BÀI PHÚC TRÌNH THỰC tập VI SINH học đại CƯƠNG

BÀIPHÚCTRÌNHTHỰCTẬP Bài 1: KÍNH HIỂN VI VÀ MỘT SỐ THIẾT BỊ THƯỜNG SỬ DỤNG TRONGPHÒNGTHÍ NGHIỆM VI SINH VẬTHỌC I... Vaitr òc ủa d ầ u cèd re k h i sử dụng vật kính X100 Dầu cèdre có chiế

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƯỜNGĐẠIHỌCCẦNT

HƠ VIỆNNGHIÊNCỨUVÀPHÁTTRIỂNCÔNGNGHỆSINHHỌC

BÀIPHÚC TRÌNH THỰC TẬP VI SINH HỌC ĐẠI

CƯƠNG(MSHP:CS113)

Nguyễn Quốc ThuậnĐỗ Thị Bích TuyềnNguyễn Ngọc HânNguyễnThịMộngT huChâuRichTha

B2109163 B2102143B21 02037B21000 00B2100000

CẦNTHƠ, /2021

1

THÔNGTINSINHVIÊN

1 Họtên:NguyễnQuốcThuậnMSS

V: B2109163

MãLớp:DA266A1

2 Họtên:ĐỗThịBíchTuyềnMSS

V: B2102143

MãLớp:DA266A1

3 Họ tên Nguyễn Ngọc

HânMSSV:

MãLớp:

4 Họtên:NguyễnThịMộngThuMSS

V:

MãLớp:

5 Họtên:ChauRichThaMS

SV

Mãlớp:

6

BÀIPHÚCTRÌNHTHỰCTẬP

Bài 1: KÍNH HIỂN VI VÀ MỘT SỐ THIẾT BỊ THƯỜNG SỬ DỤNG

TRONGPHÒNGTHÍ NGHIỆM VI SINH VẬTHỌC

I TRẢLỜICÂUHỎI

1 Vaitr òc ủa d ầ u cèd re k h i sử dụng

vật kính X100

Dầu cèdre có chiết xuất tương tự nhưthuỷtinh(n=1,5)nêntạoram ô i trườ

ng đồng chiết suất nên ánh sáng ítbị khúc xạ tập trung vào khẩu độ X100nêngiúpquan sátảnhrõhơn.

2 CáchbảoquảnvậtkínhX100sauk

hi nhỏdầu CáchbảoquảnvậtkínhX100: Bước 1: Đầu tiên dung giấy sạch

(giấylau mặt) lau qua lớp dầu cèdre dính trênvậtkínhX100

 Bước 2: Dùng một tờ giấy sạch thứ haithấm một ít xylol (dung môi hữu cơ) haymột hỗn hợp cồn cao độ+erther lau chohếtdầucònxótlạitrênvậtkínhX100

 Bước 3: Cuối cùng dung tờ giấy sạch thứbalaulạichosạchdầuvàxylolhaycồn+erther

vì hai loại này có thể làm tanlớp keo dán thấu kính trên ống kinh củavậtkínhX100

3 Trong các vật dụng như kim

loại,cao su, thủy tinh, nước cất,

môitrườngnuôicấy;nếuđemkhửtrùn

g thì loại nào khử trùng nhiệtkhôvà khử

trùngnhiệtướt

 Vậtdụngkhửtrùngnhiệtkhô:kimloại, thủytinh

 Vậtd ụ n g k h ử t r ù n g n h i ệ t ư ớ t : c a

o s u , nước cất,môi trườngnuôicấy

4 Tại sao khi bắt đầu khử trùng

vớinồi khử trùng nhiệt ướt thì phảixảhết

khôngkhítrong nồira?

Vì nếu không loại bỏ không khí thì nhiệt độtrong nồi là 100℃(212℉), mà khử trùng nhiệtướt là thiết bị cần sử dụng hơi nước ở nhiệt độcao ( 121℃) bằng cách nâng áp suất trong

nồilênc a o đ ể k h ử t r ù n g V ì v ậ y m u ố n đ

ư a h ơ i nước lên 121℃phải nâng áp suất trong nồi khửtrùngbằngcáchxả hếtkhôngkhítrongnồira

5 Nếu là môi trường lỏng nên

khửtrùng bằng thiết bị nào cho

thíchhợp?tại sao?

Nên khử trùng bằng nồi khử trùng nhiệt ướt(Autoclave) vì nó sẽ không làm cho môi trườnglỏngb ị b ố c h ơ i n ư ớ c v à k h ô n g k h í l

à m b i ế n tínhmôi trường

II PHẦNTHỰCHÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được:Sinh viên sử dụng kính hiển vi để quan sát

thấyđược visinhvật,đặtbiệclà thấy đượcvi khuẩn

*Yêucầubáocáo:PhầnthựchànhsửdụnhkínhhiểnvisinhviênkếthợpvớiBài3,Bài4,B

ài6,Bài7 vàBài 8

Hình nút gòn và nắp giấy do nhóm sinh viên thực hiện

Bài2:MÔITRƯỜNG NUÔICẤY&CÁCNGUỒNVISINHVẬT

I TRẢLỜICÂUHỎI

1 Chobiếtcôngdụngcủaagartrong

môi trường nuôi cấy Thửphân

loại môi trường khoai tây

-agarthuộc loạimôitrườnggì?

