BÁO cáo THỰC HÀNH THỰC HÀNH hóa SINH phản ứng kết tủa thuận nghịch protein thí nghiệm 1 kết tủa bằng muối trung tính

HIỆN TƯỢNG THÍ NGHIỆM Phản ứng kết tủa thuận nghịch protein Thí nghiệm 1: Kết tủa bằng muối trung tính - Chuẩn bị 1 ống nghiệm chứa 5ml dung dịch lòng trắng trứng, 5ml dung dịch amoni su

TRƯỜNG ĐẠI HỌC THỦ DẦU MỘT

VIỆN PHÁT TRIỂN ỨNG DỤNG

BÁO CÁO THỰC HÀNH

THỰC HÀNH HÓA SINH

SV THỰC HIỆN: Nguyễn Thị Mai Linh

Nguyễn Hà Khả Tú Nguyễn Ngọc Kim Chi Giang Quế Anh

NĂM HỌC : 2021-2022

HIỆN TƯỢNG THÍ NGHIỆM Phản ứng kết tủa thuận nghịch protein Thí nghiệm 1: Kết tủa bằng muối trung tính

- Chuẩn bị 1 ống nghiệm chứa 5ml dung dịch lòng trắng trứng, 5ml dung dịch amoni sunfat bão hòa, để 5 phút lọc (thấm giấy lọc bằng amoni sunfat trước khi lọc), lắc đều thu được kết tủa globulin tách riêng anbumin ra

- Khi thu được dịch lọc là 4ml cho 3g tinh thể amoni sunfat, lắc đều ta thu được anbumin kết tủa

- Cuối cùng, thêm 2-3 ml nước cất, lắc đều thấy kết tủa tan dần Kết quả cho thấy rằng:

Thí nghiệm 2: Kết tủa bằng dung môi hữu cơ

Chuẩn bị 2 ống, thêm mỗi ống tương ứng 1ml dung dịch lòng trắng trứng 1%, làm lạnh trong nước đá

- Ống 1: thêm 2 ml ethanol 96% lạnh và vài giọt NaCl bão hòa, ta thu được kết tủa màu trắng đục

- Ống 2: thêm 2 ml acetone lạnh và vài giọt NaCl bão hòa, ta thu được kết tủa màu trắng đục

Thí nghiệm 3: Kết tủa bằng dung môi hữu cơ

Chuẩn bị 2 ống nghiệm, thêm mỗi ống

tương ứng 1 ml dung dịch lòng trắng trứng

1%

- Ống 1: Thêm 2ml dung dịch ethanol 96& và vài giọt NaCl bão hòa, sau khi kết tủa lắng đáy, đổ bỏ dung môi, thêm nước vào, lắc đều, có hiện tượng tách lớp trong dung dịch

- Ống 2: Thêm 2 ml aceton và vài giọt NaCl bão hòa có

sự đông tụ protein tạo kết tủa trắng

Sự biến tính protein:

Thí nghiệm 4: Tác dụng của nhiệt độ

Chuẩn bị 5 ống nghiệm, thêm mỗi ống lần lược 2 ml dung dịch lòng trắng trứng 5%

- Ống 1: đun lòng trắng tứng ở nhiệt độ cao xuất hiện kết tủa trắng

- Ống 2: cho 1 giọt acid acetic 1%, đun, tủa nhanh và nhiều hơn, xuất hiện kết tủa trắng, dung dịch bị sệt và keo lại

- Ống 3: cho 0.5 ml acid acetic 10%, đun không tủa, dung dịch xuất hiện màu trắng đục

- Ống 4: cho 0,5 ml dung dịch NaOH 10% đun không tủa, dung dịch xuất hiện kết tủa trắng

- Ống 5: cho 0.5 ml acid acetic 10% + 3-4 giọt NaCl bão hòa, đun tủa nhanh nhiều xuất hiện kết tủa dạng keo

Thí nghiệm 5: Kết tủa protein bằng axit

vô cơ đặc

Xảy ra hiện tượng kết tủa, bốc khói và kết tủa

Thí nghiệm 6: Kết tủa protein bằng axit hữu cơ

- Ống 1: có kết tủa xuất hiện

- Ống 2: BỎ

Thí nghiệm 7: Kết tủa protein bằng muối kim loại nặng

- Ống 1: xuất hiện kết tủa màu vàng nâu

- Ống 2: xuất hiện kết tủa màu xanh lam

- Ống 3: xuất hiện kết tủa màu trắng đục

Thí nghiệm 8: Kết tủa bằng các thuốc thử ankaloit

- Ống 2: BỎ

- Ống 3: xuất hiện kết tủa màu vàng nhạt

Các phản ứng màu của axit amin và protein

Thí nghiệm 9:

Phản ứng màu biure: Tạo dung dịch keo

trắng và kết tủa màu xanh tím

Dụng cụ gồm:

Hóa chất gồm:

+ CuSO4 1%

Lấy 1 ít tinh thể ure đem đun lửa nhỏ, ban đầu nóng chảy, bắt đầu cứng thì ngừng đun để nguội, sau đó tiếp tục thêm NaOH 10% và lắc tan, cuối cùng cho 1 giọt CuSO4 1% và quan sát phản ứng

Phản ứng với protein:

- Đun ure có xuất hiện khói trắng

- Thêm NaOH làm dung dịch tan không hoàn toàn, hơi ngả vàng

- Nhỏ CuSO4 dung dịch chuyển sang hồng nhạt

Thí nghiệm 10: Phản ứng với nihidrin

Xuất hiện kết tủa màu nâu đỏ.

Thí nghiệm 11: Phản ứng Pauli phát hiện histidin, tirozin

Xuất hiện dung dịch màu da cam