BÀI PHÚC TRÌNH THỰC tập VI SINH học đại CƯƠNG (1)

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên sử dụng kính hiển vi để quan sát thấyđược vi sinh vật, đặt biệc là thấy được vi khuẩn... PHẦN THỰC HÀNH *Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC

BÀI PHÚC TRÌNH THỰC TẬP VI SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG (MSHP: CS113)

Giảng viên hướng dẫn Sinh viên thực hiện Mã số sinh viên

Nguyễn Quốc Thuận

Đỗ Thị Bích Tuyền Nguyễn Ngọc

Hân Nguyễn Thị Mộng Thu Châu Rich Tha

B2109163 B2102143

B2102037 B2100000

B2100000

1

THÔNG TIN SINH VIÊN

T

T

viên

1

Họ tên: Nguyễn Quốc

Thuận MSSV: B2109163

Mã Lớp: DA266A1

2

Họ tên: Đỗ Thị Bích

Tuyền MSSV: B2102143

Mã Lớp: DA266A1

3

Họ tên Nguyễn Ngọc Hân MSSV:

Mã Lớp:

4

Họ tên: Nguyễn Thị Mộng

Thu MSSV:

Mã Lớp:

5

Họ tên: Chau Rich Tha MSSV

Mã lớp:

6

BÀI PHÚC TRÌNH THỰC TẬP

Bài 1: KÍNH HIỂN VI VÀ MỘT SỐ THIẾT BỊ THƯỜNG SỬ DỤNG TRONG

PHÒNG THÍ NGHIỆM VI SINH VẬT HỌC

I TRẢ LỜI CÂU HỎI

T

Câu hỏi

Trả lời

1 Vai trò của dầu cèdre khi sử

dụng vật kính X100

Dầu cèdre có chiết xuất tương tự như thuỷ tinh (n=1,5) nên tạo ra môi trường đồng chiết suất nên ánh sáng

ít bị khúc xạ tập trung vào khẩu độ X100 nên giúp quan sát ảnh rõ hơn.

2 Cách bảo quản vật kính X100

sau khi nhỏ dầu

Cách bảo quản vật kính X100:

● Bước 1: Đầu tiên dung giấy sạch (giấy lau mặt) lau qua lớp dầu cèdre dính trên vật kính X100

● Bước 2: Dùng một tờ giấy sạch thứ hai thấm một ít xylol (dung môi hữu cơ) hay một hỗn hợp cồn cao độ+erther lau cho hết dầu còn xót lại trên vật kính X100

● Bước 3: Cuối cùng dung tờ giấy sạch thứ ba lau lại cho sạch dầu và xylol hay cồn+erther vì hai loại này có thể làm tan lớp keo dán thấu kính trên ống kinh của vật kính X100

3 Trong các vật dụng như kim

loại, cao su, thủy tinh, nước

cất, môi trường nuôi cấy; nếu

đem khử trùng thì loại nào khử

trùng nhiệt khô và khử trùng

nhiệt ướt

● Vật dụng khử trùng nhiệt khô: kim loại, thủy tinh

● Vật dụng khử trùng nhiệt ướt: cao su, nước cất, môi trường nuôi cấy

4 Tại sao khi bắt đầu khử trùng

với nồi khử trùng nhiệt ướt thì

phải xả hết không khí trong nồi

ra?

Vì nếu không loại bỏ không khí thì nhiệt độ trong nồi là 100℃ (212℉), mà khử trùng nhiệt ướt là thiết bị cần sử dụng hơi nước ở nhiệt độ cao ( 121℃ ) bằng cách nâng áp suất trong nồi lên cao để khử trùng Vì vậy muốn đưa hơi nước lên 121℃ phải nâng áp suất trong nồi khử trùng bằng cách xả hết không khí trong nồi ra

5 Nếu là môi trường lỏng nên

khử trùng bằng thiết bị nào cho

thích hợp? tại sao?

Nên khử trùng bằng nồi khử trùng nhiệt ướt (Autoclave) vì nó sẽ không làm cho môi trường lỏng bị bốc hơi nước và không khí làm biến tính môi trường

II PHẦN THỰC HÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên sử dụng kính hiển vi để quan sát thấy

được vi sinh vật, đặt biệc là thấy được vi khuẩn

*Yêu cầu báo cáo: Phần thực hành sử dụnh kính hiển vi sinh viên kết hợp với Bài 3,

Bài 4, Bài 6, Bài 7 và Bài 8

Bài 2: MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY & CÁC NGUỒN VI SINH VẬT

I TRẢ LỜI CÂU HỎI

T

1 Cho biết công dụng của agar

trong môi trường nuôi cấy Thử

phân loại môi trường khoai tây

- agar thuộc loại môi trường

gì?