- Agarc ó c ô n g d ụ n g l à m c h ấ t c h ố n g đ

ỡ vàtạo môitrường đặc

- Theotrạngtháivậtlímôitrườngkhoai tây–agarlàmôitrường đặc

- Theonguồngốcvậtliệu:môitrườngkhoaitây agarlàmôitrườngthiênnhiên

- Môitrườngkhoaitây–

agarphânloạitheocôngdụngvàlà môitrườngcơbản

2 Nếu môi trường khoai tây

-agarkhửtrùngbằngtủkhửt r ù n g

nhiệtkhôở121o C,cóđượckhông?

Tại sao?

-Không nên Vì sẽ xảy ra sự bốc hhoiwnước gây biến tính hoặc hư hỏng môitrường, đồng thời tủ khử trùng nhiệt khôở 1210C có thể không tiêu diệt đc toànsinhvật

3 Tạisaophảimởcửa,mởquạtmáy trong

thí nghiệm lấy vi sinhvậttừkhôngkhí? - Vìđ ể c h o k h ô n g k h í t r o n g p h ò

n g t h í nghiệm xáo trộn mang theo nhiều loài visinhvậthơn bámvàomôitrường

II PHẦNTHỰCHÀNH

*Yêucầukỹnăngsinhviênđạtđược:Sinhviênthựchiệnđượcnútgònvànắpgiấysửdụng

trong nuôi cấy visinhvật

*Yêucầubáocáo:

Bài 3:QUANSÁTVISINH VẬT

I TRẢLỜICÂUHỎI

II PHẦNTHỰCHÀNH

*Yêucầukỹnăngsinhviênđạtđược:

- Quan sát bằng mắt:S i n h v i ê n p h â n b i ệ t t đ ư ợ c 2 d ạ n g

k h u ẩ n l ạ c c ủ a v i s i n h v ậ t khi phát triển trên môi trường đặc: “Khuẩn lạc

vi khuẩn – nấm mem” và “khuẩn lạc nấmmốc”

- Quan sát bằng kính hiển vi:Sinh viên phân biệt được 3 nhóm vi sinh vật:

vikhuẩn,nấm men vànấmmốc

*Yêucầubáocáo:

- Quansátbằngmắt:

1 HìnhK h u ẩ n l ạ c v i k h u ẩ n –

n ấ m mem1:

-Hìnhdạng:hìnhtròn

- Độnỗi: mô

- Dạngbìa:Chiathùy

-Màusắc:Trắng

-Kíchthước:Lớn

2 HìnhK h u ẩ n l ạ c v i k h u ẩ n –

n ấ m mem2:

-Hìnhdạng:Hìnhtròn

- Độnỗi:Mô

- Dạngbìa:Phẳng

-Màusắc:Trắng

-Kíchthước:Nhỏ

3 HìnhKhuẩnlạcnấmmốc:

-Hìnhdạng:Rễcâysợi

- Độnỗi: Nỗilài

- Dạngbìa:Sợi

-Màusắc:Trắngđục

-Kíchthước:Lớn

- Quansátbằngkínhhiểnvi:

1 Hình vikhuẩn:

2 Hìnhnấmmem:

3 Hìnhnấmmốc:

I TRẢLỜICÂUHỎI

1 Nếu sau khi trải vi sinh vật

khôngcốđịnhmẫuvậttrướck h i nhu

ộm, kếtquảnhưthế nào?

Nếu khôngcốđịnhmẫuvisinhvậtsẽbị rửatrôi khi nhuộm và rửa nhiều lần và vi sinh

vậtkhôngchếtnênsẽ khôngbắtmàuphẩmnhuộm

2 Chobiếtí ch l ợ i c ủ a v i ệ c n h u ộ m

đơn Làmchomẫungấmphẩmnhuộm,dễquansátdướikính hiển vi

3 Chobiếtí ch l ợ i c ủ a v i ệ c n h u ộ m

kép Làm cho mẫu ngấm phẩm nhuộm, dễ quansátdưới kính hiển vi Phân biệt vi khuẩn

GramdươngvàGram âm

II PHẦNTHỰCHÀNH

*Yêucầukỹnăngsinhviênđạtđược:Sinhviênthựchiệnđượckỹthuậtnhuộmđơnvànhuộ

m képvi sinh vật

*Yêucầubáocáo:

1 Hìnhmẫunhuộmđơnvớinấmmen:

- Đánh giá trải mẫu: trải dài

tươngđốiđều

- Đánh giá độ bắt màu của mẫu:

Tếbào nấm men bắt màu lam

nhạt,khôngbào khôngbắtmàu

2 Hìnhmẫunhuộmképvớivikhuẩn:

- Đánhgiátrảimẫu:

- Đánhgiáđộbắtmàucủamẫu:

- Kếtl u ậ n : m ẫ u l à v i k h u ẩ n G r a

m âm

Bài 5: KỸ THUẬT GIEO CẤY (CHUYỂN)VÀPHÂNLẬP(TÁCHRÒNG)VISI

NH VẬT

I TRẢLỜICÂUHỎI

1 Có thể xác định độ thuần

(ròng)củavisinhvậtbằngmắtđượckh

ông?

