CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV PHƯƠNG PHÁP GIẢN TIẾP KN virus được cô định trên phiễn nhựa KT/ máu bn kết hợp đặc hiệu voi KN x Phát hiện phức hợp KN-KT bằng hé thong cộng hợp gắn men và cho p
Trang 1CN
XET NGHIEM CHAN DOAN HIV
Trang 2NỘI DUNG
® Câu trúc của HIV
® Cac dau ân MD ở người nhiễm HIV
® Muc dich cua XN HIV
® Các phuong phap XN HIV
® Lựa chọn kỹ thuật XN
s® Biện luận kết quả XN
Trang 3Gen EnV — KN vo
Trang 5
MUC DICH CUA XN CHAN DOAN HIV
Trang 6MUC DICH CUA XN CHAN DOAN HIV
MUC DICH
® Giám sát HIV/AIDS
® An toàn truyền máu
® Chân đoán nhiễm HIV
® Nghiên cứu khoa học
Trang 10CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIẢN TIẾP
KN virus được cô định trên phiễn nhựa
KT/ máu bn kết hợp đặc hiệu voi KN
x Phát hiện phức hợp KN-KT bằng hé thong
cộng hợp gắn men và cho phản ứng hiện
màu với cơ chât tương ứng
Trang 11Koy: Capture Sample Detection Enzymatic
ant ody artigen antibody reacton
Trang 13
CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIẢN TIẾP
ELISA sandwich
Trang 14
Testosterone antibody Coating antibody (2nd antibody, IgG-specific) Mikrotiter plate
Trang 15
CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIẢN TIẾP
ELISA — ưu điểm
® Đọc kết qủa bằng máy
® Thực hiện nhiêu mẫu cùng lúc
® Lưu giữ kết quả
® Giá thành tương đồi rẻ
Trang 16CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIẢN TIẾP
ELISA — han ché
® Đầu tư trang thiết bị
® Sinh phẩm : bảo quản lạnh
® Nhân viên XN : phải được đào tạo
® Thời gian thực hiện XN : 3-4 giờ
s Mẫu ít —› tốn kém
Trang 17CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIẢN TIẾP
Hạt gelatin gắn với KN viurs sẽ tạo ngưng
két khi gap KT khang HIV trong huyệt thanh
bn
HIV 2 gp36 protein tái tổ hợp
Trang 19CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIÁN TIẾP
THỬ NGHIỆM NHANH - ưu điểm
© Dễ thực hiện
© Cho kết quả nhanh
© Số lượng mẫu nhỏ
© Không đòi hỏi thiết bị đặc biệt
© Sinh phẩm dễ bảo quan
© KTV chỉ cần đào tạo nhanh
Trang 20CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIÁN TIẾP
THỬ NGHIỆM NHANH - hạn chế
% Giá thành cao
+ Không thuận lợi với số mẫu lớn
+ Không lưu giữ được kết quả
Độ nhạy kém
Trang 21CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIÁN TIẾP
WESTERN BLOT - nguyên lý
© Tach protein virus theo TLPT bằng điện di trên
polyacrylamid gel
® Chuyén sang giay nitrocellulose
® KT kháng HIV/mẫu thử kết hợp đặc hiệu với KN
® Phát hiện phức hợp KN-KT bằng cộng hợp KT
khang IgG gan men
Trang 22
PHƯƠNG PHÁP GIẢN TIẾP
WESTERN BLOT - nguyên lý
gel radiolabeled antibodies are l4, transferred to it wth Nyton oO Bands are
specific antibodies exposed to film Exposed on Film
Trang 23
CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIẢN TIẾP
WESTERN BLOT- đọc kết quả
® Âm tính : không có băng nào
® Dương tính : có ít nhất 2 băng tương ứng
với protein vỏ
HIV1: gp 160, gp 120, gp 41 HIV 2 : gp 140, gp 125, gp 36
® Chưa xác định : có băng ở vị trí khác tiêu
chuân dương tính
Trang 24CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP GIẢN TIẾP
WESTERN BLOT- đọc kết quả
Trang 26® Phát hiện sớm HIV (giai đoạn cửa số)
® Theo dõi diễn tiễn bệnh
® Đánh giá hiệu quả điều trị
® Nghiên cứu khoa học
Trang 27CÁC PHƯƠNG PHÁP XN HIV
PHƯƠNG PHÁP TRỰC TIẾP
Gom cac XN
® Phân lập virus bằng nuôi cây tế bào
® Phát hiện RNA của virus hoặc DNA trong tế
bào nhiễm (PCR)
® Phát hiện KN p24 của virus trong máu
Trang 28LỰA CHỌN KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM
Trang 29LỰA CHỌN KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM
Chiến lược XN của Bộ Y tế
Chiên lược XN 1: áp dụng trong an toàn
truyên máu
® Một XN sàng lọc đơn giản dương tính —›
loại bỏ mẫu máu
® Các XN sử dụng : ELSA, Serodia, test
nhanh
Trang 30LỰA CHỌN KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM
Chiến lược XN của Bộ Y tế
Chiên lược XN 2: áp dụng giám sát trọng
điêm
® Hai XN với kỹ thuật khác nhau
© XN dương tính khi cả 2 XN đều dương tính
Trang 31LỰA CHỌN KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM
Chiến lược XN của Bộ Y tế
Chiến lược XN 3: áp dụng đề chắn đoán HIV
© Ba XN voi ky thuật khác nhau
© XN dương tính khi cả 3 XN đều dương tính
Trang 32LỰA CHỌN KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM
Trang 33LỰA CHỌN KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM
Trang 34LỰA CHỌN KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM
Nhận định kết quả
Các phương pháp XN gián tiếp
se Mẫu thử âm tính lần đầu —› Kết luận âm
tính
® Mẫu HT được coi là dương tính khi mẫu đó
dương tính cả 3 lân XN bằng 3 loại sinh phâm với nguyên lý và chuân bị KN khác
nhau
Trang 35LỰA CHỌN KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM
Nhận định kết quả
Các phương pháp XN trực tiếp
® Dương tính —›Kết luận dương tính
® Âm tính — Kết luận âm tính