- Agar có công dụng làm chất chống đỡ

và tạo môi trường đặc

- Theo trạng thái vật lí môi trường khoai tây – agar là môi trường đặc

- Theo nguồn gốc vật liệu: môi trường khoai tây agar là môi trường thiên nhiên

- Môi trường khoai tây – agar phân loại theo công dụng và là môi trường

cơ bản

2 Nếu môi trường khoai tây

-agar khử trùng bằng tủ khử

trùng nhiệt khô ở 121o C, có

được không? Tại sao?

- Không nên Vì sẽ xảy ra sự bốc hhoiw nước gây biến tính hoặc hư hỏng môi trường, đồng thời tủ khử trùng nhiệt khô ở 1210C có thể không tiêu diệt đc toàn sinh vật

3 Tại sao phải mở cửa, mở quạt

máy trong thí nghiệm lấy vi

sinh vật từ không khí?

- Vì để cho không khí trong phòng thí nghiệm xáo trộn mang theo nhiều loài

vi sinh vật hơn bám vào môi trường

II PHẦN THỰC HÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện được nút gòn và nắp giấy sử

dụng trong nuôi cấy vi sinh vật

*Yêu cầu báo cáo:

Hình nút gòn và nắp giấy do nhóm sinh viên thực hiện

Bài 3: QUAN SÁT VI SINH VẬT

I TRẢ LỜI CÂU HỎI

II PHẦN THỰC HÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được:

- Quan sát bằng mắt: Sinh viên phân biệtt được 2 dạng khuẩn lạc của vi sinh vật

khi phát triển trên môi trường đặc: “Khuẩn lạc vi khuẩn – nấm mem” và “khuẩn lạc nấm mốc”

- Quan sát bằng kính hiển vi: Sinh viên phân biệt được 3 nhóm vi sinh vật: vi

khuẩn, nấm men và nấm mốc

*Yêu cầu báo cáo:

- Quan sát bằng mắt:

T

T

nh

1

Hình Khuẩn lạc vi khuẩn – nấmmem 1:

-Hình dạng: hình tròn

- Độ nỗi: mô

- Dạng bìa: Chia thùy

-Màu sắc:Trắng

-Kích thước:Lớn

2

Hình Khuẩn lạc vi khuẩn – nấmmem 2:

-Hình dạng: Hình tròn

- Độ nỗi: Mô

- Dạng bìa: Phẳng

-Màu sắc:Trắng

-Kích thước:Nhỏ

T

nh

3

Hình Khuẩn lạc nấmmốc:

-Hình dạng: Rễ cây sợi

- Độ nỗi: Nỗi lài

- Dạng bìa: Sợi

-Màu sắc: Trắng đục

-Kích thước: Lớn

- Quan sát bằng kính hiển vi:

T

1 Hình vi khuẩn:

2 Hình nấm mem:

3 Hình nấm mốc:

Bài 4: NHUỘM VI SINH VẬT

I TRẢ LỜI CÂU HỎI

T

1 Nếu sau khi trải vi sinh vật

không cố định mẫu vật trước

khi nhuộm, kết quả như thế

nào?

Nếu không cố định mẫu vi sinh vật sẽ bị rửa trôi khi nhuộm và rửa nhiều lần và vi sinh vật không chết nên sẽ không bắt màu phẩm nhuộm

2 Cho biết ích lợi của việc

nhuộm đơn Làm cho mẫu ngấm phẩm nhuộm, dễ quan sát dưới kính hiển vi

3 Cho biết ích lợi của việc

nhuộm kép Làm cho mẫu ngấm phẩm nhuộm, dễ quansát dưới kính hiển vi Phân biệt vi khuẩn

Gram dương và Gram âm

II PHẦN THỰC HÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện được kỹ thuật nhuộm đơn

và nhuộm kép vi sinh vật

*Yêu cầu báo cáo:

T

T

Mô tả

Hì nh

1 Hình mẫu nhuộm đơn với nấm men:

- Đánh giá trải mẫu: trải dài tương

đối đều

- Đánh giá độ bắt màu của mẫu:

Tế bào nấm men bắt màu lam

nhạt, không bào không bắt màu

2 Hình mẫu nhuộm kép với vi khuẩn:

- Đánh giá trải mẫu:

- Đánh giá độ bắt màu của mẫu:

- Kết luận: mẫu là vi khuẩn Gram

âm

Bài 5: KỸ THUẬT GIEO CẤY (CHUYỂN)

VÀ PHÂN LẬP (TÁCH RÒNG) VI SINH VẬT

I TRẢ LỜI CÂU HỎI

T

T

Câu hỏi

Trả lời

1 Có thể xác định độ thuần

(ròng) của vi sinh vật bằng mắt

được không?

