Báo cáo môn học: Công Nghệ Di Truyền docx

Báo cáo môn h c ọ

Cán b h ộ ướ ng d n: ẫ

Ths Nguy n Th Pha ễ ị

Sinh viên th c hi n: ự ệ

Tr n Th Trúc Ph ầ ị ươ ng Nguy n Vi t Nam ễ ệ

Ph m Tr ng Tín ạ ọ Nguy n Huỳnh H ễ ươ ng

NG D NG

Tác gi : Nguy n Thanh Thu n, Vũ Thanh ả ễ ậ

Th o, Nguy n Văn Thanh, Tr n Cát Đôngả ễ ầ

Trích t trang:http://tcyh.yds.edu.vn/2010/Duoc_RHM_YTCC ừ

Các ph n chính ầ

I M Đ U Ở Ầ

PHÁP

III K T QU VÀ TH O LU N Ế Ả Ả Ậ

IV K T LU N Ế Ậ

I M Đ U Ở Ầ

• Nhân Sâm

• Tên khoa h c: ọ

Panax ginseng C A Mey

• H : Araliaceae ọ

(nhân sâm Hay Ngũ gia bì)

• Chi: Panax

I M Đ U Ở Ầ

Nhân Sâm

Dược tính các loài

có s khác bi tự ệ

Phân bi t ệ loài m c ở ứ phân tử

I M Đ U Ở Ầ

M c tiêu: Xây d ng các ph ụ ự ươ ng

pháp thu n ti n và có đ l p l i ậ ệ ộ ặ ạ cao đ xác đ nh các loài sâm thu c ể ị ố chi Panax và ngu n g c c a ồ ố ủ

chúng.

II V t li u và ph ậ ệ ươ ng pháp

N i ơ

mua

Lo i ạ

sâm

Vi t ệ

Nam

Hàn

Qu c ố

Pg1 Pg2 Pg3 Pg4 Pq Pn1 Pn2 Pv

II V T LI U VÀ PH Ậ Ệ ƯƠ NG PHÁP

Ph ươ ng pháp:

Tách chi t DNAtheo ph ế ươ ng pháp

c a Manian đ ủ ượ c bi n đ i ế ổ

Th c hi n PCR-RFLP ự ệ

Vùng ITS đ ượ c khu ch đ i v i ế ạ ớ

c p m i chung ITS_AF và ITS_BR ặ ồ

Vùng 18S đ ượ c khu ch đ i v i c p ế ạ ớ ặ

gel polyacrylamide 15%

Th c hi n RAMS v i các m i ự ệ ớ ồ RAMS1 (ACA)5, RAMS2 (CCA)5, RAMS3 (CGA)5, RAMS4 (GT)5G

Đi n di s n ph m PCR trên gel agarose 1%.ệ ả ẩ

Ch p hình gel b ng máy Dolphin(Wealtec Corp)ụ ằ

Phân tích k t qu b ng ph n m mế ả ằ ầ ề

BioNumerics 3.0 đ t o ể ạ cây phát sinh loài làm căn c phân bi t.ứ ệ

III K T QU VÀ TH O LU N Ế Ả Ả Ậ

Hình 1 K t qu RFLP ế ả

vùng ITS M: thang 100bp

Hình 2 K t qu phân tích s ế ả ự

III K T QU VÀ TH O LU N Ế Ả Ả Ậ

Hình 3 K t qu RFLP vùng ế ả Hình 4 K t qu phân tích s đa ế ả ự

III K T QU VÀ TH O LU N Ế Ả Ả Ậ

• Th nghi m các m i RAMS thì ch có m i ử ệ ồ ỉ ồ RAMS1 cho s n ph m khi phân tích trên gel ả ẩ

• Kh o sát n ng đ MgCl2 cho th y n ng đ ả ồ ộ ấ ồ ộ MgCl2 2mM cho k t qu PCR rõ nh t.ở ế ả ấ

• Khi ti n hành RAMS trên các m u k t qu ế ẫ ế ả phân tích trên BioNumerics cho th y các m u ấ ẫ

có m c đa d ng th p (dứ ạ ấ ưới 15%)

III K T QU VÀ TH O LU N Ế Ả Ả Ậ

IV K T LU N Ế Ậ

• Phân tích trình t vùng ITS có th giúp xác ự ể

đ nh loài c a các m u Ngoài ra, s k t ị ủ ẫ ự ế

h p gi a phân tích RFLP và gi i trình t ợ ữ ả ự

có th phân bi t ngu n g c c a các m u ể ệ ồ ố ủ ẫ này.

• Nhìn chung, các m u sâm thu mua t Hàn ẫ ừ

Qu c có m c t ố ứ ươ ng đ ng cao h n các ồ ơ

m u thu mua t i Vi t Nam ẫ ạ ệ