Không thể xác định độ thuần (ròng) của vi sinhvật bằng mắt thường vì tế bào vi sinh vật cókich thước quá nhỏ so với độ phóng đại củamắt

2 Tạis a o k h i p h â n l ậ p p h ả i v ẽ thành

nhiềuđường?

Đểtáchtừng t ế b à o ravàđể t ừn gt ế bà o pháttri ểnthànhmột khuẩnlạcđộclập

3 Tại sao phải hơ lửa miệng

ốngnghiệmtrướckhiđưakimc ấ y và

obêntrongốngnghiệm?

Đểtránhsựtạpnhiễmcủacác visinhvậtbênn goàimôitrườngvàtrongmôitrườngnuôicấy

II PHẦNTHỰCHÀNH

*Yêucầukỹnăngsinhviênđạtđược:Sinhviênthựchiệnđượckỹthuậtcấychuyễnvàkỹ

thuậtphânlập

*Yêucầubáocáo:Sinhviênthựctậprènluyệnkỹnăngcấyphânlập.

Bài 6:ĐOVÀĐẾM VISINHVẬT

I TRẢLỜICÂUHỎI

1 TìmhệsốđovậtkínhX40. x=N x10 =4 x 1 0 =2μmm

2 ĐotínhdiệntíchthịtrườngX40

3 Chob i ế t l ý d o s ự k h á c b i ệ t v

ề mật số cho bởi phương pháp đếmgiántiếpvà

trựctiếp

Mật số phương pháp đếm trực tiếp thường caohơn mật số phương pháp đếm gián tiếp Dophương pháp đếm trực tiếp không phân biệt tếbào sống hay chết, còn phương pháp đếm giántiếpchỉ đếmtếbào sống

4 Chobiếtcôngdụngcủathướctrắc vi vật

kính

Dùng để ước lượng kính thước của mẫu thôngqua số vạch tương ứng trên vật kính, từ đó cóthể tínhra đượckínhthướcthậtcủavậtmẫu

II PHẦNTHỰCHÀNH

*Yêucầukỹnăngsinhviênđạtđược:Sinhviênthựchiệnđượckỹthuậtcấychuyễnvàkỹ

thuậtphânlập

*Yêucầubáocáo:

1 Thựchànhđo,tínhkíchthướctrungbì

nhcủatếbàonấmmen

2 Thựchànhđ ế m m ẫ u n ấ m m e

n

bằngphươngphápđếmtrựctiếp

trênkính mangvật

Bài 7:SỰ LÊNMEN RƯỢU&SỰLÊNMEN GIẤM

I TRẢLỜICÂUHỎI

1 Nấmmenlênmenrượunhằmmục

đích gì? Viết phản ứng

lênmenrượu

2 Chobiếtcấutạocủacáigiấm

II PHẦNTHỰCHÀNH

*Yêucầu kỹ nă ng s i n h v iên đạ tđ ược : S i n h v i ê n t h ự c h i ệ n q ua n sátm ẫ u vi k h uẩ

n giấmdướikínhhiểnviphânbiệtđượcvikhuẩn giấmvàcáigiấm(sợicellulose)

*Yêucầubáocáo:

1 Hìnhv i khuẩn g i ấ m d ướ i k í n

h hiểnvi (X40):

-Môtả:chỉrõvịtrícủavikhuẩngiấm

vàcáigiấm(sợicellulose)

I TRẢLỜICÂUHỎI

1 Thử xác định các vi sinh vật

nhìnthấy trong yaourt ủ ở 45oC thuộcnhóm

nào? (nấm men, nấm

mốc,vikhuẩn) vàvẽhình

2 So sánh mật số 2 nhóm

visinhvậthìnhquevàhìnhcầutrong

yaourt được ủ ở 30oC và45oC

3 Vai trò của nhóm vi

khuẩnacitlactic trongsựlênmensữa

2

3

II PHẦNTHỰCHÀNH

*Yêu cầu kỹ năng sinh viên đạt được:S i n h v i ê n t h ự c h i ệ n q u a n s á t

m ẫ u s ữ a c h u a dưới kính hiển vi phân biệt được vi khuẩnStreptococcus

thermophilusvàLactobacillusbulgaricusvàhạtsữakết tủa.

*Yêucầubáocáo:

1 Hình mẫu sữa chua dưới

kínhhiểnvi (X40):

-Mô tả: chỉ rõ vị trí của vi

khuẩnStreptococcusthermophilus

vàLactobacillusbulgaricusvàhạ

t

sữakếttủa