đếm tế bào sống
4 Cho biết công dụng của thước
trắc vi vật kính Dùng để ước lượng kính thước của mẫu thôngqua số vạch tương ứng trên vật kính, từ đó có
thể tính ra được kính thước thật của vật mẫu
II PHẦN THỰC HÀNH
*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện được kỹ thuật cấy chuyễn
và kỹ thuật phân lập
*Yêu cầu báo cáo:
1 Thực hành đo, tính kích thước
trung bình của tế bào nấm men
2 Thực hành đếm mẫu nấm men
bằng phương pháp đếm trực tiếp
trên kính mang vật
11
Trang 13Bài 7: SỰ LÊN MEN RƯỢU & SỰ LÊN MEN GIẤM
I TRẢ LỜI CÂU HỎI
1 Nấm men lên men rượu nhằm
mục đích gì? Viết phản ứng lên
men rượu
2 Cho biết cấu tạo của cái giấm
II PHẦN THỰC HÀNH
*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện quan sát mẫu vi khuẩn
giấm dưới kính hiển vi phân biệt được vi khuẩn giấm và cái giấm (sợi cellulose)
*Yêu cầu báo cáo:
1 Hình vi khuẩn giấm dưới kính
hiển vi (X40):
-Mô tả: chỉ rõ vị trí của vi khuẩn
giấm và cái giấm (sợi cellulose)
Trang 14Bài 8: SỮA CHUA ( YAOURT )
I TRẢ LỜI CÂU HỎI
1 Thử xác định các vi sinh vật nhìn
thấy trong yaourt ủ ở 45oC thuộc
nhóm nào? (nấm men, nấm mốc,
vi khuẩn) và vẽ hình
2 So sánh mật số 2 nhóm vi
sinh vật hình que và hình cầu
trong yaourt được ủ ở 30oC và
45oC
3 Vai trò của nhóm vi khuẩn
acit lactic trong sự lên men sữa
2
3
II PHẦN THỰC HÀNH
*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện quan sát mẫu sữa chua
dưới kính hiển vi phân biệt được vi khuẩn Streptococcus thermophilus và Lactobacillus
bulgaricus và hạt sữa kết tủa.
*Yêu cầu báo cáo:
1 Hình mẫu sữa chua dưới kính
hiển vi (X40):
-Mô tả: chỉ rõ vị trí của vi khuẩn
Streptococcus thermophilus và
Lactobacillus bulgaricus và hạt
sữa kết tủa
13