Không thể xác định độ thuần (ròng) của vi sinh vật bằng mắt thường vì tế bào vi sinh vật

có kich thước quá nhỏ so với độ phóng đại của mắt

2 Tại sao khi phân lập phải vẽ

thành nhiều đường? Để tách từng tế bào ra và để từng tế bào phát triển thành một khuẩn lạc độc lập

3 Tại sao phải hơ lửa miệng ống

nghiệm trước khi đưa kim cấy

vào bên trong ống nghiệm?

Để tránh sự tạp nhiễm của các vi sinh vật bên ngoài môi trường và trong môi trường nuôi cấy

II PHẦN THỰC HÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện được kỹ thuật cấy chuyễn

và kỹ thuật phân lập

*Yêu cầu báo cáo: Sinh viên thực tập rèn luyện kỹ năng cấy phân lập.

Bài 6: ĐO VÀ ĐẾM VI SINH VẬT

I TRẢ LỜI CÂU HỎI

T

1 Tìm hệ số đo vật kính X40. x= N

x10 = 4 x10 = 2 μmm

2 Đo tính diện tích thị trường X40

3 Cho biết lý do sự khác biệt về

mật số cho bởi phương pháp

đếm gián tiếp và trực tiếp

Mật số phương pháp đếm trực tiếp thường cao hơn mật số phương pháp đếm gián tiếp

Do phương pháp đếm trực tiếp không phân biệt tế bào sống hay chết, còn phương pháp đếm gián tiếp chỉ đếm tế bào sống

4 Cho biết công dụng của thước

trắc vi vật kính

Dùng để ước lượng kính thước của mẫu thông qua số vạch tương ứng trên vật kính, từ

đó có thể tính ra được kính thước thật của vật mẫu

II PHẦN THỰC HÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện được kỹ thuật cấy chuyễn

và kỹ thuật phân lập

*Yêu cầu báo cáo:

T

1 Thực hành đo, tính kích thước

trung bình của tế bào nấm men

2 Thực hành đếm mẫu nấm men

bằng phương pháp đếm trực

tiếp trên kính mang vật

Bài 7: SỰ LÊN MEN RƯỢU & SỰ LÊN MEN GIẤM

I TRẢ LỜI CÂU HỎI

T

1 Nấm men lên men rượu nhằm

mục đích gì? Viết phản ứng lên

men rượu

2 Cho biết cấu tạo của cái giấm

II PHẦN THỰC HÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện quan sát mẫu vi khuẩn giấm

dưới kính hiển vi phân biệt được vi khuẩn giấm và cái giấm (sợi cellulose)

*Yêu cầu báo cáo:

T

T

Yêu cầu

Hì nh

1 Hình vi khuẩn giấm dưới

kính hiển vi (X40):

-Mô tả: chỉ rõ vị trí của vi

khuẩn giấm và cái giấm (sợi

cellulose)

Bài 8: SỮA CHUA ( YAOURT )

I TRẢ LỜI CÂU HỎI

T

1 Thử xác định các vi sinh vật

nhìn thấy trong yaourt ủ ở 45oC

thuộc nhóm nào? (nấm men,

nấm mốc, vi khuẩn) và vẽ hình

2 So sánh mật số 2 nhóm

vi sinh vật hình que và hình cầu

trong yaourt được ủ ở 30oC và

45oC

3 Vai trò của nhóm vi khuẩn acit lactic trong sự lên

men sữa

2

3

II PHẦN THỰC HÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được: Sinh viên thực hiện quan sát mẫu sữa chua

dưới kính hiển vi phân biệt được vi khuẩn Streptococcus thermophilus và Lactobacillus

bulgaricus và hạt sữa kết tủa.

*Yêu cầu báo cáo:

T

T

Yêu cầu

Hì nh

1 Hình mẫu sữa chua dưới kính

hiển vi (X40):

-Mô tả: chỉ rõ vị trí của vi

khuẩn Streptococcus

thermophilus và Lactobacillus

bulgaricus và hạt

sữa kết tủa

CẦN THƠ, /2021

Bài 1: KÍNH HIỂN VI VÀ MỘT SỐ THIẾT BỊ THƯỜNG SỬ DỤNG TRONG PHÒNG THÍ NGHIỆM VI SINH VẬT HỌC Bài 2: MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY & CÁC NGUỒN VI SINH VẬT

Bài 3: QUAN SÁT VI SINH VẬT

Bài 4: NHUỘM VI SINH VẬT

Bài 5: KỸ THUẬT GIEO CẤY (CHUYỂN) VÀ PHÂN LẬP (TÁCH RÒNG) VI SINH VẬT Bài 6: ĐO VÀ ĐẾM VI SINH VẬT

Bài 7: SỰ LÊN MEN RƯỢU & SỰ LÊN MEN GIẤM

Bài 8: SỮA CHUA ( YAOURT )