SENIMER báo cáo kỹ THUẬT KIỂM NGHIỆM dược chủ đề PHƯƠNG PHÁP điện DI

Hiện tượng liên quan đến sự dichuyển của các protein, phân tử haytiểu phân tích điện hòa tan hoặc phântán trong dung dịch điện giải khi códòng điện đi qua... NGUYÊN TACKhi các phân tử tí

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC Tự NHIÊN

SENIMER BÁO CÁO KỸ THUẬT KIỂM NGHIỆM DƯỢC

Chủ đề- PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN DI

SINH VIÊN THựC HIỆN

1 Lê Thị Ngọc Trâm B1806589

GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN

TS Nguyễn Quốc Châu Thanh

2 Nguyên Thị Kim Ngân B1806546

3 Hồ Thị Yến Nhi B1907335

4 Trần Khánh Tiên B1907369

5 Nguyên Thí Hồng Ngọc B1907329

2 NGUYÊN TẮC

Hiện tượng liên quan đến sự di

chuyển của các protein, phân tử haytiểu phân tích điện hòa tan hoặc phântán trong dung dịch điện giải khi códòng điện đi qua

2 NGUYÊN TAC

Khi các phân tử tích điện được đặt trong một điện

trường, chúng sẽ dịch chuyển về các cực (+) hoặc(-) tùy theo điện tích của chúng

* Protein có điện tích thực hoặc dương hoặc âm,

còn các nucleic acid có một điện tích âm khôngđổi nhờ khung phosphate của mình và vì thế chỉdịch chuyển hướng đến cực dương

Điện di trong dung dịch tự do

a Điện di trong dung dịch tự do

íữNguyên tắc : Dung dịch đệm của \

các Protein trong một ống hình chữ

U dưới tác dụng của dòng điện sẽhình thành nên các lớp Protein cólinh độ giảm dần

_99

Phần dichuyểnnhanh nhất

của Protein

sẽ tách rõrệt khỏi

Protein khácKiểm tra sựdịch chuyển

KET

các lớp biên

bằng hệ

thống quanghọc sẽ cho

dữliệu để tínhtoán linh độ

điện di

Các thôngtinh về mặtđịnh tính vàđịnh lượngthành phần

Protein

b Điện di trên chất giá (điện di vùng)

Giấ

y

Agarose

CÁC CHẤ T GIÁ

Acetat cellulos

e Thạch

agar

agar-Polyacry lamid

Gel tinh bôt

Agarose: polysaccharide tự nhiên, phân

lập từ tảo biển, kích thước lỗ gellớn,

thích hợp phân tách phân tử kích thước

lớn

^Dùng để phân tách Protein > 500 kDa

s DNA có kích thước > 2000 bp (base

pair)

Agarose gel

Điện di agarose gel

Thiết bị điện di agarose gel

gồm 3 bộ

phận cơ bản: nắp, khay vận hành và

buồng điện di.

gel, khuôn đổ gel, lược

+ Buồng điện di: là nơi đặt gel trong

quá trình điện di Buồng có rãnh để cài

lược, hai điện cực tạo ra điện trường

trong dung dịch.

Điện di agarose gel

TRINH QUY

ĐIEN DI

Được hình thành bởiquá trình đồng trùnghợp giữa acrylamide

và cross linker, thôngthường là N,N’

methylenebisacrylamide

Điện di Polyacrylamide gel

^Phân tách các acid amin, protein, DNA trong dung dịch cần phân tách.

I 1 I ì l

Trong dd đệm có pH khác vớipHi của Protein, các phân tửProtein tích điện sẽ chuyển

dịch về các điện cực trái dấu

• • •

khi có dòng điện một chiều

chạy qua dd

Điện di Protein

Tốc độ di chuyển của protein trong điện

trường

V = E.Q/f Trong đó:

V: tốc độ di chuyển E:Cường độ điện trường Q: Điện tích của protein f: hệ số ma sát, tùy thuộc vào khối lượng, hình dạng protein và độ nhớt

trường.

Các yếu tố ảnh hưởng đến điện di Protein

a Điện di protein huyêt thanh trên giây

Sơ đô chậu điện di protein huyêt thanh trên giây

a Điện di protein huyêt thanh trên giây

Kết quả: Điện di protein huyết thanh trên giấy tách được 5-6

thành phần: albumin, globulin 1 , 2 , 1 , 2 và

a Điện di protein huyêt thanh trên giây

b Điện di protein huyêt thanh băng pp

b Điện di protein huyết thanh bằng pp

SDS Polyacrylamide

-www.yourwebsite.com