Di truyền học và ứng dụng - Chuyên san Công nghệ sinh học — §ố4—2008 SUMMARY ._:_ QPTIMUM CONDITIONS FOR MYCELIUM CULTIVATION AND THEIR -__ANTICANCER CELLS ACTIVITIES OF AQUEOUS EXTRACT
Trang 1Di truyền học và ứng dụng - Chuyên san Công nghệ sinh học — §ố4—2008
SUMMARY ._:_ QPTIMUM CONDITIONS FOR MYCELIUM CULTIVATION AND THEIR
- ANTICANCER CELLS ACTIVITIES OF AQUEOUS EXTRACT FROM CULTIVATED
BIOMASS OF CORDYCEPS MILITARIS (L.) LINK IN VITRO ISOLATED FROM
WILD SAMPLE
Le Thi Hoang Yen!, Nguyen Huong Quynh’, Duong Van Hop’,
Le Mai Huong’, Nguyen Lan Dung!
1 Institute of Microbioloy and Biotechnology- Vietnam National University, Ha Noi
2 Vietnam Academiy of Science and Technology DTM has been isolated from a wild Cordycep sample collected in Tay Tang- China The
selected fungus was subjected to polyphasic taxonomic, optimum conditions for harvesting
biomass and anticancer cells activity study
It was identified as Cordycep militaris based on morphology and phylogenetic analysis
Medium MT5, pH6 at 25°C, after 5-7 days were DTM’s optimum cultural conditions for
harvesting these selected fungal biomass
The hot water extract from Cordycep militaris DTM biomass demonstrated a potential
cytotoxic effect against the proliferation of the human cancer cells with an ICs of 30 ug/ml to
Hep-2, RD, LU More ever, the alcohol extract of its biomass also demonstrated a potential
cytotoxic effect against the proliferation of the human cancer cells with an ICso of 0.53-94 pg/ml
to SW872, HTC, HT29 The other human cancer cells A549, COLO 205, Hep 3B, Huh7, PCL
can be inhibited the proliferation with IC50 > 100yg/ml
With high potential in anticancer cells, that the Cordyceps militaris extract may therefore
have therapeutic potential for function food and medicinal industrial which aid to cure cancer
patient in Vietnam in the next study
J Genetics and Applications — Special Issue: Biotechnology a
Institute of Microbiology and Biotechnology, Vietnam National University, Hanoi
Trang 21I truyen nọc va ng dụng — Chuyên san Công nghệ sinh học Số 4— 2008
NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ TRONG ĐIÈU KIỆN PHÒNG
THI NGHIEM CUA DICH CHIET TU SINH KHOI NAM CORDYCEPS MILITARIS (L.)
LINK PHÂN LẬP TỪ TỰ NHIÊN
Lê Thị Hoàng Yến! ; Nguyễn Hương Quỳnh!, Dương Văn Hợp) `
Lê Mai Hương), Nguyễn Lan Ding’
1 Vién Vi sinh vat va Céng nghé Sinh hoc- Dai hoc Quéc gia Hà Nội
I.MỞ ĐẦU Trong thiên nhiên, Nhộng Trùng Thảo
phát triển trên ấu tring Bombyx mori va trén
nhiều loại ấu trùng của các côn trùng
khác Sau khi ăn hết chất đỉnh dưỡng bên
trong các ấu trùng nói trên loài nâm này sẽ
mỌC ra một quả thể (còn gọi là đệm nâm-
stroma) gần giông như Đông Trùng Hạ Thảo
và đâm lên khỏi mặt đất (vào mùa hè)
Nhộng Trùng Thảo được coi là thần dược ở
Trung Quốc và các nước châu A, có tác
dụng kháng khối u, ức chế các đòng tế bào
ung thư máu của người [8,9] Không những
thé Nhộng Trùng Thảo còn được chứng
minh là có khả năng kìm hãm sự chống lão
hóa, giảm nguy cơ đái tháo đường[1 1], kích
thích sự phát triển của tế bào nguôn từ tủy
xương [4], chữa hen Suyén[6],
Bên cạnh đó nâm Nhộng Tring Thao
còn có khả năng kích thích đến tế bào
Leydig, sinh steroid, tăng hàm lượng
testosterone ở chuột [2], kim ham sy hinh
thành mạch máu mới của tế bào ung thư
màng phôi chuột [S]_
Trong khuôn khổ nghiên cứu này, chúng
tôi tiến hành phân lập nâm Nhộng Trùng
'Thảo từ mẫu tự nhiên, phân loại, nghiên cứu
điều kiện nuôi cấy thích hợp thu sinh khối
trong quy mô phòng thí nghiệm, sau đó thử
khả năng sinh các hoạt tính dược học ức chế
các dòng tế bào ung thư người từ dịch chiết
nước nóng từ sinh khối của loại nâm này
Đây được coi là một bước khởi đầu quan
trọng trong việc phát triển thực phẩm chức
năng hỗ trợ cho các bệnh nhân mắc bệnh
-_ hiểm nghèo va ngành công nghiệp được
phẩm Việt Nam
I NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
1 Nguyên liệu: „
Vi sinh vat va té bao:
2 Viện Hóa học các Hợp chất tự nhiên
- Chủng giống Nhộng Trùng Thảo được phân lập từ mẫu thiên nhiên lấy từ vùng Tây Tạng- Trung Quốc và bảo quản trong Bảo tàng Giống chuẩn Vi sinh Vật - Viện Vi sinh vật và Công nghệ Sinh học- Đại học Quốc gia Hà Nội, kí hiệu DTM
- Các dòng tế bào Hep-2: ung thư gan, RD: ung thu mang tim, Lu: ung thu phổi được cung cấp từ Bảo tàng giống chuẩn
Vị sinh vật Mĩ
- A549, COLO 205, HTC, Hep 3B, HT29, Huh7, PCL và SW872 mẫu tế bào này được cung cấp từ Trung tâm bảo tàng và nghiên cứu tài nguyên sinh học của viện nghiên cứu và phát triển Công nghệ thực phẩm Tân Trúc, Đài Loan
MT! (g/l): Dau tuong- 200; Glucose- 20;
KH;PO¿- 1
MT2 (g/l): Glucose- 10; Pepton- 10; Cao
nấm men- 1; KH;PO - l; MgSO¿- 0,5;
Biotin- 0,005
Ammomaspartame- 1; KH>PO,- 1,25:
MgSO¿- 0,3; KCI- 0,5; NaNOz:- 0,5
MT4 (g/l): Bột đỗ tương- 20; Glucose- 20;
Cao nắm men- 15; Pepton- 2
MTS g/1: Bột đỗ tương- 20; Đường kính- 20;
(NH4)2SO4- 2,5; CaCO¿;- 2; MgSO¿.7H;O- 1-2
MT6 (g1): Khoai tây- 200; KH;POa- 3;
MgSO.7H¿O- 2.5 (Khoai tây gọt vỏ, sắt
miếng nhỏ, đun sôi 20 phút, lọc lây dịch):
MTX1(%): gao- 93, glucose- 2, peton- 2, bét nhéng tam- 2,5, KH2PO,-0,2, MgSO, - 0,3, Vitamine BI- (Be 6 viên), nước vừa đủ
_MTX2 (g/0.1): bột ngô- 60, gạo- 10,
CaCOz:- 1.5
2 Phương pháp:
a, Phân lập:
-Phân lập bằng phương pháp rửa bề mặt [1]
b, Phân loại:
J Genetics and Applications — Special Issue: Hotecimingy Institute of Microbiology and Biotechnology, Vietnam National University, Hanoi -